本发明属于天然产物提取和纯化,具体涉及一种牡丹雄蕊三香豆酰亚精胺的高效分离纯化方法。
背景技术:
1、牡丹原产于中国西部秦岭和大巴山一带,除了作为观赏植物外,还可用于生产丹皮入药,具有改善心血管疾病、镇静、消炎和提高机体免疫力等药效。牡丹雄蕊是牡丹中重要的可开发利用资源,每年有千吨以上的牡丹鲜雄蕊产出,其中一部分被用来制作雄蕊茶,另一部分自然飘落,目前针对牡丹雄蕊尚未有进一步的开发利用。
2、n1-(e)-n5-(e)-n10-(e)-三香豆酰亚精胺是酚胺化合物,所示结构如下。
3、
4、三香豆酰亚精胺类物质具有调节植物生长、细胞增殖、诱导花的形成,在植物的发育和防御中有着特殊的功能。近年来研究表明,三香豆酰亚精胺类物质具有抗真菌、抗炎和抗氧化等多种功能活性。作为新兴的功能活性因子,三香豆酰亚精胺类物质可应用于保健品、化妆品和药品等多领域。当前n1-(e)-n5-(e)-n10-(e)-三香豆酰亚精胺主要从藏红花等药材花粉中分离获得,但由于该类物质的顺反异构体多达8个,目前大规格纯化制备较难。
技术实现思路
1、本发明为解决目前三香豆酰亚精胺分离纯化难度的技术问题,提供了一种牡丹雄蕊三香豆酰亚精胺的高效分离纯化方法,本方法能够从牡丹雄蕊提取分离获得三香豆酰亚精胺粗品,经过naoh溶液和hcl溶液的纯化获得纯度在96以上的三香豆酰亚精胺纯品。
2、本发明提供了一种牡丹雄蕊三香豆酰亚精胺的高效分离纯化方法,包括如下步骤:
3、s1,牡丹雄蕊粗提物的提取:取新鲜的牡丹雄蕊烘干,然后加入溶剂超声提取3-5次,合并提取液,浓缩除去溶剂,得到牡丹雄蕊粗提物;
4、s2,三香豆素亚精胺粗品的提取:将s1获得的牡丹雄蕊粗提物依次采用石油醚和乙酸乙酯等体积萃取,浓缩后获得乙酸乙酯粗提物,将乙酸乙酯粗提物经乙酸乙酯:甲醇进行梯度洗脱,梯度设置为80:1,40:1,20:1,10:1,8:1,分别获得上述梯度下的洗脱液,合并梯度为40:1,20:1,10:1,8:1的洗脱液,浓缩后,加入体积分数为50%的甲醇水溶液,析出白色固体,抽滤,真空干燥,获得香豆酰亚精胺粗品;
5、s3,三香豆素亚精胺的纯化:在s2获得的香豆酰亚精胺粗品中加入naoh碱液至完全溶解,然后滴加hcl溶液至ph≤3,白色固体析出后抽滤,保留固体,冻干,得到n1-(e)-n5-(e)-n10-(e)-三香豆素亚精胺纯品。
6、进一步地,s1中,牡丹雄蕊烘干温度为50-60℃。
7、进一步地,s1中,所述溶剂为甲醇和乙醇中的任意一种。
8、进一步地,s1中,所述牡丹雄蕊与甲醇质量比为1:6-10。
9、进一步地,s1中,所述牡丹雄蕊与甲醇质量比为1:8。
10、进一步地,s2中,石油醚和乙酸乙酯等体积萃取3-4次。
11、进一步地,s2中,所述乙酸乙酯粗提物经乙酸乙酯:甲醇梯度洗脱在100-200目的硅胶柱层析上进行。
12、进一步地,s3中,所述naoh碱液的浓度为0.001m。
13、进一步地,s3中,所述hcl溶液浓度为1n。
14、进一步地,s3中,加入hcl溶液时边搅拌边逐滴加入。
15、与现有技术相比,本发明的有益效果在于:
16、1、本发明提供的从牡丹雄蕊中提取分离纯化三香豆酰亚精胺的方法,显著提升了该三香豆素亚精胺的产量,并降低了生产成本;纯化方法使用碱液和酸液处理,与传统的制备液相相比,工艺简便易行,成本低廉,可大规格制备。该方法提高了牡丹雄蕊的利用率,最终检测到三香豆素亚精胺纯度为96.2%-97.2%。
1.一种牡丹雄蕊三香豆酰亚精胺的高效分离纯化方法,其特征在于,包括如下步骤:
2.根据权利要求1所述的牡丹雄蕊三香豆酰亚精胺的高效分离纯化方法,其特征在于,s1中,牡丹雄蕊烘干温度为50-60℃。
3.根据权利要求1所述的牡丹雄蕊三香豆酰亚精胺的高效分离纯化方法,其特征在于,s1中,所述溶剂为甲醇和乙醇中的任意一种。
4.根据权利要求1所述的牡丹雄蕊三香豆酰亚精胺的高效分离纯化方法,其特征在于,s1中,所述牡丹雄蕊与甲醇质量比为1:6-10。
5.根据权利要求4所述的牡丹雄蕊三香豆酰亚精胺的高效分离纯化方法,其特征在于,s1中,所述牡丹雄蕊与甲醇质量比为1:8。
6.根据权利要求1所述的牡丹雄蕊三香豆酰亚精胺的高效分离纯化方法,其特征在于,s2中,石油醚和乙酸乙酯等体积萃取3-4次。
7.根据权利要求1所述的牡丹雄蕊三香豆酰亚精胺的高效分离纯化方法,其特征在于,s2中,所述乙酸乙酯粗提物经乙酸乙酯:甲醇梯度洗脱在100-200目的硅胶柱层析上进行。
8.根据权利要求1所述的牡丹雄蕊三香豆酰亚精胺的高效分离纯化方法,其特征在于,s3中,所述naoh碱液的浓度为0.001m。
9.根据权利要求8所述的牡丹雄蕊三香豆酰亚精胺的高效分离纯化方法,其特征在于,s3中,所述hcl溶液浓度为1n。
10.根据权利要求8所述的牡丹雄蕊三香豆酰亚精胺的高效分离纯化方法,其特征在于,s3中,加入hcl溶液时边搅拌边逐滴加入。