表现出适应性表型的NK细胞以及制备和使用方法

背景技术：

技术实现思路

1、本公开描述了一种表现出适应性表型的nk细胞、一种包括适应性nk细胞的组合物、一种分离的适应性nk细胞的群体、以及制备和使用所述组合物和分离群体的方法。由于适应性nk细胞与常规的nk细胞相比具有功能上独特的能力，当与常规的nk细胞相比时，所述功能上独特的能力容许所述适应性nk细胞提供额外的抗肿瘤能力或抗病毒能力，因此所述的组合物、群体、以及制备和使用那些组合物和群体的方法可以用于治疗或预防癌症、癌前病况、或病毒感染。

2、在一个方面，本公开描述了一种组合物，所述组合物包括适应性nk细胞。适应性nk细胞与常规的nk细胞相比具有功能上独特的能力并且当与常规的nk细胞相比时可以提供额外的抗肿瘤能力或抗病毒能力。

3、在一些实施方案中，所述适应性nk细胞是cd3-、cd56+、以及cd57+、nkg2c+、syk-、fcεrγ-、eat-2-、cd56暗、tigit低、cd45ro+、和cd45ra-中的至少一种。在一些实施方案中，所述适应性nk细胞是长寿命的。在一些实施方案中，所述适应性nk细胞是cd57+、nkg2c+、syk-、fcεrγ-、eat-2-、cd56暗、tigit低、cd45ro+、以及cd45ra-中的至少两种。举例来说，所述适应性nk细胞可以是cd57+和nkg2c+。在一些实施方案中，所述适应性nk细胞是cd57+、nkg2c+、syk-、fcεrγ-、eat-2-、cd56暗、tigit低、cd45ro+、以及cd45ra-中的至少三种。举例来说，所述适应性nk细胞可以是syk-、fcεrγ-、以及eat-2。

4、在一些实施方案中，与常规的nk细胞相比，在适应性nk细胞中早幼粒细胞性白血病锌指(plzf)转录因子的表达降低。举例来说，所述plzf表达可以降低至少90％。在一些实施方案中，所述适应性nk细胞不表达所述转录因子早幼粒细胞性白血病锌指(plzf)。

5、在一些实施方案中，所述适应性nk细胞显示出抗肿瘤活性。所述肿瘤可以包括造血组织和/或淋巴组织的肿瘤。所述肿瘤可以是实体肿瘤。

6、在一些实施方案中，所述适应性nk细胞源自于在包含il-15、il-21、il-18、il-12、il-2、ifn-α、或ifn-β中的至少一种的培养基中培养的细胞；在包含雷帕霉素(rapamycin)的培养基中培养的细胞；在包含notch配体的培养基中培养的细胞；和/或在包含nkg2c受体激动剂的培养基中培养的细胞。

7、在一些实施方案中，所述适应性nk细胞是在体内制备的。在一些实施方案中，所述制备包括向受试者施用巨细胞病毒(cmv)疫苗；向受试者施用灭活的巨细胞病毒(cmv)；向受试者施用细胞因子；和/或向受试者施用notch配体。所述细胞因子可以包括例如il-15、il-21、il-12、il-18、以及gm-csf中的至少一种。在一些实施方案中，所述细胞因子或细胞因子的组合可以高剂量施用。在一些实施方案中，所述制备包括诱导受试者的notch配体的表达。在一些实施方案中，所述受试者是cmv血清阳性的。

8、本公开还描述了一种用于在受试者中治疗或预防癌症、癌前病况、或病毒的方法，其中所述方法包括向所述受试者施用包含适应性nk细胞的组合物。在一些实施方案中，所述癌症包括骨癌、脑癌、乳腺癌、宫颈癌、卵巢癌、喉癌、肺癌、胰腺癌、前列腺癌、皮肤癌、脊柱癌、胃癌、子宫癌、造血系统癌症、或淋巴癌。在一些实施方案中，所述癌症是转移性癌症。

9、本公开还描述了一种抑制受试者的肿瘤生长的方法。所述方法包括向所述受试者施用包含适应性nk的组合物。在一些实施方案中，所述肿瘤包括实体肿瘤。在一些实施方案中，所述病毒包括慢病毒或疱疹病毒。在一些实施方案中，所述组合物还包括药学上可接受的载体。

