抗病毒感染的胜肽疫苗的制作方法

本发明涉及一种抗病毒感染的免疫原性组合物，尤其是一种具有能够与主要组织相容性复合物(major histocompatibility complex,mhc)分子结合并诱导抗冠状病毒的广效免疫性的胜肽的免疫原性组合物。

背景技术：

1、严重急性呼吸道症候群冠状病毒2(severe acute respiratory syndromecoronavirus 2,sars-cov-2)为导致2019年冠状病毒病(coronavirus disease 2019,covid-19)的病毒，该病自2019年年底以来一直是全球大流行的疾病。sars-cov-2，截至2022年4月3日为止，向世卫组织报告的covid-19确诊病例已达489,779,062件，包括6,152,095例死亡病例(https://covid19.who.int)。该数字仍在快速增长中。

2、sars-cov-2通过在人群中传播而持续演化。迄今为止，全球已发现6种主要的sars-cov-2病毒亚型。这些突变分别发生在sars-cov-2的棘蛋白p681h的位置(b.1.1.207变异株)、n501y/69-70del/p681h的位置(b.1.1.7，alpha变异株)、n501y/k417n/e484k的位置(b.1.351，bata变异株)、n501y/e484k/k417t的位置(p.1，gamma变异株)，以及delta变异株(b.1.617.2)棘蛋白上的10个突变，与omicron变异株(b.1.1.529)棘蛋白上的30个突变。sars-cov-2病毒仍在持续突变中，更糟糕的是目前已经产生了两种不同亚型的covid-19病毒的杂交，如xd、xe，以及xf等。由于sars-cov-2具有高突变率，因此迫切需要开发一种广效covid-19疫苗来阻止covid-19的全球流行疫情。

技术实现思路

1、本发明涉及基于冠状病毒棘蛋白所设计的胜肽。这些胜肽可用于诊断、预防，或治疗人类冠状病毒感染。本申请发明人设计了多种在不同冠状病毒之间保守且能够与主要组织相容性复合物(mhc)分子结合的胜肽。于一疫苗组合物中包含一个或多个这样的胜肽可具有抗一个或多个冠状病毒的保护能力，及/或治疗现有冠状病毒感染的能力。每种胜肽还可用于诊断是否存在冠状病毒感染，例如通过检测一样品中是否存在能够与该胜肽结合的分子(例如，t细胞受体或抗体)。举例而言，该冠状病毒可为一种与一人类区域性流行病或全球性流行病有关的冠状病毒。例如，该冠状病毒可为一人畜共通来源的冠状病毒。例如，该冠状病毒可为一乙型冠状病毒(betacoronavirus)属的成员。例如，该冠状病毒可为一sarbecoronavirus亚属的成员。例如，该冠状病毒可为sars冠状病毒或sars2冠状病毒。

2、因此，本发明提供一种胜肽，包含一胺基酸序列，其选自由下列所组成的群组：seqid no:1至seq id no:26以及与seq id no:1至seq id no:26具有至少80％同源性的变异序列，且其中该变异序列与一mhc分子结合及/或诱导t细胞与该变异序列胜肽发生交叉反应。

3、本发明还提供：

4、-一种编码本发明的胜肽的核酸；

5、-一种免疫原性组合物，包含本发明的胜肽或本发明的核酸；

6、-一种特异性识别本发明的胜肽的抗体；

7、-一种能够与本发明的胜肽结合的t细胞受体；

8、-一种重组宿主细胞，包含一组成分，其选自由下列所组成的群组：本发明的胜肽、本发明的核酸、本发明的抗体或其片段，以及本发明的t细胞受体或其片段；

9、-一种产生活化的t淋巴细胞的体外或离体方法，包括使t细胞与装载抗原的人类第i类或第ii类mhc分子在体外或离体接触一段足够以抗原特异性方式活化该t细胞的时间，该mhc分子是于一合适的抗原呈现细胞或一模拟一抗原呈现细胞的人造构筑物上表现，其中该抗原为本发明的胜肽；

10、-一种通过上述方法产生的活化的t淋巴细胞，其中该活化的t淋巴细胞选择性地识别呈现本发明的胜肽的细胞；

11、-一种药物组合物，包含至少一种活性成分，其选自由下列所组成的群组：本发明的胜肽、本发明的核酸、本发明的抗体或其片段、本发明的t细胞受体或其片段、本发明的重组宿主细胞，以及本发明的活化的t淋巴细胞；

