一种菌酶协同固体发酵组合物及其应用的制作方法

本发明涉及微生物发酵，具体为一种菌酶协同固体发酵组合物及其应用。

背景技术：

1、果胶(pectin)是细胞间将细胞壁粘合在一起的亲水性植物多糖，以结构多糖的形式存在于植物的胞间薄层和初生细胞壁中，属于异多糖，分子量在30k da到300k da范围内。果胶类物质以可溶性果胶、原果胶和果胶酸三种形式广泛存在于植物中。果胶酶是一类通过不同机制降解果胶基质的酶的总称，按照其作用的不同底物可分为原果胶酶、果胶酯酶和果胶解聚酶。碱性果胶酶属于果胶解聚酶，是一种在碱性环境下具有高活性的果胶酶，最适ph为在8～10，可以断开果胶聚合物主链，并释放出不饱和的寡聚半乳糖醛酸，常由细菌类的芽孢杆菌属产生。

2、目前，饲料用芽孢杆菌也可以产生碱性果胶酶，以合适的工艺处理碱性果胶酶能够提高饲料的作用效果，有利于增强饲料的适用性，缓解饲料需求紧张。

技术实现思路

1、本发明的目的是提供了一种菌酶协同固体发酵组合物及其应用。

2、本发明技术方案如下：

3、本发明提供了一种菌酶协同固体发酵组合物，由枯草芽孢杆菌sly1927发酵液与葵花籽粕和苹果渣混合灭菌料经分段调控发酵后制得，所述枯草芽孢杆菌sly1927保藏编号为cgmcc no.25163。

4、如上所述的菌酶协同固体发酵组合物，所述枯草芽孢杆菌sly1927发酵液的接种量为葵花籽粕和苹果渣混合灭菌料干料质量的10％-20％，所述枯草芽孢杆菌sly1927发酵液中枯草芽孢杆菌sly1927菌数为(1-3)×1010cfu/ml，碱性果胶酶活力为1000-2000u/ml。

5、如上所述的菌酶协同固体发酵组合物，所述葵花籽粕和苹果渣混合灭菌料的制备方法为：将葵花籽粕和苹果渣混合物与水按照质量比为1:0.7-0.9混合，控制ph为7.0-8.0，灭菌温度为118-122℃，灭菌时间为6-8min，蒸煮2-4次，制得所述葵花籽粕和苹果渣混合灭菌料。

6、其中，所述葵花籽粕和苹果渣混合物含有以下质量百分数的物质：葵花籽粕30％-40％、苹果渣10％-15％、棉粕35％-45％、豆皮8％-11％、氨水1％-3％和碳酸钙1％。

7、如上所述的菌酶协同固体发酵组合物，所述枯草芽孢杆菌sly1927发酵液的制备方法为：将枯草芽孢杆菌sly1927菌液接种到液体发酵培养基中，接种量为所述液体发酵培养基体积的2％-5％，发酵，制得所述枯草芽孢杆菌sly1927发酵液。

8、其中，所述液体发酵培养基含有以下质量百分数的物质：玉米淀粉1％-2％、豆粕粉0.5％-1％、棉粕粉1％-2％、氯化钙0.5％-1.5％和消泡剂0.1％-0.2％。

9、其中，所述发酵的过程中：控制ph为7.0-8，温度为37-42℃，转速为200-300rpm，罐压为0.05-0.06mpa，发酵周期为24-30h。

10、如上所述的菌酶协同固体发酵组合物，所述分段调控发酵之前进行入料处理，所述入料处理具体为：将所述枯草芽孢杆菌sly1927发酵液接种到葵花籽粕和苹果渣混合灭菌料后，进行床体发酵，控制入料温度为35-45℃，入料水分含量为50％-55％。。

