本发明涉及一种慢性乙型肝炎患者肝纤维化的检测方法,具体涉及一种慢性乙型肝炎患者肝纤维化的联合标志物的检测方法及应用,属于生物医药。
背景技术:
1、慢性乙型肝炎(chb)是由乙肝病毒(hbv)持续感染6个月以上引起的慢性肝脏炎症性疾病。肝脏慢性持续的炎症反应会导致肝纤维化的发生,肝硬化为慢性炎症和纤维化的终末阶段,而严重的肝硬化最终会导致肝癌的发生。扩大慢性乙型肝炎抗病毒专家意见中指出,肝脏病变纤维化分期≥2期以上即可启动抗病毒治疗,使患者生存获益。
2、由于肝功能的复杂性,评价肝纤维化各种技术手段均存在一定的局限性,如血清学检查需要同时检测多个指标,综合判断得出结论,但其并不能将肝纤维化准确分期,且和病理检测结果之间的差异较大;影像学检查区分肝硬化或轻微肝纤维化相对可靠,但对中间区域的肝纤维化不能明确分期,且受患者转氨酶水平、胆红素、腹水、肥胖和操作人员经验不同的影响而造成偏差,其结果的判读需要结合患者谷丙转氨酶和胆红素水平等指标;病理学检查肝活检是评估肝纤维化程度的金标准,但由于侵入性、并发症风险高和一致性差,不适合常规应用,其患者接受程度差、费用高。因此,需要新的标志物对慢性乙型肝炎患者肝纤维化进行检测。
3、人体内血清中n-糖蛋白主要由肝脏和b淋巴细胞合成,n-糖蛋白的糖链(glycan)结构与数量的异常往往可以反映肝脏病变。肝功能检查相关指标谷草转氨酶(ast)和谷氨酰胺转移酶(ggt)可在一定程度上反映肝细胞损伤程度;此外,血液生化指标,如血小板(plt)的变化可以间接反映肝脏功能状态。因此,多维度的标志物联合对检测慢性乙型肝炎肝纤维具有潜在的临床价值。
技术实现思路
1、针对目前临床上使用的慢性乙型肝炎患者肝纤维化检测中存在的问题,本发明提供一种用于检测慢性乙型肝炎患者肝纤维化状态的联合标志物评分以及其研究方法的建立。本发明基于慢性乙型肝炎患者糖链、血小板(plt)、谷草转氨酶(ast)和谷氨酰胺转移酶(ggt)的变化,建立联合标志物的评分,基于评分评估慢性乙型肝炎患者肝纤维化状态。
2、本发明采用的技术方案如下:
3、一种检测慢性乙型肝炎患者肝纤维化的联合标志物,由糖链、血小板、谷草转氨酶和谷氨酰胺转移酶组成。
4、优选的,所述血小板标记为plt,谷草转氨酶标记为ast,谷氨酰胺转移酶标记为ggt。
5、一种检测慢性乙型肝炎患者肝纤维化的检测方法,包括以下步骤:
6、步骤一 样本标志物的检测
7、收集乙型肝炎患者的样本,并对收集的样本进行标志物plt、ast、ggt检测,得到相关检测数据结果;
8、步骤二 样本糖链的检测
9、对收集的样本进行糖链检测,得到相关检测数据结果;
10、步骤三 数据分析
11、通过对步骤一和步骤二的标志物和糖链检测数据进行分析,构建联合标志物模型来评估慢性乙型肝炎患者的肝纤维化状态。
12、优选的,所述步骤二中样本类型为体液。
13、优选的,所述步骤二中样本类型为血清或血浆。
14、一种联合标志物在检测慢性乙型肝炎患者肝纤维化中的应用,其特征在于,所述联合标志物由糖链、plt、ast和ggt组成,联合标志物通过构建模型计算相关数值来评估慢性乙型肝炎患者肝纤维化状态。
15、优选的,所述联合标志物通过构建逻辑回归模型计算logit-y=(9×糖链+5×ast+3×ggt)/plt的值来评估慢性乙型肝炎患者肝纤维化状态。
16、与现有技术相比,本发明的有益效果:
17、(1)将慢性乙型肝炎显著肝纤维化患者(259例)和慢性乙型肝炎无或轻度肝纤维化患者(216例)各标志物(糖链、plt、ast和ggt)数据进行对比分析。基于联合标志物建立的“logit-y=(9×糖链+5×ast+3×ggt)/plt”模型在区分慢性乙型肝炎显著肝纤维化患者时roc曲线下auc值达到0.950(图2),该“logit-y=(9×糖链+5×ast+3×ggt)/plt”模型检测的cut off值为4.50时,对慢性乙型肝炎显著肝纤维化检测的灵敏度为86.00%,特异度为90.00%,表明联合标志物“logit-y=(9×糖链+5×ast+3×ggt)/plt”可以作为评估慢性乙型肝炎患者显著肝纤维化的标志物。
18、(2)本发明将敏感性较高的糖链和plt,特异性较高的ast和ggt相结合,建立多个标记物联用的评分模型来提高预测的敏感性和特异性。
19、(3)本发明的检测技术具有灵敏度高、操作简单、重复性高、稳定性好、高通量等优点。
1.一种检测慢性乙型肝炎患者肝纤维化的联合标志物,其特征在于,所述联合标志物由糖链、血小板、谷草转氨酶和谷氨酰胺转移酶组成。
2.根据权利要求1所述的检测慢性乙型肝炎患者肝纤维化的联合标志物,其特征在于,所述血小板标记为plt,谷草转氨酶标记为ast,谷氨酰胺转移酶标记为ggt。
3.根据权利要求2所述的检测慢性乙型肝炎患者肝纤维化的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
4.根据权利要求3所述的检测慢性乙型肝炎患者肝纤维化的检测方法,其特征在于,所述步骤二中样本类型为体液。
5.根据权利要求4所述的检测慢性乙型肝炎患者肝纤维化的检测方法,其特征在于,所述步骤二中样本类型为血清或血浆。
6.一种联合标志物在检测慢性乙型肝炎患者肝纤维化中的应用,其特征在于,所述联合标志物由糖链、plt、ast和ggt组成,联合标志物通过构建模型计算相关数值来评估慢性乙型肝炎患者肝纤维化状态。
7.根据权利要求6所述的联合标志物在检测慢性乙型肝炎患者肝纤维化中的应用,其特征在于,所述联合标志物通过构建逻辑回归模型计算logit-y=(9×糖链+5×ast+3×ggt)/plt的值来评估慢性乙型肝炎患者肝纤维化状态。