多肽及其在修复黏膜损伤或皮肤损伤上的应用的制作方法

本发明涉及多肽及其在修复黏膜损伤或皮肤损伤上的应用，本发明的多肽与已知多肽无同源性，而且能够在体内和体外均稳定存在，具有调控干细胞增殖和分化，修复黏膜损伤或皮肤损伤的效果，以及涉及所述新型多肽通过调控干细胞增殖和分化修复黏膜损伤或皮肤损伤的用途，以及用于预防、减轻或治疗胃肠疾病的用途。

背景技术：

1、皮肤损伤和/或黏膜损伤是很多疾病的共同病理特征。皮肤损伤是指正常皮肤(组织)在外界致伤因子如外科手术、外力、热、电流、化学物质、低温以及机体内在因素如局部血液供应障碍等作用下所导致的损害。皮肤损伤常伴有皮肤完整性的破坏以及一定量正常组织的丢失，同时，皮肤的正常功能受损。也称为伤口或者创伤。目前有包括碱性成纤维生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子、粒-巨噬细胞集落刺激因子及生长激素等蛋白质/多肽药物具有明显的修复创面、护肤、抗皱和防衰老作用，但这些蛋白质/多肽药物的氨基酸序列较长导致制备成本高、稳定性较差等缺点，因而其应用受到了一定的限制。

2、人体黏膜是指呼吸系统、消化系统、生殖泌尿系统等腔道或囊状肌性器官的内层，是仅次于皮肤的人体第二大屏障，包括口腔、咽、气管、食道、胃、肠道、阴道、膀胱等，这些器官的管壁或囊壁均有共同的分层规律，又具有与其功能相适应的特点，其胚胎起源、组织结构、病理过程、临床表现、愈后等均有共同特点。

3、慢性胃炎是一种胃黏膜慢性炎症，是消化内科的常见病和多发病，临床上将不同原因引起的胃黏膜慢性炎症(即在病理上表现为单核细胞和淋巴细胞浸润)和(或)腺体萎缩性病变称为慢性胃炎。以胃黏膜上皮和腺体萎缩为特征的慢性萎缩性胃炎(chronicatrophic gastrifis,cag)，其起病隐匿、病程长、症状无特异性、难以治愈，在慢性胃炎中占11％～31％，好发于中老年人群，发病和年龄有一定的关联但与性别没有关系，发病缓慢且病势缠绵，迁延难愈，治疗棘手。慢性萎缩性胃炎是胃癌发生发展重要阶段被视为胃癌前病变，1978年世界卫生组织who)已将cag列为癌前状态，其常伴假幽门腺化生和肠上皮化生，或不典型增生阶段等癌前病变。尤其是伴有弥漫的肠上皮化生或不典型增生者，癌变可能性更大，业界大多数专业人士都赞同通过慢性浅表性胃炎、萎缩性胃炎、肠上皮化生、异型增生、肠型胃癌这样的发展模式。故早期准确的诊断和治疗对慢性萎缩性胃炎患者有着重要的意义。目前现代医学治疗本病主要以改善症状、手术介入为主，在腺体萎缩、肠化生方面尚无良策。cag为慢性胃炎转变为胃癌的重要阶段，积极治疗cag对预防其癌变、降低胃癌发病率有着深远意义。寻求萎缩性胃炎的有效治疗方法，是更好地开展胃癌预防的重要措施之一。

4、黏膜组织的损伤临床上会导致慢性胃炎和消化道溃疡等胃肠道疾病。黏膜上皮的修复有修复(restitution)和再生(regeneration或renewal)两种不同的机制(cur.med.chem.,2008,15,3133-3144)：修复或恢复一般在损伤后几分钟内就开始，通过细胞迁移快速修复浅表病变；再生是通过干细胞和祖细胞的分化和增殖持续再生，持续数天至数月。

