一种呼吸道支原体、衣原体保存液及制备方法和采样装置与流程

本申请属于微生物保存，尤其涉及一种呼吸道支原体、衣原体保存液及制备方法和采样装置。

背景技术：

1、支原体、衣原体都属于原核细胞致病微生物，肺炎支原体、衣原体能引起肺炎，肺炎支原体能引起急性呼吸道感染伴肺炎，但临床表现和x射线检测并不具有特殊性，单凭临床表现和胸部x射线检查无法做出诊断，而肺炎衣原体导致的肺炎很难单凭患者的症状和体征与细菌性、病毒性，因此，需要采集患者呼吸道支原体和衣原体进行分离培养和分子生物学检测，从而实现疾病判断和治疗

2、在采集患者呼吸道支原体和衣原体之后，进行分离培养和分子生物学检测之前这段时间，需要对呼吸道支原体和衣原体进行运输和保存，目前支原体和衣原体保存的方法较为常用的是冻干保存，如专利cn1433465a，使用了冻干法对支原体进行保存，除冻干法外还可将支原体或衣原体保存在超低温环境下，但冻干法保存法需要冻干机，超低温保存法需要冰箱等冷藏装置，因此，不适用于临床检测样本的短期保存，目前临床上通常使用的保存液保存支原体和衣原体核酸和活性效果差，保存效果在24小时内，时间较短。

技术实现思路

1、有鉴于此，本申请提供了一种呼吸道支原体、衣原体保存液及制备方法和采样装置，用于解决现有技术中呼吸道支原体和衣原体临床检测样本保存时间过短的技术问题。

2、本申请第一方面提供了一种呼吸道支原体、衣原体保存液，包括hanks平衡盐溶液、hepes、蔗糖、牛血清白蛋白、明胶、氨基酸以及抗生素。

3、优选的，所述氨基酸包括谷氨酸。

4、优选的，所述抗生素包括万古霉素、多粘菌素b、两性霉素b中的任意一种或任意一种以上。

5、优选的，以质量份计算，所述呼吸道支原体、衣原体保存液，包括73.5～90质量份hanks平衡盐溶液、0.5～1.5质量份hepes、5～10质量份蔗糖、0.5～5质量份牛血清白蛋白、1～3质量份明胶、0.5～2质量份氨基酸以及2.5～5质量份抗生素。

6、优选的，以质量份计算，所述呼吸道支原体、衣原体保存液，包括79.5质量份hanks平衡盐溶液、1.2质量份hepes、8质量份蔗糖、4.5质量份牛血清白蛋白、2.5质量份明胶、1质量份谷氨酸、0.6质量份万古霉素、1.2质量份多粘菌素b以及1.5质量份多粘菌素b。

7、优选的，以质量份计算，所述呼吸道支原体、衣原体保存液，包括73.5质量份hanks平衡盐溶液、1.5质量份hepes、10质量份蔗糖、5质量份牛血清白蛋白、3质量份明胶、2质量份谷氨酸、1质量份万古霉素、1.2质量份多粘菌素b以及2.8质量份多粘菌素b。

8、优选的，以质量份计算，所述呼吸道支原体、衣原体保存液，包括90质量份hanks平衡盐溶液、0.5质量份hepes、5质量份蔗糖、0.5质量份牛血清白蛋白、1质量份明胶、0.5质量份谷氨酸、0.5质量份万古霉素、0.5质量份多粘菌素b以及1.5质量份多粘菌素b。

9、本申请第二方面提供了一种呼吸道支原体、衣原体保存液的制备方法，包括步骤：在无菌环境下，以质量份计，将0.5～1.5质量份hepes、5～10质量份蔗糖、0.5～5质量份牛血清白蛋白、1～3质量份明胶、0.5～2质量份氨基酸以及2.5～5质量份抗生素加入到73.5～90质量份hanks平衡盐溶液中混合均匀，得到呼吸道支原体、衣原体保存液。

