一种用于分离罗伊氏乳杆菌和瑞士乳杆菌的培养基及其应用的制作方法

本发明属于菌种计数，具体涉及一种用于分离罗伊氏乳杆菌和瑞士乳杆菌的培养基及其应用。

背景技术：

1、罗伊氏乳杆菌是一类普遍存在于人和动物肠道内的益生菌，具有提高免疫力、改善过敏体质、预防过敏反复发作及改善婴儿肠绞痛等的生物作用。罗伊氏乳杆菌，具有添加到乳制品中室温下长时间保持活性的特征，同时对肠应激综合症有明显的改善效果；瑞士乳杆菌是比较常见的乳酸菌，目前发现具有的生物作用有预防胃肠道感染、抗高血压、改善脑功能及免疫调节作用等；因此，设计开发针对罗伊氏乳杆菌和瑞士乳杆菌的特异性培养基具有重要意义。

技术实现思路

1、本发明旨在至少解决上述现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提出一种用于分离罗伊氏乳杆菌或瑞士乳杆菌的培养基。

2、本发明还提出一种上述培养基的应用。

3、本发明还提出一种罗伊氏乳杆菌的分离方法。

4、本发明还提出一种瑞士乳杆菌的分离方法。

5、根据本发明的一个方面，提出了一种用于分离罗伊氏乳杆菌或瑞士乳杆菌的培养基，所述培养基含有盐酸克林霉素和环丙沙星，或万古霉素和环丙沙星。

6、在本发明的一些实施方式中，所述培养基为mrs琼脂。

7、在本发明的一些实施方式中，所述mrs琼脂浓度为60-70mg/ml。

8、在本发明的一些实施方式中，若所述培养基同时含有盐酸克林霉素和环丙沙星，其中，所述环丙沙星的浓度为0.01-0.025mg/ml，所述盐酸克林霉素的浓度为0.0001-0.001mg/ml；若所述的培养基同时含有环丙沙星和万古霉素，其中，所述环丙沙星的浓度为0.01-0.025mg/ml，所述万古霉素的浓度为0.05-0.1mg/ml。

9、在本发明的一些实施方式中，若所述培养基同时含有盐酸克林霉素和环丙沙星，其中，所述环丙沙星的浓度为0.01-0.02mg/ml，所述盐酸克林霉素的浓度为0.0001-0.0007mg/ml；若所述的培养基同时含有环丙沙星和万古霉素，其中，所述环丙沙星的浓度为0.01-0.02mg/ml，所述万古霉素的浓度为0.05-0.09mg/ml。

10、在本发明的第二方面，提出了一种上述培养基的应用，所述应用为在制备分离乳杆菌的产品中的应用。

11、在本发明的一些实施方式中，所述应用为在制备用于乳杆菌计数的产品中的应用。

12、在本发明的一些实施方式中，所述乳杆菌为罗伊氏乳杆菌和/或瑞士乳杆菌。

13、在本发明的第三方面，提出了一种罗伊氏乳杆菌的分离方法，所述方法包括以下步骤：将待分离的菌液加入上述培养基中，所述培养基同时含有万古霉素和环丙沙星，分离得到罗伊氏乳杆菌。

14、在本发明的第四方面，提出了一种瑞士乳杆菌的分离方法，所述方法包括以下步骤：将待分离的菌液加入上述培养基中，所述培养基同时含有盐酸克林霉素和环丙沙星，分离得到瑞士乳杆菌。

15、在本发明的第五方面，提出了一种罗伊氏乳杆菌的计数方法，所述方法包括以下步骤：将待测菌液加入上述培养基中，所述培养基同时含有万古霉素和环丙沙星，32℃-38℃厌氧培养60-80h后，对菌落进行计数。

16、在本发明的第六方面，提出了一种瑞士乳杆菌的计数方法，所述方法包括以下步骤：将待测菌液加入上述培养基中，所述培养基同时含有盐酸克林霉素和环丙沙星，32℃-38℃厌氧培养60-80h后，对菌落进行计数。

17、根据本发明的一些实施方式，至少具有以下有益效果：本发明提出了一种用于分离罗伊氏乳杆菌和瑞士乳杆菌的培养基，通过对罗伊氏乳杆菌和瑞士乳杆菌分离的最优抗生素组合和剂量进行筛选，实现罗伊氏乳杆菌和瑞士乳杆菌混合产品中的单菌计数。同时可实现为罗伊氏乳杆菌和瑞士乳杆菌产品研发、配方验证、工艺验证和产品功能性试验等领域的研究提供数据参考。

技术特征：

1.一种用于分离罗伊氏乳杆菌或瑞士乳杆菌的培养基，其特征在于：所述培养基含有盐酸克林霉素或万古霉素，还包括环丙沙星。

2.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于：若所述培养基同时含有盐酸克林霉素和环丙沙星，所述环丙沙星的浓度为0.01-0.025mg/ml，所述盐酸克林霉素的浓度为0.0001-0.001mg/ml；若所述的培养基同时含有环丙沙星和万古霉素，所述环丙沙星的浓度为0.01-0.025mg/ml，所述万古霉素的浓度为0.05-0.1mg/ml。

3.根据权利要求2所述的培养基，其特征在于：若所述培养基同时含有盐酸克林霉素和环丙沙星，所述环丙沙星的浓度为0.01-0.02mg/ml，所述盐酸克林霉素的浓度为0.0001-0.0007mg/ml；若所述的培养基同时含有环丙沙星和万古霉素，所述环丙沙星的浓度为0.01-0.02mg/ml，所述万古霉素的浓度为0.05-0.09mg/ml。

4.根据权利要求1-3任一项所述的培养基，其特征在于：所述培养基为mrs琼脂培养基。

5.权利要求1-4任一项所述的培养基在制备用于乳杆菌计数的产品中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：所述乳杆菌为罗伊氏乳杆菌和/或瑞士乳杆菌。

7.一种罗伊氏乳杆菌的分离方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：将待分离的菌液加入权利要求1-4任一项所述的培养基中，所述培养基同时含有万古霉素和环丙沙星，分离得到罗伊氏乳杆菌。

8.一种瑞士乳杆菌的分离方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：将待分离的菌液加入权利要求1-4任一项所述的培养基中，所述培养基同时含有盐酸克林霉素和环丙沙星，分离得到瑞士乳杆菌。

9.一种罗伊氏乳杆菌的计数方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：将待测菌液加入权利要求1-4任一项所述的培养基中，所述培养基同时含有万古霉素和环丙沙星，32℃-38℃厌氧培养60-80h后，对菌落进行计数。

10.一种瑞士乳杆菌的计数方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：将待测菌液加入权利要求1-4任一项所述的培养基中，所述培养基同时含有盐酸克林霉素和环丙沙星，32℃-38℃厌氧培养60-80h后，对菌落进行计数。

技术总结
本发明公开了一种用于分离罗伊氏乳杆菌和瑞士乳杆菌的培养基及其应用，所述培养基包括盐酸克林霉素或万古霉素，还包括环丙沙星。本发明方案制备得到的培养基通过对罗伊氏乳杆菌和瑞士乳杆菌分离的最优抗生素组合和剂量进行筛选，实现罗伊氏乳杆菌和瑞士乳杆菌混合产品中的单菌计数。同时可实现为罗伊氏乳杆菌和瑞士乳杆菌产品研发、配方验证、工艺验证和产品功能性试验等领域的研究提供数据参考。

技术研发人员：萧慧珍,黄少云,黄瑞娟,房树超,黄宏霞,古润金
受保护的技术使用者：完美（广东）日用品有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15