5、因此，需要一种体内外稳定、能够治疗皮肤和/或黏膜损伤，特别是胃肠道黏膜损伤的肽类物质。

技术实现思路

1、为了克服现有技术的不足和缺陷，本发明的目的在于提供一类新型多肽。

2、第一方面，本发明提供式(i)的化合物或其生理学上相容的盐，其中所述式(i)的化合物如下：

3、h-xaa1-xaa2-xaa3-xaa4-xaa5-xaa6-xaa7-xaa8-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu

4、-xaa9-xaa10-xaa11-xaa12-xaa13-xaa14-xaa15-xaa16-xaa17-xaa18-xaa19-xaa20-xaa21-xaa22-

5、xaa23-xaa24-xaa25-oh(i)

6、其中

7、xaa1为ala或缺失；

8、xaa2为ala或缺失；

9、xaa3为ala、arg、glu或缺失；

10、xaa4为pro、lys、ala或缺失；

11、xaa5为glu、val、asp、gln、lys、ala、pro或缺失；

12、xaa6为pro、gln、lys、val、ala或缺失；

13、xaa7为ala、leu、gly、lys、gln、glu、val、asp、pro、tyr或缺失；

14、xaa8为pro、leu、lys、glu、gly、ile、leu、val、gly、ala或缺失；

15、xaa9-xaa10-xaa11为val-lys-gln、ala-gly-leu、ala-ala-val、val-pro-ala；

16、xaa12为asp、ala、gln、lys、glu、ala或缺失；

17、xaa13为ala、leu、gly、lys、gln、asp、cys、glu或缺失；

18、xaa14为ala、leu、val、pro、gly、glu或缺失；

19、xaa15-xaa16为gly-leu、pro-leu、val-pro、pro-leu、ala-glu、ala-ala、val-pro、cys-gly或缺失；

20、xaa17为asp、leu、pro、glu或缺失；

21、xaa18-xaa19-xaa20-xaa21为val-lys-gln-asp、pro-val-pro-leu、val-pro-leu-val或缺失；xaa22-xaa23-xaa24为lys-gln-asp、val-lys-gln或缺失；

22、以及xaa25为asp或缺失；

23、化合物至少为10肽。

24、在一实施方案中，化合物选自：

25、化合物1：ala-pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、

26、化合物2：leu-pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、

27、化合物3：gly-pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、

28、化合物4：lys-pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、

29、化合物5：gln-pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、

30、化合物6：glu-pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、

31、化合物7：glu-pro-val-pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、

32、化合物8：val-pro-leu-pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、

33、化合物9：val-pro-val-pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、

34、化合物10：asp-gln-lys-pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、

35、化合物11：gln-lys-val-pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、

36、化合物12：lys-val-leu-pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、

37、化合物13：pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp-ala、

38、化合物14：pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp-leu、

39、化合物15：pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp-gly、

40、化合物16：pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp-lys、

41、化合物17：pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp-gln、

42、化合物18：pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp-asp、

43、化合物19：pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-ala、

44、化合物20：pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-gln、

45、化合物21：leu-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、

46、化合物22：lys-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、

47、化合物23：glu-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、

48、化合物24：pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-lys、化合物25：ala-gly-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、化合物26：ala-ile-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、化合物27：ala-leu-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、化合物28：ala-val-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、化合物29：leu-gly-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、化合物30：leu-ala-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、化合物31：lys-val-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、化合物32：glu-ala-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、化合物33：lys-ala-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、化合物34：ala-ala-pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、化合物35：val-lys-pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、化合物36：ala-glu-pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、化合物37：val-pro-leu-val-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、化合物38：pro-val-pro-leu-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、化合物39：pro-val-pro-leu-pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、化合物40：glu-pro-val-pro-leu-pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、化合物41：

49、ala-glu-pro-val-pro-leu-pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、化合物42：

50、ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、化合物43：pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-ala-gly-leu-asp、化合物44：pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-ala-ala-val-asp、化合物45：ala-pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-glu、化合物46：asp-pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、化合物47：pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp-leu-ala、化合物48：pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp-ala-leu、化合物49：ala-lys-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、化合物50：leu-lys-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、化合物51：lys-lys-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、化合物52：glu-lys-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、