11、如上所述的菌酶协同固体发酵组合物，所述分段调控发酵具体为：

12、第一阶段发酵：0-4h，控制室温为35-40℃，料温为33-36℃；

13、第二阶段发酵：4-16h，控制相对湿度为70％-90％，室温为35-43℃，料温为35-43℃，通风量为总风量的40％-60％，料水分含量为44％-48％；

14、第三阶段发酵：16-24h，控制相对湿度为60％-80％，室温为38-45℃，料温为38-45℃，通风量为总风量的60％-80％，料水分含量为38％-44％；

15、第四阶段发酵：24h-36h，控制相对湿度为40％-60％，室温为36-42℃，料温为36-42℃，通风量为总风量的50％-60％，间歇通风，每通风20-40min，停止30min；

16、第五阶段发酵：36h后，进行烘干，控制热空气温度为55-60℃，料温为50-60℃，通风为总风量的70％-90％，持续翻料，烘干3-6h，制得所述菌酶协同固体发酵组合物；

17、所述总风量为13万m3/h。

18、本发明还提供一种菌酶协同固体发酵组合物的应用，所述应用为以下(a1)和/或(a2)和/或(a3)和/或(a4)和/或(a5)和/或(a6)：

19、(a1)一种菌酶协同固体发酵组合物在制备家禽饲料添加剂中的应用；

20、(a2)一种菌酶协同固体发酵组合物在制备提升家禽采食量药物中的应用；

21、(a3)一种菌酶协同固体发酵组合物在制备增加家禽体重药物中的应用；

22、(a4)一种菌酶协同固体发酵组合物在制备提高家禽排泄物成型度药物中的应用；

23、(a5)一种菌酶协同固体发酵组合物在制备增强动物消化能力药物中的应用；

24、(a6)一种菌酶协同固体发酵组合物在制备提高家禽抗病能力药物中的应用。

25、本发明的有益效果在于：

26、本发明提供的一种菌酶协同固体发酵组合物，富含酶类、肽类及还原糖等，能够显著改善家禽的生产性能，增加家禽的采食量和体重，能改善家禽的肠道消化吸收能力，能提高家禽排泄物成型度，还能增强家禽的机体抗病能力；

27、本发明提供的一种菌酶协同固体发酵组合物，制备原料中的枯草芽孢杆菌sly1927保藏编号为cgmcc no.25163，该菌株中碱性果胶酶酶活力高，且采用高密度液体发酵制得枯草芽孢杆菌sly1927发酵液，进而以葵花籽粕、苹果渣、棉粕等富含果胶质底物的原料为培养基，辅以少量豆皮，以氨水调节ph，采用分段调控发酵工艺促进菌体生长诱导碱性果胶酶产生与富集，制得的菌酶协同固体发酵组合物富含碱性果胶酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶及寡聚半乳糖醛酸，且含有较高的枯草芽孢杆菌；

28、本发明提供的一种菌酶协同固体发酵组合物，在其制备中采取了分段调控发酵工艺，可使碱性果胶酶保持高酶活力，使得菌体生长产酶并酶解饼粕、果渣植物副产物，饼粕、果渣植物副产物中的果胶质等多糖在碱性果胶酶作用下降解为寡聚半乳糖醛酸、还原糖等；饼粕、果渣植物副产物中的蛋白质等在中性、碱性蛋白酶作用下降解为肽类及游离氨基酸；分段调控发酵工艺降低了饼粕、果渣植物副产物的抗营养因子，提高了菌酶协同固体发酵组合物的营养价值；

29、本发明提供的一种菌酶协同固体发酵组合物，可应用在制备家禽饲料添加剂、制备提升家禽采食量药物、制备增加家禽体重药物、制备提高家禽排泄物成型度药物、制备增强动物消化能力药物及制备提高家禽抗病能力药物中。

30、菌种保藏信息

31、保藏时间：2022年6月23日，

32、保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，

33、保藏编号：cgmcc no.25163，

34、保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，

35、分类命名：枯草芽孢杆菌bacillus subtilis。