12、-一种于一有需要的受试者中预防或治疗一病原体感染的方法，包括向该受试者施用一有效量的本发明的免疫原性组合物或药物组合物；

13、-一种本发明的免疫原性组合物或药物组合物使用于预防或治疗一有需要的受试者中的一病原体感染；

14、-一种本发明的免疫原性组合物或药物组合物在制备用于预防或治疗一有需要的受试者中的一病原体感染的药物中的用途；

15、-一种产生抗冠状病毒抗体的方法，包括将本发明的免疫原性组合物施用于一动物或人类受试者；

16、-一种本发明的免疫原性组合物使用于在动物或人类受试者中产生抗冠状病毒抗体；

17、-一种本发明的免疫原性组合物在制备用于在动物或人类受试者中产生抗冠状病毒抗体的药物中的用途；

18、-一种复合物，包含与一mhc分子结合的本发明的胜肽；

19、-一种确定一个体中现在或先前是否存在冠状病毒感染的方法，包括使本发明的胜肽或复合物与自该个体获得的一样品接触，并确定该胜肽或复合物与该样品中包含的一分子之间是否存在结合；

20、-一种本发明胜肽或复合物用途用于一种确定一个体中现在或先前是否存在冠状病毒感染的方法；

21、-一种鉴定冠状病毒特异性t细胞的方法，包括使本发明的胜肽或复合物与自一个体获得的一样品接触，并确定该胜肽或复合物与该样品中包含的一t细胞受体之间是否存在结合；

22、-一种本发明胜肽或复合物用途用于一种鉴定冠状病毒特异性t细胞的方法；

23、-一种鉴定一冠状病毒特异性t细胞受体的方法，包括使本发明的胜肽或复合物与一t细胞受体接触，并确定该胜肽或复合物与该t细胞受体之间是否存在结合；

24、-一种本发明胜肽或复合物用途用于一种鉴定一冠状病毒特异性t细胞受体的方法。

25、通过结合以下附图对优选具体实施例的描述，这些及其他方面将变得显而易见。

26、附图说明

技术特征：

1.一种胜肽，包含一胺基酸序列，其选自由下列所组成的群组：seq id no:1至seq idno:26以及与seq id no:1至seq id no:26具有至少80％同源性的变异序列，且其中该变异序列与一主要组织相容性复合物(major histocompatibility complex,mhc)分子结合及/或诱导t细胞与该变异序列胜肽发生交叉反应。

2.如权利要求1所述的胜肽，其中该胜肽具有与一第i类或第ii类mhc分子结合的能力，且其中该胜肽在与该mhc结合时能够被cd4+及/或cd8+t细胞识别。

3.一种编码如权利要求1或2所述的胜肽的核酸。

4.一种免疫原性组合物，包含如权利要求1或2所述的胜肽或如权利要求3所述的核酸。

5.如权利要求4所述的免疫原性组合物，进一步包含一药学上可接受的载剂及/或一佐剂。

6.一种特异性识别如权利要求1或2所述的胜肽的抗体。

7.一种能够与如权利要求1或2所述的胜肽结合的t细胞受体。

8.如权利要求7所述的t细胞受体，其中该胜肽与一mhc分子结合。

9.一种重组宿主细胞，包含一组成分，其选自由下列所组成的群组：如权利要求1或2所述的胜肽、如权利要求3所述的核酸、如权利要求6所述的抗体或其片段，以及如权利要求7或8所述的t细胞受体或其片段。

10.如权利要求9所述的重组宿主细胞，其中该宿主细胞选自一树突细胞、一t细胞，或一自然杀手(natural killer,nk)细胞。

11.一种产生活化的t淋巴细胞的体外或离体方法，包括使t细胞与装载抗原的人类第i类或第ii类mhc分子在体外或离体接触一段足够以抗原特异性方式活化该t细胞的时间，该mhc分子是于一合适的抗原呈现细胞或一模拟一抗原呈现细胞的人造构筑物上表现，其中该抗原为如权利要求1或2所述的胜肽。

12.一种通过如权利要求11所述的方法产生的活化的t淋巴细胞，其中该活化的t淋巴细胞选择性地识别呈现如权利要求1或2所述的胜肽的细胞。

13.一种药物组合物，包含至少一种活性成分，其选自由下列所组成的群组：如权利要求1或2所述的胜肽、如权利要求3所述的核酸、如权利要求6所述的抗体或其片段、如权利要求7或8所述的t细胞受体或其片段、如权利要求9或10所述的重组宿主细胞，以及如权利要求12所述的活化的t淋巴细胞。

