具有同时分解多种真菌毒素能力的地衣芽孢杆菌及其应用

本发明属于生物控制真菌毒素的；更具体地，本发明涉及具有同时分解多种真菌毒素能力的地衣芽孢杆菌及其应用。

背景技术：

1、真菌毒素是真菌产生的次级代谢产物，可污染粮食、水果、食品、饲料等多种农产品。严重威胁食品安全、危害人畜健康。真菌毒素摄入可能对人和动物引起各种慢性和急性效应，例如肝毒性、遗传毒性、免疫抑制、肾毒性、致畸或致癌作用。真菌毒素种类较多，包括黄曲霉和寄生曲霉等产生的双呋喃环类毒素——黄曲霉毒素(aflatoxin，afs)、镰刀菌属(fusarium)产生的间苯二甲酸内酯——玉米赤霉烯酮(zearalenone，zen)、链格孢属真菌产生的交链孢酚(alternariol，aoh)和交链孢酚单甲醚(alternariol monomethyl ether，ame)等。

2、zen主要存在于谷物，如玉米、小麦、水稻、大麦、高粱、大豆、燕麦及其制品中，且它对环境变化和热处理的敏感性较低，因此能够在食品的储存和加工过程中保持稳定。被污染的饲料被饲喂给动物时，动物体内及奶制品也会不可避免地含有zen。zen的结构与雌激素很相似，它会与各种雌激素受体(estrogen receptor，ers)结合，因此，低剂量的zen会干扰生理代谢反应，产生生殖毒性。zen通过dna片段化、微核形成、dna加合物形成、染色体畸变和细胞凋亡来发挥其遗传毒性。它能够诱导肝癌的发生，国际癌症研究机构(international agency for research on cancer，iarc)将zen列为第3类致癌物。此外，zen还具有一定的免疫毒性和肾毒性，在体内和体外均可引起免疫参数的改变和慢性进行性肾病。近年来，研究人员们还发现zen能够破坏肠道屏障，从而导致肠道对毒素的抵抗力下降，进而影响个体的免疫功能。欧盟委员会2006/576/ec中发布了饲料原料及谷物及产品中zen的允许量不得超过2000μg/kg，中国颁发的国家标准gb13078.2-2006对配合饲料玉米中的zen进行了限量规定不得超过500μg/kg。

3、作为重要的植物病原真菌，链格孢属真菌能侵染4000多种植物，包括小麦、玉米、大米、苹果、草莓、橘子、梨、大枣、番茄、辣椒、胡萝卜、油菜籽、葵花等粮食和经济作物。这种侵染可发生在农作物种植、采后、运输和储藏阶段，通常引起黑斑病和腐坏，并引起链格孢毒素的污染。aoh具有拓扑异构酶毒性，会造成细胞内dna双链断裂(dna double strandbreak，dsb)，因而具有致突变和致癌毒性，会引起细胞的诱变和转化；能够减弱细胞增殖能力，阻断细胞周期。ame能增加凋亡细胞的数量。除上述细胞毒性之外，aoh和ame在动物体内还具有亚急性毒性、致畸性和胚胎毒性，aoh能引发免疫系统紊乱，还能作为雌激素类似物影响个体的生育能力。此外，aoh和ame在细胞毒性方面还能发挥一定的协同作用。

4、对于真菌毒素的脱毒处理，按照原理可以分为三大类：物理脱除、化学脱除和生物脱除。物理脱除的原理是利用沸石、膨润土、蒙脱石、介孔分子筛、大孔树脂、纤维素、壳聚糖或其他纳米材料等吸附真菌毒素从而减少动物体对毒素的吸收量。化学脱毒是利用热处理、辐射、电化学、化学添加剂等技术或化学物质来改变真菌毒素的化学结构，降低真菌毒素对生物的毒害作用。生物脱除主要是通过微生物或酶来完成对真菌毒素的吸附或降解，相比前两种方法，更能够保护食品或饲料中的营养物质，专一性高，不易引入新的有毒物质。因此，生物脱毒法是最具有前景的真菌毒素脱毒法。

5、目前已知的降解酶大都只能应用于单一种类的真菌毒素，而实际生活中，食品或饲料中极易受到多种真菌的同时侵染，从而产生多种真菌毒素的同时污染，这些毒素可能出现毒性上的协同作用，引起更强的毒害作用。因此，研发能够同时降解多种真菌毒素的生物降解产品刻不容缓。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供具有同时分解多种真菌毒素能力的地衣芽孢杆菌及其应用。

2、在本发明的第一方面，提供一种经分离的菌株，该菌株为地衣芽孢杆菌(b.licheniformis)，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为cgmcc no.25368。

