向日葵尿黑酸植基转移酶基因HaVTE2在提高植物耐盐性能中的应用

本发明属于生物，具体涉及向日葵尿黑酸植基转移酶基因havte2在提高植物耐盐性能中的应用。

背景技术：

1、土壤盐渍化是指易溶性盐分在土壤表层逐渐累积，最终以晶体形式析出，是非常严峻的非生物胁迫之一，是农业生产中影响作物产量的主要限制因素。盐胁迫主要通过渗透胁迫、离子毒害、亚细胞水平的氧化胁迫及次生胁迫对植物体内细胞膜完整性和各种酶活性产生重大影响，阻碍植物对水分和养料的吸收与利用，造成膜功能紊乱和细胞死亡，最终导致植物在盐胁迫下的种子萌发、叶片和根的生长、株高和果实发育等均受到显著抑制。

2、种子萌发是从物理性的吸水阶段开始，进行一系列物质的转化与合成，经过一段时间，胚根突破种皮并继续伸长，表明种子已开始萌发。种子萌发期是作物生长发育的第一阶段，在盐渍环境下，种子萌发也会最先受到盐胁迫的影响。种子萌发在盐胁迫下，始终会受到渗透胁迫和离子毒害作用的影响，具体表现为，种子萌发速率和发芽率随盐胁迫浓度的增加而降低。种子萌发期受盐胁迫会直接影响种子发芽出苗，呼吸作用受到损害，光合作用被抑制，导致植株生长受到严重阻碍，作物产量、质量均下降。因此，通过基因工程改良和提高植物耐盐能力具有重要意义与应用价值。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供向日葵尿黑酸植基转移酶基因havte2在提高植物耐盐性能中的应用。

2、本发明是通过以下技术方案实现的：

3、向日葵尿黑酸转移酶基因havte2，其编码区的核苷酸序列如seq id no.1所示，所述seq id no.1由1194个核苷酸组成。

4、seq id no.1：

5、atgaagtctttgattcttgggtctttttcttcgtacaaggtttctacttattc

6、tctgccgtcaccagtttcatcttcttcacttgtatcatcaggttgttataatg

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23、gtcaaaagcgggtgttttggatctgtattttattacttgaagtggcttatgc

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27、gcagttgttctacgccgagtacttgctcataccgcttgtgaggtga

28、向日葵尿黑酸植基转移酶基因havte2，其编码的蛋白质的氨基酸序列如seq idno.2所示，所述的seq id no.2由397个氨基酸残基组成。

29、seq id no.2：

30、mkslilgsfssykvstyslpspvsssslvssgcynvsslgasknkgivqsqssfl

31、rcntdrtnksfllshkfntqrvasaiseqpvdpdptspqqslpnainafyrfsr

32、phtvigtalsivsvsllavqklsdfspsffigvleaivaaffmniyivglnqlsdi

33、eidkvnkpylplasgeysvktgiiivssfafmsfwlgwivgswplfwalfisfll

34、gtaysinmpmlrwkrfalvaamcilavravivqiafylhiqtfvygrlavfpkp

35、vifatgfmsffsvvialfkdipdivgdkifgiqsftvrlgqkrvfwicilllevay

36、availvgasspflwsryitvlghailglilwgraksidlenksaitsfymfiwql

37、fyaeylliplvr

38、向日葵尿黑酸植基转移酶基因havte2在提高植物耐盐性能中的应用，或在培育具有耐盐性能的转基因植物中的应用。本发明通过研究发现，向日葵尿黑酸植基转移酶基因havte2能够显著提高转基因植物在萌发期的耐盐性能。本发明为培育农作物新品种提供了理论依据和基因来源，有助于从根源上提高植物的耐盐性能。

39、上述应用，在具体应用时，将含有向日葵尿黑酸植基转移酶基因havte2的表达载体转入植物细胞或种子，使向日葵尿黑酸植基转移酶基因havte2过表达，从而获得稳定可遗传的耐盐转基因植株。

40、所述过表达基因序列为：向日葵尿黑酸植基转移酶基因havte2基因的cds全长序列，共1194bp。

41、进一步地，还包括收集所述稳定可遗传的耐盐转基因植株的种子，再用所述种子繁育获得后代种子，通过测序验证获得纯合的过表达的后代种子长成的植株。

42、所述测序验证的方法是，提取上述纯合的过表达的后代种子长成的植株的基因组dna，并用688-seq-f和cd3-ocs-seqr引物进行pcr扩增并测序：

43、688-seq-f:gggatgacgcacaatcccac，

44、cd3-ocs-seqr:gaatgaaccgaaaccggcgg。

45、一种植物表达载体，其含有上述向日葵尿黑酸植基转移酶基因havte2。

46、一种遗传工程化的宿主细胞，其含有上述植物表达载体，或其基因组中插入了向日葵尿黑酸植基转移酶基因havte2。

47、所述遗传工程化的宿主细胞的构建方法，是将上述植物表达载体导入宿主细胞中，使植物表达载体/向日葵尿黑酸植基转移酶基因havte2在宿主细胞中有效表达。

48、上述植物表达载体、遗传工程化宿主细胞在培育具有耐盐性能的转基因植物中的应用。

49、上述提及的植物为双子叶植物。优选地，所述双子叶植物为拟南芥、向日葵、白菜或甘蓝。

50、综上所述，本发明具有以下有益效果：

51、1.本发明通过将向日葵尿黑酸植基转移酶基因havte2连接于表达载体上，并利用农杆菌侵染法转化拟南芥，结果表明，转基因拟南芥在盐胁迫下的萌发率显著高于野生型拟南芥，说明向日葵尿黑酸植基转移酶基因havte2能够显著提高转基因植物在萌发期的耐盐性能。

52、2.通过在植物细胞或种子中过量表达向日葵尿黑酸植基转移酶基因havte2，可以获得耐盐性能优于野生型植株的转基因植物，这有利于在盐胁迫下提高植物的出苗率和成苗率，以及缩短出苗时间，提高存活率，长得更好。本发明为改造或培育其他耐盐的农作物新品种提供了理论依据和基因来源，有助于从根源上提高农作物的耐盐性能。