14.如权利要求13所述的药物组合物，进一步包含一药学上可接受的载剂，及/或一药学上可接受的赋形剂及/或稳定剂。

15.一种如权利要求4或5所述的免疫原性组合物或如权利要求13或14所述的药物组合物使用于预防或治疗一有需要的受试者中的一病原体感染。

16.如权利要求4或5所述的免疫原性组合物或如权利要求13或14所述药物组合物于如权利要求15所述的用途，其中该病原体感染是由一冠状病毒所引起的。

17.如权利要求4或5所述的免疫原性组合物或如权利要求13或14所述药物组合物于如权利要求16所述的用途，其中该冠状病毒为严重急性呼吸道症候群冠状病毒2(severeacute respiratory syndrome coronavirus 2,sars-cov-2)。

18.一种如权利要求4或5所述的免疫原性组合物或如权利要求13或14所述药物组合物使用于在一动物或一人类受试者中产生抗冠状病毒抗体。

19.如权利要求4或5所述的免疫组合物或如权利要求13或14所述药物组合物于如权利要求18所述的用途，其中该抗冠状病毒抗体的特征在于对一冠状病毒具有结合亲和力。

20.如权利要求4或5所述的免疫组合物或如权利要求13或14所述药物组合物于如权利要求19所述的用途，其中该冠状病毒为严重急性呼吸道症候群冠状病毒2(sars-cov-2)。

21.一种复合物，包含与一mhc分子结合的如权利要求1或2所述的胜肽。

22.如权利要求21所述的复合物，其中该复合物包含两个或更多个如权利要求1或2所述的胜肽以及两个或更多个mhc分子。

23.如权利要求21或22所述的复合物，其中该两个或更多个胜肽中的每一种与该两个或更多个mhc分子的一结合。

24.如权利要求21至23的任一项所述的复合物，其中该两个或更多个mhc分子中的每一种皆连接至一葡聚醣骨架。

25.如权利要求21至24的任一项所述的复合物，其中该复合物进一步包含一荧光团，可选择地其中该荧光团连接至该葡聚醣骨架上。

26.如权利要求1或2所述的胜肽或如权利要求21至25的任一项的所述复合物用途用于一种确定一个体中现在或先前是否存在冠状病毒感染的方法，其中该方法包括使如权利要求1或2所述的胜肽或如权利要求21至25的任一项所述的复合物与自该个体获得的一样品接触，并确定该胜肽或复合物与该样品中包含的一分子之间是否存在结合。

27.如权利要求26所述的用途，其中该分子为一抗体或一t细胞受体。

28.如权利要求26或27所述的用途，其中该结合存在时表示现在或先前存在冠状病毒感染，及/或该结合不存在时表示现在或先前不存在冠状病毒感染。

29.如权利要求1或2所述的胜肽或如权利要求21至25的任一项所述的复合物用途用于一种鉴定冠状病毒特异性t细胞的方法，其中该方法包括使如权利要求1或2所述的胜肽或如权利要求21至25的任一项所述的复合物与自一个体获得的一样品接触，并确定该胜肽或复合物与该样品中包含的一t细胞受体之间是否存在结合。

30.如权利要求29所述的用途，其中该个体现在感染了冠状病毒。

31.如权利要求29或30所述的用途，其中该个体先前，但并非现在，感染了冠状病毒。

32.如权利要求1或2所述的胜肽或如权利要求21至25的任一项所述复合物用途用于一种鉴定一冠状病毒特异性t细胞受体的方法，其中该方法包括使如权利要求1或2所述的胜肽或如权利要求21至25的任一项所述的复合物与一t细胞受体接触，并确定该胜肽或复合物与该t细胞受体之间是否存在结合。

33.如权利要求32所述的用途，其中存在结合表示该t细胞受体为一冠状病毒特异性t细胞受体，及/或不存在结合表示该t细胞受体不为一冠状病毒特异性t细胞受体。

技术总结
本发明涉及一种抗病毒感染的免疫原性组合物，特别是一种具有能够与主要组织相容性复合物(major histocompatibility complex,MHC)分子结合并诱导抗冠状病毒的广效免疫性的胜肽的免疫原性组合物。

技术研发人员：张嘉铭,李易儒
受保护的技术使用者：法信诺生医股份有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15