10、本公开还描述了一种用于在受试者中治疗或预防癌症或癌前病况的方法，其中所述方法包括体内制备适应性nk细胞。在一些实施方案中，所述癌症包括骨癌、脑癌、乳腺癌、宫颈癌、卵巢癌、喉癌、肺癌、胰腺癌、前列腺癌、皮肤癌、脊柱癌、胃癌、子宫癌、造血系统癌症、或淋巴癌。在一些实施方案中，所述癌症是转移性癌症。

11、本公开还描述了一种抑制受试者的肿瘤生长的方法，所述方法包括体内制备适应性nk细胞。在一些实施方案中，所述肿瘤包括实体肿瘤。在一些实施方案中，所述方法还包括施用包含治疗剂的组合物。在一些实施方案中，所述治疗剂可以是非天然存在的和/或可以非天然存在的量施用。所述治疗剂可以包括例如细胞因子、趋化因子、治疗性抗体、佐剂、抗氧化剂、或化学治疗剂中的至少一种。

12、本公开还描述了一种制备适应性nk细胞的方法。在一些实施方案中，在体外制备所述适应性nk细胞。在一些实施方案中，所述适应性nk细胞源自于来自未感染过巨细胞病毒(cmv)的来源的细胞、从血液中分离的细胞、多潜能干细胞、胚胎干细胞、从脐带血中分离的细胞、和/或诱导多潜能干细胞(ipsc)。

13、在另一个方面，本公开描述了获得适应性nk细胞的方法。所述方法包括从受试者获得血液样品以及培养所述血液样品的nk细胞的群体。在一些实施方案中，在包括il-15、il-21、以及notch配体中的一种或多种的培养基中培养所述nk细胞的群体。在一些实施方案中，将所述nk细胞群体与cmv肽补充的成熟树突状细胞一起培养。在一些实施方案中，将所述nk细胞群体与自体单核白细胞和il-15一起培养。在一些实施方案中，所述适应性nk细胞是cd56暗并且是nkg2c+和tigit低中的一种或多种。

14、在另一个方面，本公开描述了一种组合物，所述组合物包括通过本文所述的方法获得的适应性nk细胞。在另一个方面，本公开描述了所述组合物包括nk细胞的群体，所述nk细胞的群体是针对通过本文所述的方法所获得的适应性nk细胞富集的。

15、在另一个方面，本公开描述了一种分离的nk细胞群体，其中所述细胞是cd56暗、以及nkg2c+、cd57+、和tigit低中的一种或多种。在另一个方面，本公开描述了一种分离的nk细胞群体，其中所述分离的群体是针对cd56暗和nkg2c+的nk细胞富集的。本公开还描述了包括本文所述的分离群体的组合物。

16、词语“优选的”和“优选地”指的是在某些情况下可以提供某些益处的本发明的实施方案。然而，在相同的或其它情况下，其它实施方案也可以是优选的。此外，对一个或多个优选的实施方案的叙述并不意味着其它实施方案不可用，并且不意图将其它实施方案排除在本发明的范围之外。

17、术语“包含”和其变化形式在这些术语在说明书和权利要求书中出现的情况下没有限制性含义。

18、除非另外说明，否则“一个(种)(a/an)”、“所述”以及“至少一个(种)”可互换使用并且意指一个(种)或多于一个(种)。

19、此外在本文中，通过端点对数值范围的叙述包括该范围内所包括的所有数字(例如1至5包括1、1.5、2、2.75、3、3.80、4、5等)。

20、对于包括不连续步骤的本文所公开的任何方法，所述步骤可以按照任何可行的顺序进行。并且适当时，两个或更多个步骤的任何组合可以同时进行。

21、本发明的上述
技术实现要素：
不意图描述本发明的每一个公开的实施方案或每一个实施方式。随后的说明更具体举例说明了说明性实施方案。在贯穿本技术的几处，经由实例的清单提供指导，这些实例可以各种组合使用。在每一种情况下，所述的清单仅用作代表性组并且不应当被解释成排他性清单。