一种秦皮乙素衍生物及其制备方法与应用

本发明属于药物化学领域，具体涉及一种秦皮乙素类衍生物及其制备方法与应用。

背景技术：

0、技术背景

1、秦皮乙素(esculetin，esc)是一种天然的简单香豆素，又称6,7-二羟基香豆素，俗称七叶亭，是传统中药材秦皮的主要活性成分之一，广泛存在于曼陀罗、颠茄、地黄等多种植物中。秦皮乙素为白色至浅黄色针状结晶，微溶于水，熔点271～273℃，是合成药物东喘宁的中间体。秦皮甲素，即秦皮乙素的葡萄糖苷，与秦皮乙素同为中药秦皮的主要活性成分。

2、研究表明秦皮乙素具有抗炎、抗肿瘤、抗菌等多种药理活性，并且由于它独特的结构和理化性质，具有广阔的药用开发前景和潜在的抗肿瘤作用。但是秦皮乙素活性较低，选择性较差，近些年来，众多研究者投入对秦皮乙素的研究，对其进行结构修饰和改造，以期合成更有效、更低毒的秦皮乙素衍生物。

技术实现思路

1、本发明的目的是在秦皮乙素6位、7位以醚键为连接方式，通过不同长度的碳链与no供体基团如呋咱氮氧化物和线粒体靶向基团如7-(二乙氨基)香豆素-3-甲酸连接，提供了一系列秦皮乙素类衍生物。

2、本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

3、结构如式i所示的秦皮乙素类衍生物：

4、

5、其中，r1选自r2选自m为3～6的整数，n为3～6的整数。

6、优选的，m＝n，n为3～6的整数；

7、m＝6，n＝3～6的整数。

8、具体的，本发明所述的秦皮乙素类衍生物选自如下化合物：

9、

10、本发明的另一个目的是提供了一种所述的秦皮乙素类衍生物的制备方法，

11、当r1选自r2选自时，反应路线如下：

12、

13、其中m,n如前所述；

14、包括以下步骤：

15、步骤(1)取代反应：以二氯甲烷为反应溶剂，以1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯(dbu)为催化剂，3,4-二苯环酰基-1,2,5-噁二唑-2-氧化物与式br(ch2)noh所示的溴代脂肪醇类化合物反应生成化合物ⅱ；

16、步骤(2)取代反应：以n,n-二甲基甲酰胺为反应溶剂，以碳酸钾为缚酸剂，以碘化钾为催化剂，秦皮乙素与化合物ⅱ反应生成秦皮乙素类衍生物。

17、步骤(1)中，所述的3,4-二苯环酰基-1,2,5-噁二唑-2-氧化物和1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯的摩尔比为1:1.5～1:4，优选为1:2。

18、所述的3,4-二苯环酰基-1,2,5-噁二唑-2-氧化物和溴代脂肪醇类化合物的摩尔比为1:1.5～1:4，优选为1:2。

19、所述的取代反应的温度为常温。

20、反应结束后，反应液旋干，采用硅胶柱层析，以石油醚:乙酸乙酯＝10:1～15:1v/v为洗脱剂，分离得到化合物ⅱ。

21、步骤(2)中，所述的秦皮乙素和化合物ⅱ的摩尔比为1:2.5～1:6，优选为1:4。

22、所述的秦皮乙素和碳酸钾的摩尔比为1:3～1:4.5，优选为1:4。

23、所述的秦皮乙素和碘化钾的摩尔比为1:0.1～1:0.3，优选为1:0.2。

24、所述的取代反应的温度为50～60℃。

25、反应结束后，反应液加水，乙酸乙酯萃取，取有机层，有机层依次用饱和氯化钠溶液洗、无水硫酸钠干燥，旋干，采用硅胶柱层析，以石油醚:乙酸乙酯＝3:1～4:1v/v为洗脱剂，分离得到秦皮乙素衍生物。

26、当r1选自r2选自时，反应路线如下：

27、

28、

29、其中，m,nn如前所述。

30、包括以下步骤：

31、步骤(1)取代反应：以n,n-二甲基甲酰胺为反应溶剂，以碳酸钾为缚酸剂，以碘化钾为催化剂，7-(二乙氨基)香豆素-3-甲酸与式br(ch2)nbr所示的二溴代烷类化合物发生取代反应生成化合物ⅲ；

32、步骤(2)取代反应：以无水二氯为溶剂，以dbu为缚酸剂，3,4-二苯环酰基-1,2,5-噁二唑-2-氧化物与式br(ch2)moh所示的溴代脂肪醇类化合物反应生成化合物ⅳ；