51、化合物53：lys-gly-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、

52、化合物54：glu-gly-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、

53、化合物55：val-pro-leu-gly-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、

54、化合物56：val-pro-leu-pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp-leu、

55、化合物57：gly-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-glu、

56、化合物58：ala-pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp-leu、

57、化合物59：pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp-leu-ala-gly-leu-asp、化合物60：pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp-leu-val-pro-leu、

58、化合物61：pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp-leu-pro-val-pro-leu、化合物62：

59、val-pro-leu-gly-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp-leu-val-pro-leu、

60、化合物63：

61、pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp-gly-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、

62、化合物64：

63、pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp-leu-gly-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、

64、化合物65：pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-glu-leu、

65、化合物66：pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-glu-ala、

66、化合物67：ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-glu、

67、化合物68：val-pro-leu-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-glu、

68、化合物69：ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln、

69、化合物70：arg-lys-asp-val-tyr-gly-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、化合物71：pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-glu-cys-gly、

70、化合物72：

71、pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、

72、化合物73：pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp-leu-glu-cys-gly、

73、化合物74：ala-ala-ala-ala-ala-pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、化合物75：ala-pro-val-pro-leu-pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、化合物76：pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp。

74、为方便起见，在本技术中描述本发明的化合物时，省略左侧的h和右侧的oh。

75、在一实施方案中，xaa9-xaa10-xaa11为val-lys-gln。

76、在一实施方案中，xaa12为asp。

77、在一实施方案中，xaa12为glu。

78、在一实施方案中，xaa8为pro、val或leu。

79、在一实施方案中，化合物选自：

80、化合物1：ala-pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、

81、化合物34：ala-ala-pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、

82、化合物36：ala-glu-pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、

83、化合物39：pro-val-pro-leu-pro-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp、化合物37：val-pro-leu-val-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp或

84、化合物38：pro-val-pro-leu-ala-ala-glu-pro-val-pro-leu-val-lys-gln-asp。

85、第二方面，本发明提供一种修复黏膜损伤的方法，该方法包括对受试者给予本发明的化合物或其生理学上相容的盐或使黏膜损伤与本发明的化合物或其生理学上相容的盐接触。

86、在一实施方案中，修复是通过调控干细胞增殖和分化进行的。

87、在一实施方案中，黏膜损伤是消化系统、呼吸系统等腔道内黏膜损伤。

88、消化系统黏膜损伤与口腔、食道、胃肠疾病相关，口腔疾病包括口腔溃疡、口腔炎、牙龈炎、牙周炎等；食道疾病包括食管炎、食管溃疡等；胃肠疾病包括慢性胃炎、慢性萎缩性胃炎、急性胃炎、胃十二指肠溃疡、功能性胃肠道疾病、消化不良、癌前病变、消化系统肿瘤、胃肠道出血、胃食管返流疾病、急慢性肠炎、溃疡性结肠炎、克罗恩病和放化疗引起的黏膜损伤，但不限于此。

89、在优选的实施方案中，消化道黏膜包括胃黏膜和肠黏膜。

90、在优选的实施方案中，慢性胃炎包括慢性萎缩性胃炎。

91、在优选的实施方案中，黏膜损伤是由刺激性物质或药物、应激状态引起的胃黏膜损伤。其中，刺激性物质如盐酸、乙醇或酒精等，药物例如非类固醇类抗炎药阿司匹林或吲哚美辛，致癌剂或抑酸剂等。

92、本发明提供一种预防、减轻或治疗消化道疾病或消除炎症水肿的方法，该方法包括对受试者给予本发明的化合物或其生理学上相容的盐。

93、消化道疾病包括口腔、食道、胃肠疾病相关，口腔疾病包括口腔溃疡、口腔炎、牙龈炎、牙周炎等；食道疾病包括食管炎、食管溃疡等；胃肠疾病包括慢性胃炎、慢性萎缩性胃炎、急性胃炎、胃十二指肠溃疡、功能性胃肠道疾病、消化不良、癌前病变、消化系统肿瘤、胃肠道出血、胃食管返流疾病、急慢性肠炎、溃疡性结肠炎、克罗恩病和放化疗引起的黏膜损伤；但不限于此。