10、本申请第三方面提供了采样装置，包括采样管、上述呼吸道支原体、衣原体保存液以及鼻咽部采样器。

11、优选的，所述鼻咽部采样器为无菌棉签。

12、综上所述，本申请提供了一种呼吸道支原体、衣原体保存液及制备方法和采样装置，呼吸道支原体、衣原体保存液的组成包括hanks平衡盐溶液、hepes、蔗糖、牛血清白蛋白、明胶、氨基酸以及抗生素，呼吸道支原体、衣原体保存液中hanks平衡盐溶液用于使原核细胞支原体、衣原体处于渗透压平衡，维持原核细胞支原体、衣原体形态，避免出现原核细胞支原体、衣原体在高渗溶液中失水或低渗溶液中膨胀，细胞结构受到破坏，而保存液中hepes缓冲液提供细胞所需ph环境，氨基酸提供营养，从而使原核细胞支原体、衣原体处于正常生长发育所需环境，支原体、衣原体细胞膜最外层为蛋白质，蔗糖、牛血清白蛋白、明胶相互作用下能在支原体和衣原体的外侧成形一种保存层，使支原体和衣原体的蛋白质不受伤害，稳定支原体、衣原体细胞结构并维持支原体、衣原体活性，保存液中抗生素用于抑制革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌和真菌等杂菌的生长，保存液中hanks平衡盐溶液、hepes、蔗糖、牛血清白蛋白、明胶、氨基酸以及抗生素相互协同使得采集的支原体和衣原体临床检测样本能在2-25℃运输和保存48小时，从而解决现有技术中呼吸道支原体和衣原体临床检测样本保存时间过短的技术问题。

技术特征：

1.一种呼吸道支原体、衣原体保存液，其特征在于，包括hanks平衡盐溶液、hepes、蔗糖、牛血清白蛋白、明胶、氨基酸以及抗生素。

2.根据权利要求1所述的一种呼吸道支原体、衣原体保存液，其特征在于，所述氨基酸包括谷氨酸。

3.根据权利要求1所述的一种呼吸道支原体、衣原体保存液，其特征在于，所述抗生素包括万古霉素、多粘菌素b、两性霉素b中的任意一种或任意一种以上。

4.根据权利要求1所述的一种呼吸道支原体、衣原体保存液，其特征在于，以质量份计算，所述呼吸道支原体、衣原体保存液，包括73.5～90质量份hanks平衡盐溶液、0.5～1.5质量份hepes、5～10质量份蔗糖、0.5～5质量份牛血清白蛋白、1～3质量份明胶、0.5～2质量份氨基酸以及2.5～5质量份抗生素。

5.根据权利要求4所述的一种呼吸道支原体、衣原体保存液，其特征在于，以质量份计算，所述呼吸道支原体、衣原体保存液，包括79.5质量份hanks平衡盐溶液、1.2质量份hepes、8质量份蔗糖、4.5质量份牛血清白蛋白、2.5质量份明胶、1质量份谷氨酸、0.6质量份万古霉素、1.2质量份多粘菌素b以及1.5质量份多粘菌素b。

6.根据权利要求4所述的一种呼吸道支原体、衣原体保存液，其特征在于，以质量份计算，所述呼吸道支原体、衣原体保存液，包括73.5质量份hanks平衡盐溶液、1.5质量份hepes、10质量份蔗糖、5质量份牛血清白蛋白、3质量份明胶、2质量份谷氨酸、1质量份万古霉素、1.2质量份多粘菌素b以及2.8质量份多粘菌素b。

7.根据权利要求4所述的一种呼吸道支原体、衣原体保存液，其特征在于，以质量份计算，所述呼吸道支原体、衣原体保存液，包括90质量份hanks平衡盐溶液、0.5质量份hepes、5质量份蔗糖、0.5质量份牛血清白蛋白、1质量份明胶、0.5质量份谷氨酸、0.5质量份万古霉素、0.5质量份多粘菌素b以及1.5质量份多粘菌素b。

8.权利要求1-7任一项所述的一种呼吸道支原体、衣原体保存液的制备方法，其特征在于，包括步骤：在无菌环境下，以质量份计，将0.5～1.5质量份hepes、5～10质量份蔗糖、0.5～5质量份牛血清白蛋白、1～3质量份明胶、0.5～2质量份氨基酸以及2.5～5质量份抗生素加入到73.5～90质量份hanks平衡盐溶液中混合均匀，得到呼吸道支原体、衣原体保存液。

9.一种采样装置，其特征在于，包括采样管、权利要求1-7任一项所述的呼吸道支原体、衣原体保存液或权利要求8所述的制备方法制备得到的呼吸道支原体、衣原体保存液以及鼻咽部采样器。

10.根据权利要求9所述的一种采样装置，其特征在于，所述鼻咽部采样器为棉签。

技术总结
本申请属于微生物保存技术领域，尤其涉及一种呼吸道支原体、衣原体保存液及制备方法和采样装置；本申请提供的呼吸道支原体、衣原体保存液的组成包括Hanks平衡盐溶液、HEPES、蔗糖、牛血清白蛋白、明胶、氨基酸以及抗生素能够稳定支原体、衣原体细胞结构并维持支原体、衣原体活性，保存采集的支原体和衣原体临床检测样本48小时后，能基本维持支原体和衣原体核酸的完整性以及支原体和衣原体的活性，从而解决现有技术中呼吸道支原体和衣原体临床检测样本保存时间过短的技术问题。

技术研发人员：李思韵,许铭飞,韩建红,曹肖文,邓冠华
受保护的技术使用者：广州阳普医疗器械有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13