嵌合抗原受体、表达前述受体的细胞、包含前述细胞的医药组合物、前述细胞的制造方法、及包含编码前述嵌合抗原受体的碱基序列的多核苷酸或载体与流程

本公开文本涉及嵌合抗原受体、表达前述受体的细胞、包含前述细胞的医药组合物、前述细胞的制造方法、以及包含编码前述嵌合抗原受体的碱基序列的多核苷酸或载体。

背景技术：

1、嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor：以下，也称为“car”。)是使识别癌细胞的细胞表面抗原的靶抗原结合区、与诱导t细胞的活化的信号传导区融合而成的人工嵌合蛋白质。

2、例如，通过向外周血t细胞(外周血t淋巴球)导入编码car的基因，从而能够大量地制作car表达t细胞(以下，也称为“car-t细胞”。)。该car-t细胞具有肿瘤反应性，能够在不依赖与主要组织相容性基因复合体(mhc)的相互作用的情况下导入对癌细胞的伤害。

3、对于通过car-t细胞的施予进行的癌症免疫疗法，更具体而言是从患者采集t细胞，向该t细胞导入编码car的基因并进行扩增，再次移入患者的疗法而言，正在当今全世界进行临床试验，获得了在白血病、淋巴瘤等造血器官恶性肿瘤等中显示出有效性的结果。

4、另一方面，认为car-t细胞疗法难以对实体肿瘤获得效果。作为其主要原因，认为有如下原因等：car-t细胞在生物体内的存活率低；向肿瘤局部的聚集低；肿瘤细胞所分泌的免疫抑制因子等对活性产生抑制。

5、作为解决这样的问题的方法，报道了将编码car的核酸、以及编码t细胞的免疫功能促进因子的核酸导入t细胞的方法。例如，日本专利第6761113号公报公开了以实体肿瘤抗原作为靶抗原的car、及对实体肿瘤有效的car-t细胞。

技术实现思路

1、发明所要解决的课题

2、日本专利第6761113号公报公开了对作为靶抗原的神经节苷脂gm2显示高的有效性的car-t细胞，但始终需要一种无论靶抗原如何都提高car-t细胞的效果的技术。

3、本公开文本涉及的一实施方式所要解决的课题在于提供具有优异的细胞毒活性的嵌合抗原受体。

4、本公开文本涉及的另一实施方式所要解决的课题在于提供表达上述嵌合抗原受体的细胞、包含编码上述嵌合抗原受体的碱基序列的多核苷酸或载体、以及包含上述细胞的医药组合物。

5、用于解决课题的手段

6、本公开文本涉及的一实施方式包含以下的方式。

7、<1>嵌合抗原受体，其包含：

8、靶抗原结合区；

9、跨膜区；和

10、信号传导区，

11、前述跨膜区在c末端包含选自由下述(1a)～(1c)组成的组中的第1多肽，

12、(1a)由序列号1所记载的氨基酸序列中从c末端起缺失了至少3个氨基酸的氨基酸序列构成的多肽；

13、(1b)由相对于前述(1a)的多肽中的氨基酸序列而言具有85％以上的序列同一性的氨基酸序列构成的多肽；以及

14、(1c)由前述(1a)的多肽的氨基酸序列中1个或多个氨基酸突变而得的氨基酸序列构成的多肽。

15、<2>如<1>所述的嵌合抗原受体，其中，前述(1a)的多肽为由从序列号1所记载的氨基酸序列的c末端起缺失了7个氨基酸的氨基酸序列构成的多肽。

16、<3>如<1>或<2>所述的嵌合抗原受体，其中，前述跨膜区在前述第1多肽的n末端侧还包含选自由下述(2a)～(2c)组成的组中的第2多肽，

17、(2a)由序列号2所记载的氨基酸序列中从n末端起缺失了至少3个氨基酸的氨基酸序列构成的多肽；

18、(2b)由相对于前述(2a)的多肽的氨基酸序列而言具有85％以上的序列同一性的氨基酸序列构成的多肽；以及

19、(2c)由前述(2a)的多肽的氨基酸序列中1个或多个氨基酸突变而得的氨基酸序列构成的多肽。

20、<4>如<3>所述的嵌合抗原受体，其中，前述(2a)的多肽为由从序列号2所记载的氨基酸序列的n末端起缺失了10个氨基酸的氨基酸序列构成的多肽。

21、<5>如<1>～<4>中任一项所述的嵌合抗原受体，其中，前述信号传导区为t细胞活化信号传导区。

22、<6>细胞，其表达<1>～<5>中任一项所述的嵌合抗原受体。

23、<7>如<6>所述的细胞，其还表达il-7及ccl19中的至少一者，优选还表达外源il-7及外源ccl19中的至少一者。

24、<8>如<6>或<7>所述的细胞，其中，前述细胞为免疫细胞。

25、<9>如<8>所述的细胞，其中，前述免疫细胞为t细胞。

26、<10>多核苷酸，其包含编码<1>～<5>中任一项所述的嵌合抗原受体的碱基序列。

27、<11>如<10>所述的多核苷酸，其中，前述嵌合抗原受体在n末端还包含信号肽，

28、前述信号肽为选自由下述(3a)～(3f)组成的组中的多肽，

29、(3a)由序列号3所记载的氨基酸序列构成的多肽；

30、(3b)由与序列号3所记载的氨基酸序列具有85％以上的序列同一性的氨基酸序列构成的多肽；以及

31、(3c)由序列号3所记载的氨基酸序列中1个或多个氨基酸突变而得的氨基酸序列构成的多肽；

32、(3d)由序列号4所记载的氨基酸序列构成的多肽；

33、(3e)由与序列号4所记载的氨基酸序列具有85％以上的序列同一性的氨基酸序列构成的多肽；以及

34、(3f)由序列号4所记载的氨基酸序列中1个或多个氨基酸突变而得的氨基酸序列构成的多肽。

35、<12>如<11>所述的多核苷酸，其还包含编码il-7的碱基序列及编码ccl19的碱基序列中的至少一者，优选作为外源核酸还包含编码il-7的碱基序列及编码ccl19的碱基序列中的至少一者。

36、<13>载体，其包含<11>或<12>所述的多核苷酸。

37、<14>表达嵌合抗原受体的细胞的制造方法，其包括将<13>所述的载体导入细胞。

38、<15>医药组合物，其包含<6>～<9>中任一项所述的细胞。

39、<16>如<15>所述的医药组合物，其为用于治疗或预防肿瘤的医药组合物。

40、发明的效果

41、根据本公开文本的一实施方式，能够提供具有优异的细胞毒活性的嵌合抗原受体。

42、根据本公开文本的另一实施方式，能够提供表达上述嵌合抗原受体的细胞、包含编码上述嵌合抗原受体的碱基序列的多核苷酸或载体、以及包含上述细胞的医药组合物。