3、在一种或多种实施方式中，所述菌株的16s rrna的核苷酸序列如seq id no:1所示。

4、在一种或多种实施方式中，所述的菌株的细胞培养物具有降解真菌毒素的能力。

5、在一种或多种实施方式中，所述的真菌毒素为：玉米赤霉烯酮(zen)，交链孢酚(aoh)和/或交链孢酚单甲醚(ame)。

6、在一种或多种实施方式中，该菌的生长曲线在10h左右到达平台期、之后保持稳定生长，具有高的生长速率和传代活性。

7、在一种或多种实施方式中，所述经分离的菌株对玉米赤霉烯酮，交链孢酚和交链孢酚单甲醚三种真菌毒素均具有降解作用。

8、在一种或多种实施方式中，所述经分离的菌株对能够有效控制处理对象中三种真菌毒素含量。

9、在一种或多种实施方式中，所述经分离的菌株将玉米赤霉烯酮，交链孢酚和/或交链孢酚单甲醚转化为毒性更低的降解产物。

10、在一种或多种实施方式中，所述经分离的菌株通过氧化作用发挥降解作用。

11、在一种或多种实施方式中，所述细胞培养物包括：菌液、细胞代谢产物、细胞培养上清或细胞裂解产物。

12、在本发明的另一方面，提供所述的经分离的菌株或其细胞培养物的应用，用于：降解真菌毒素，或制备降解真菌毒素的组合物；降低真菌毒素的毒性，或制备降低真菌毒素的毒性的组合物；所述的真菌毒素为：玉米赤霉烯酮，交链孢酚和/或交链孢酚单甲醚。较佳地，所述细胞培养物包括：菌液、细胞代谢产物、细胞培养上清或细胞裂解产物。

13、在一种或多种实施方式中，所述降解真菌毒素不以治疗疾病为直接目的，为非治疗性的降解方法。

14、在一种或多种实施方式中，所述降低真菌毒素的毒性不以治疗疾病为直接目的，为非治疗性的方法。

15、在一种或多种实施方式中，所述降低真菌毒素的毒性包括降低真菌毒素的细胞毒性。

16、在一种或多种实施方式中，所述真菌毒素为玉米赤霉烯酮，所述经分离的菌株将之降解为15-oh-zen和/或13-oh-zen-quinone。

17、在一种或多种实施方式中，所述真菌毒素为交链孢酚，所述经分离的菌株将之降解为10-oh-aoh和8-oh-aoh-quinone。

18、在一种或多种实施方式中，所述真菌毒素为交链孢酚单甲醚，所述经分离的菌株将之降解为10-oh-ame和8-oh-ame-quinone。

19、在本发明的另一方面，提供一种用于降解真菌毒素或降低真菌毒素的毒性组合物，所述组合物包含所述的菌株。

20、在本发明的另一方面，提供一种用于降解真菌毒素或降低真菌毒素的毒性组合物，所述组合物包含所述的细胞培养物。

21、在一种或多种实施方式中，所述的组合物包括但不限于：食品组合物、农药学组合物、饲料组合物、医药组合物、保健品组合物等。

22、在一种或多种实施方式中，所述经分离的菌株或其细胞培养物可被添加于食品、饲料、农药等中。

23、在本发明的另一方面，提供一种降解真菌毒素或降低真菌毒素的毒性的方法，包括：应用所述的经分离的菌株或所述的细胞培养物对需要降解的对象进行处理；所述的真菌毒素为：玉米赤霉烯酮，交链孢酚和/或交链孢酚单甲醚。

24、在一种或多种实施方式中，所述真菌毒素为玉米赤霉烯酮，所述经分离的菌株将之降解为15-oh-zen和/或13-oh-zen-quinone。

25、在一种或多种实施方式中，所述真菌毒素为交链孢酚，所述经分离的菌株将之降解为10-oh-aoh和8-oh-aoh-quinone。

26、在一种或多种实施方式中，所述真菌毒素为交链孢酚单甲醚，所述经分离的菌株将之降解为10-oh-ame和8-oh-ame-quinone。

27、在本发明的另一方面，提供一种用于降解真菌毒素或降低真菌毒素的毒性的试剂盒(包括药盒或包装盒)，其包含：所述的经分离的菌株。

28、在本发明的另一方面，提供一种用于降解真菌毒素或降低真菌毒素的毒性的试剂盒(包括药盒或包装盒)，其包含：所述的细胞培养物。

29、在本发明的另一方面，提供一种用于降解真菌毒素或降低真菌毒素的毒性的试剂盒(包括药盒或包装盒)，其包含：所述的组合物。

30、在一种或多种实施方式中，所述的经分离的菌株、细胞培养物或组合物被置于容器中，进一步置于试剂盒(药盒或包装盒)中。

31、本发明的其它方面由于本文的公开内容，对本领域的技术人员而言是显而易见的。