测定方法和测定系统与流程

本公开涉及微生物的定量的测定方法和测定系统。

背景技术：

1、以往，已知有对样品进行基因的扩增、并检测扩增后的基因的方法(例如，参照专利文献1)。

2、现有技术文献

3、专利文献

4、专利文献1：日本特开2015-43702号公报

技术实现思路

1、发明所要解决的课题

2、要求提高基于基因的检测结果测定微生物量时的便利性。

3、本公开的目的在于提供能够提高微生物量测定中的便利性的测定方法和测定系统。

4、用于解决课题的手段

5、一些实施方式涉及的测定方法是测定检体试样中所含的微生物的存在量的测定方法，该测定方法包括：对所述检体试样中所含的微生物进行浓缩精制的步骤；从浓缩精制的微生物中提取核酸的步骤；

6、在提取的核酸中添加包含所述提取的核酸的杂交反应所需的盐类和表面活性剂的杂交反应液以供于所述杂交反应的步骤；测定杂交的核酸的发光量的步骤；基于所述核酸的发光量的测定值推定所述提取的核酸的量的步骤；以及基于所述提取的核酸的量的推定值计算所述检体试样中所含的微生物的存在量的步骤。通过这种方式，在不实施pcr(polymerase chain reaction：聚合酶链式反应)工序的情况下推定核酸的量。由于在不实施pcr工序的情况下推定核酸的量，因此减少了pcr反应效率对于核酸的量的推定值的影响。由于减少了pcr反应效率的影响，因此提高了基于核酸的量的推定值而实施的靶微生物的定量测定精度。结果，提高了微生物测定中的便利性。

7、在一个实施方式中，在所述测定方法中，在供于所述杂交反应的步骤中，可以在微阵列(micro array)所具有的多个点(spot)分别将所述提取的核酸供于杂交反应；在所述测定杂交的核酸的发光量的步骤中，可以测定所述微阵列所具有的各点的发光量。通过这种方式，同时定量且高灵敏度地测定了多种微生物。结果，提高了微生物测定中的便利性。

8、在一个实施方式中，在所述测定方法中，在供于所述杂交反应的步骤中，可以使固定于所述微阵列所具有的各点的固相面上且被荧光分子修饰的探针捕获所述核酸。通过这种方式，将与各点接液的检体样品中所含的核酸的量作为各点的亮度值来测定。结果，提高了微生物的定量测定的精度。

9、一些实施方式涉及的测定系统测定检体试样中所含的微生物的存在量。所述测定系统具备：对检体试样中所含的微生物进行浓缩精制的微生物浓缩装置；从在所述微生物浓缩装置中浓缩精制的微生物中提取核酸的核酸提取装置；将在所述核酸提取装置中提取的核酸供于所述杂交反应的杂交反应装置；以及测定在所述杂交反应装置中与探针杂交的核酸的发光量、并基于所述核酸的发光量的测定值推定所述提取的核酸的量的核酸检测装置。所述核酸检测装置使运算装置基于所述提取的核酸的量的推定值计算所述检体试样中所含的微生物的存在量，并获取所述运算装置的计算结果作为所述微生物的存在量的测定结果。通过这种方式，在不实施pcr(polymerase chain reaction)工序的情况下推定核酸的量。由于在不实施pcr工序的情况下推定核酸的量，因此减少了pcr反应效率对于核酸的量的推定值的影响。由于减少了pcr反应效率的影响，因此提高了基于核酸的量的推定值而实施的靶微生物的定量测定精度。结果，提高了微生物测定中的便利性。

10、在一个实施方式涉及的所述测定系统中，所述微生物浓缩装置可以通过阴电荷膜法对所述检体试样中所含的微生物进行浓缩精制。通过这种方式，相对于利用孔径小于靶微生物的过滤器进行的通常的过滤，堵塞等的影响小，能够处理大容量的样品，从而可以期待提高浓缩率。

11、发明的效果

12、根据本公开涉及的测定方法和测定系统，提高了微生物量测定中的便利性。

技术特征：

1.一种测定方法，其是测定检体试样中所含的微生物的存在量的测定方法，该测定方法包括：

2.根据权利要求1所述的测定方法，其中，

3.根据权利要求2所述的测定方法，其中，

4.一种测定系统，其是测定检体试样中所含的微生物的存在量的测定系统，该测定系统具备：

5.根据权利要求4所述的测定系统，其中，

技术总结
一种测定检体试样中所含的微生物的存在量的测定方法，包括：对检体试样中所含的微生物进行浓缩精制的步骤；从浓缩精制的微生物中提取核酸的步骤；在提取的核酸中添加包含提取的核酸的杂交反应所需的盐类和表面活性剂的杂交反应液以供于杂交反应的步骤；测定杂交的核酸的发光量的步骤；基于核酸的发光量的测定值推定提取的核酸的量的步骤；以及基于提取的核酸的量的推定值计算检体试样中所含的微生物的存在量的步骤。

技术研发人员：宫内祐树,田口朋之
受保护的技术使用者：横河电机株式会社
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15