一株具有促进牧草生长和低温堆肥发酵的多功能荧光假单胞菌

本发明涉及一株既能促进牧草生长，又能在低温条件下促进堆肥发酵的多功能荧光假单胞菌(pseudomonas fluorescens)，属于农业生物技术科学领域。

背景技术：

1、畜牧业会产生大量粪肥，粪便返回到草场，是维持草场土壤营养平衡的重要举措。生粪中含有大量有害微生物，寄生虫卵等，直接施用会导致病虫害的传播，污染环境；同时，生粪直接施用于土壤后，粪便发酵产生的nh3和h2s等有毒物质会导致“烧苗”现象，不利于作物的生长。因此，需要对生粪进行无害化处理后再作为有机肥使用。高温好氧堆肥是处理畜禽粪便较为经济有效的处理方式，接种外源微生物可加快高温好氧堆肥进程，可缩短发酵周期、高温持续时间延长、减少氮损失、提高堆肥品质，加快纤维素的降解，使堆肥快速进入腐熟阶段。但是，我国的草场多在北方，冬季气温低，持续时间长，致使堆肥无法升温，无法完成高温发酵，或发酵不彻底，从而无法杀灭堆肥中的各类病原菌，导致堆肥发酵无法启动、发酵周期延长、降低堆肥质量，开发能在低温条件下启动发酵的腐熟剂具有重要价值。另一方面，普通堆肥腐熟剂基本上都只关注堆肥能否升温，不关注堆肥发酵菌本身对植物的影响。堆肥成熟后，主要是堆肥腐熟后，利用堆肥本身的营养促进植物生长。而利用植物益生菌作为腐熟剂，在堆肥发酵过程中，植物益生菌可以通过产生对植物有益的次生代谢产物，以及益生菌在堆肥中，会有部分残留，在堆肥施用到土壤中后，会在土壤中进一步发生促进植物生长的作用。这样，相较于直接培养植物益生菌，益生菌的培养成本更低。同时，由于堆肥发酵时间较长，益生菌产生的次生代谢产物更丰富。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种既能促进牧草生长，又能在动低温条件下，快速启动堆肥发酵的菌株，既解决冬季堆肥发酵困难的问题，又能使堆肥具有更加广泛的生理活性，有利于农业生产。

2、本发明采用如下技术方案实现。

3、一株细菌，所述细菌为荧光假单胞菌pseudomonas fluorescens北6tlr1；保藏单位为：广东省微生物菌种保藏中心；保藏地址为：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼；保藏编号为gdmcc no:62684；保藏时间为2022年8月4日。

4、本发明所述细菌的应用为使用菌株本身促进牧草生长。

5、本发明所述细菌在低温条件下使用该细菌作为发酵剂应用于堆肥发酵。

6、本发明所述细菌的应用为施用完成发酵的堆肥促进盆栽黑麦草的生长。

7、本发明所述细菌发酵剂的制备方法步骤为：步骤1：将pseudomonas fluorescens北6tlr1进行活化培养：将菌种北6tlr1在lb培养基上培养，15～30℃恒温培养箱中黑暗培养1-3天，获得活化后的菌株；

8、步骤2：将活化后的菌株进行一次发酵培养：将活化后的菌株于lb培养基中进行一次发酵获得种子液，培养条件为：温度为15～30℃，转速为180～240r/min下振荡发酵培养18～72h；

9、步骤3：将一次发酵培养后的种子液进行二次发酵培养：将所述一次发酵培养获得的种子液以4～10wt％的接种量接种于lb培养基中进行二次发酵获得培养液，培养条件为：温度为15～30℃，转速为180～240r/min下振荡发酵培养18～72h制得发酵剂。

10、本发明所述发酵剂的使用方法为，将发酵剂均匀撒到堆肥原料上，翻拌均匀，用量为堆体质量的0.2％-4％。

11、本发明所述发酵剂的使用方法为，将发酵剂加入灭菌后的辅剂，低温干燥后制成菌粉，在堆肥时按比例加入至堆肥堆体中。

12、本发明所述辅剂为麦麸。

13、本发明该细菌从中国云南省昭通市大关县牧草根际土壤中分离得到。

14、本发明该细菌的培养基为lb培养基。

15、本发明该细菌能够在0℃条件下生长，且能够在堆肥中生长，用于在低温条件下启动堆肥发酵。

16、本发明该细菌发酵剂能用于低温堆肥发酵。

17、本发明的有益效果为：1、该菌株能够在牛粪中生长，可以用于牛粪的堆肥发酵；2、该菌株能在0℃条件下生长，可以在低温条件下启动堆肥发酵；3、该菌株对黑麦草具有良好的促生长效果，故采用本发明制备的堆肥相对于普通堆肥腐熟剂，比普通堆肥更好的促进牧草生长的效果。

18、下面结合附图和具体实施方式本发明做进一步解释。

技术特征：

1.一株细菌，其特征在于，所述细菌为荧光假单胞菌pseudomonas fluorescens北6tlr1；保藏单位为：广东省微生物菌种保藏中心；保藏地址为：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼；保藏编号为gdmcc no:62684；保藏时间为2022年8月4日。

2.根据权利要求1所述细菌的应用，其特征在于，所述细菌的应用为使用菌株本身促进牧草生长。

3.根据权利要求1所述细菌的应用，其特征在于，在低温条件下使用该细菌作为发酵剂应用于堆肥发酵。

4.根据权利要求1所述细菌的应用，其特征在于，所述细菌的应用为施用完成发酵的堆肥能够显著的促进盆栽黑麦草的生长。

5.根据权利要求3所述细菌的应用，其特征在于，所述细菌作为发酵剂的制备方法步骤为：

6.根据权利要求3或5所述细菌的应用，其特征在于，所述发酵剂的使用方法为，将发酵剂均匀撒到堆肥原料上，翻拌均匀，用量为堆体质量的0.2％-4％。

7.根据权利要求3或5所述细菌的应用，其特征在于，所述发酵剂的使用方法为，将发酵剂加入灭菌后的辅剂，低温干燥后制成菌粉，在堆肥时按比例加入至堆肥堆体中。

8.根据权利要求7所述细菌的应用，其特征在于，所述辅剂为麦麸。

技术总结
本发明涉及一株具有促进牧草生长并能在低温条件下促进堆肥发酵的多功能荧光假单胞菌，该细菌为假单胞菌属，拉丁名为Pseudomonas fluorescens北6TLR1；保藏编号为GDMCC No:62684；从云南省昭通市大关县牧草根际土壤中筛选分离得到。该菌株能促进牧草生长，并能在低温条件下启动堆肥发酵。本发明的有益效果为：1、该菌株能够在牛粪中生长，可以用于牛粪的堆肥发酵；2、该菌株能在0℃条件下生长，可以在低温条件下启动堆肥发酵；3、该菌株对黑麦草具有良好的促生长效果，故采用本发明制备的堆肥相对于普通堆肥腐熟剂，比普通堆肥更好的促进牧草生长的效果。

技术研发人员：王兴红,陈穗云
受保护的技术使用者：云南大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/12