94、在一实施方案中，消化道疾病的预防、减轻或治疗是通过调控干细胞增殖和分化进行的。方法通过本发明的化合物或其生理学上相容的盐对胃黏膜或肠黏膜等消化道黏膜起到保护作用或修复胃黏膜或肠黏膜等消化道黏膜的损伤，从而起到预防、减轻或治疗胃肠疾病的作用。

95、本发明提供一种修复黏膜或皮肤创面的方法，该方法包括对受试者给予本发明的化合物或其生理学上相容的盐。在一实施方案中，黏膜或皮肤创面的修复包括调控干细胞增殖和分化。

96、在上述本发明的方法中，本发明的化合物或其生理学上相容的盐是通过口服、注射、皮下等方式给药的。

97、第三方面，本发明提供一种修复皮肤损伤的方法，该方法包括使皮肤损伤与本发明的化合物或其生理学上相容的盐接触。

98、在优选的实施方案中，皮肤损伤与表皮炎症、机械及手术创面、烧伤及烫伤、溃疡、瘘管、褥疮、放化疗引起的皮肤损伤相关，但不限于此。

99、在一实施方案中，皮肤损伤是指正常皮肤在外界致伤因子如外科手术、外力、热、电流、化学物质、低温以及机体内在因素如局部血液供应障碍等作用下所导致的损害。

100、在一实施方案中，皮肤损伤常伴有皮肤完整性的破坏以及一定量正常组织的丢失。

101、在另一实施方案中，皮肤损伤包括皮肤的正常功能受损。

102、在一实施方案中，皮肤损伤的恢复是通过调控干细胞增殖和分化进行的。

103、本发明提供一种促进hacat细胞增殖的方法，该方法包括使细胞与本发明的化合物或其生理学上相容的盐接触。

104、第四方面，本发明提供一种使损伤的血管再生的方法，该方法包括使损伤的血管与本发明的化合物或其生理学上相容的盐接触。

105、在优选的实施方案中，损伤的血管包括消化道黏膜损伤和皮肤损伤导致的血管损伤。

106、第五方面，本发明提供一种药物、食品、保健品或化妆品、日用品组合物，该组合物包括本至少一种发明的化合物或其生理学上相容的盐以及生理学上可接受的载体。

107、在一实施方案中，生理学上可接受的载体包括药学上可接受的载体或化妆品可接受的载体。药物食品、保健品或化妆品、日用品组合物可以按照制剂学或化妆品常规技术制备，包括将作为活性成分的本发明的化合物与载体混合，按照常规技术制成所需要的剂型。可以根据需要，将本发明的组合物配制成口服施用制剂、黏膜施用制剂、注射制剂、吸入制剂和外用制剂。

108、本发明的多肽与已知多肽无同源性，便于人工多肽合成以获得高纯度多肽，与表皮生长因子多肽相比本发明的多肽至多仅由25个氨基酸残基组成在体内稳定，而且本发明的多肽能促进干细胞增殖分化，特别是能促进胃类器官的增殖和分化，参与并调控胃上皮干细胞的增殖和分化，从而可对胃肠干细胞，表皮干细胞损伤进行修复，具有显著的减轻诸如慢性胃炎及消化道溃疡的胃肠疾病病理发展、消除炎症水肿、促进消化道黏膜损伤修复和皮肤损伤修复、缩短创面愈合时间、调解免疫功能等作用。此外，本发明的多肽用于体表皮肤创面时即使经碘制剂或双氧水消毒之后也能够起作用或者在人工胃液、人工肠液等中也能稳定存在，而表皮生长因子用于体表皮肤时，经碘制剂或双氧水消毒之后结构会破坏，不能发挥作用。