33、步骤(3)取代反应：以n,n-二甲基甲酰胺为反应溶剂，以碳酸钾为缚酸剂，以碘化钾为催化剂，化合物ⅳ与化合物秦皮乙素发生取代反应生成化合物ⅴ。

34、步骤(4)取代反应：以n,n-二甲基甲酰胺为反应溶剂，以碳酸钾为缚酸剂，以碘化钾为催化剂，化合物ⅴ与化合物ⅲ发生取代反应生成秦皮乙素类衍生物。

35、步骤(1)中，所述的7-(二乙氨基)香豆素-3-甲酸和二溴代烷类化合物的摩尔比1:3～1:5；所述的7-(二乙氨基)香豆素-3-甲酸和碳酸钾的摩尔比为1:2～1:5；所述的7-(二乙氨基)香豆素-3-甲酸和碘化钾的摩尔比为1:0.1～1:0.3；

36、所述的取代反应温度为50～80℃。

37、反应结束后，反应液加水，乙酸乙酯萃取，取有机层，有机层经饱和氯化钠溶液洗，无水硫酸钠干燥，旋干，采用硅胶柱层析，以石油醚:乙酸乙酯＝1:1～3:1v/v为洗脱剂，分离得到化合物ⅲ。

38、步骤(2)中，所述的3,4-二苯环酰基-1,2,5-噁二唑-2-氧化物与式br(ch2)6oh的摩尔比为1:2～1:4；所述的3,4-二苯环酰基-1,2,5-噁二唑-2-氧化物和dbu的摩尔比为1:2～1:5；所述的取代反应的温度为常温。

39、反应结束后，反应液旋干，采用硅胶柱层析，以石油醚:乙酸乙酯＝10:1～15:1v/v为洗脱剂，分离得到化合物ⅳ。

40、步骤(3)中，所述的秦皮乙素与化合物ⅳ的摩尔比为1:1～1:2；所述的秦皮乙素和碳酸钾的摩尔比为1:2～1:5；所述的秦皮乙素和碘化钾的摩尔比为1:0.1～1:0.3；所述的取代反应的温度为50～80℃。

41、反应结束后，反应液加水，乙酸乙酯萃取，取有机层，有机层经饱和氯化钠溶液洗，无水硫酸钠干燥，旋干，采用硅胶柱层析，以石油醚:乙酸乙酯＝1:1～3:1v/v为洗脱剂，分离得到化合物ⅴ。

42、步骤(4)中，所述的化合物ⅴ与化合物ⅲ的摩尔比为1:1～1:4；所述的化合物ⅴ和碳酸钾的摩尔比为1:2～1:5；所述的化合物ⅴ和碘化钾的摩尔比为1:0.1～1:0.3；所述的取代反应的温度为60～75℃。

43、反应结束后，反应液加水，乙酸乙酯萃取，取有机层，有机层经饱和氯化钠溶液洗，无水硫酸钠干燥，旋干，采用硅胶柱层析，以石油醚:乙酸乙酯＝2:1v/v为洗脱剂，分离得到秦皮乙素衍生物。

44、3,4-二苯环酰基-1,2,5-噁二唑-2-氧化物是以苯硫乙酸为反应底物经氧化以及成环反应得到的，反应路线如下：

45、

46、包括：以苯硫乙酸为反应底物，冰醋酸为反应溶剂，30％过氧化氢溶液为氧化剂，室温反应3h；再缓慢滴加发烟硝酸，100℃回流4h，冷却抽滤，取滤饼，即为3,4-二苯环酰基-1,2,5-噁二唑-2-氧化物；其中，苯硫乙酸、过氧化氢和发烟硝酸的摩尔比＝1:2:9。

47、经体内外实验表明，本发明所述的秦皮乙素类衍生物具有较好的抗肿瘤活性，且对正常细胞毒性较小，有望成为具有研究前景的抗肿瘤药物。因此，本发明的另一个目的是提供所述的秦皮乙素类衍生物在制备治疗抗肿瘤药物中的应用。

48、所述的肿瘤为乳腺癌。

49、本发明的另一个目的是提供一种药物组合物，以本发明所述的秦皮乙素类衍生物为有效成分。

50、本发明的有益效果：

51、本发明秦皮乙素类衍生物的制备方法反应条件温和，所用试剂低毒，原料便宜易得，后处理方便，可以大量制备。药理实验表明，本发明秦皮乙素类衍生物具有较好的抗肿瘤活性，稳定性高，有望发展成为抗肿瘤药物。