一种低频超声获取玫瑰苷的方法与流程

本发明涉及植物糖苷提取领域，特别涉及一种低频超声获取玫瑰苷的方法。

背景技术：

1、玫瑰是蔷薇科、蔷薇属多种植物和培育花卉的通称名字。现代医学界认为玫瑰花具有强肝、解闷、解郁、解毒、强肺，去除抗生物质所致的药害、平衡内分泌、缓和神经疲劳、宿醉等功效。玫瑰花中含有多种挥发性成分如挥发油、香茅醇、橙花醇、丁香油酚、苯乙醇等一些具有香味的物质，还含有棚皮试、靴质、蜡质、脂肪油、有机酸、玫率红色素、β-胡萝卜素、氨基酸及多种维生素和微量元素，在玫瑰花理气解郁、和血散淤、收敛止泻、柔肝醒味这些功效上起到了巨大的作用，同时玫瑰花中的花青素、黄酮、多糖、核酸可进行循环利用。苷类，又称配糖体，是由糖或糖衍生物的端基碳原子与另一类非糖物质(称为苷元、配基或甙元)连接形成的化合物。玫瑰苷也称为玫瑰花苷，玫瑰苷被食品和医学界公认具有生理活性的物质和特定的保健功效。玫瑰苷的作用是比较广泛的，不仅能润肤养颜、减脂瘦身、活血化瘀适量的饮用可以缓解便秘，具有大量的纤维素，能够促进肠胃的蠕动，达到减脂瘦身的效果。玫瑰苷还具有活血和补血的功效，可以调理女性月经不调和经期腹痛。现有玫瑰苷的提取方法及缺点是：(1)水提醇沉法：耗时较长，提取率也较低，长时间的提取也会对多糖的活性和结构造成一定的影响；(2)微波法：易破坏多糖结构；(3)酶法提取：酶法提取酶的造价较高，工业上使用酶法成本过高，不适于大量生产；(4)超临界co2萃取：对操作技术要求高。因此迫切需求一种操作简单、提取率高的低频超声获取玫瑰苷的方法。

技术实现思路

1、针对现有技术的上述缺陷，本发明提供一种低频超声获取玫瑰苷的方法，以解决上述背景技术提出的问题。

2、为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：一种低频超声获取玫瑰苷的方法，包括如下步骤：

3、s1、原料预处理：将玫瑰花洗净自然晾干，置于真空干燥箱80℃中烘干，后粉碎成70目玫瑰粉末即可；

4、s2、原料超声提取：以聚乙二醇-硫酸铵-水作为提取剂，将步骤s1所得的玫瑰粉末和提取剂按质量比1：5～8混合，搅拌均匀后，进行超声提取20～30min，即得混合液；其中聚乙二醇、硫酸铵和水的质量比为1:3～5：7～9，超声为低频超声，超声功率为1～3kw，超声频率为20～28khz，提取温度为35～45℃；

5、s3、混合液处理：将步骤s2所得的混合液进行离心，上清液取出后，向沉淀物中加入聚乙二醇再超声提取1～3次，并将上清液全部合并；将合并的上清液依次通过减压蒸发和超滤膜过滤，回收聚乙二醇和硫酸铵，得提取液；其中离心转速为2000～4000rpm，离心时间为10～15min，减压蒸发压力为0.03～0.05mpa，减压蒸发温度为200～260℃，减压蒸发时间为8～10min；

6、s4、提取液处理：向步骤s3所得的提取液中加入总质量4～6倍的乙醇水溶液和氯化钠水溶液，乙醇水溶液-氯化钠水溶液体积比为2～4:1，加热至45～50℃后搅拌混匀，待冷却至室温，后过阳离子交换层析柱以无水乙醇溶液洗脱，收集合并洗脱液，减压浓缩得到目标提取液；

7、s5、脱色精制：将粉末状活性炭加入s4所得的目标提取液中，活性炭添加量为0.1～0.3g/ml，混合均匀后，恒温水浴1～3h；离心后取上清液，利用微孔滤膜进行抽滤1～3次，去除活性炭残渣，即得玫瑰苷；其中离心转速为1000～3000rpm，微孔滤膜的孔径大小为0.22～0.70μm。

8、进一步地，本申请使用的玫瑰是来自海南玫瑰谷产业发展有限公司的保加利亚品种。

9、进一步地，聚乙二醇的规格是peg4000，购自上海链集化工有限公司。

10、进一步地，步骤s2中超声设备为超声波萃取提取机y-tc-5，购自上海宇砚机械设备有限公司。

11、进一步地，步骤s2中玫瑰粉末和提取剂按质量比1:7混合，超声提取25min，聚乙二醇、硫酸铵和水的质量比为1：4：8，超声功率为2kw，超声频率为25khz，提取温度40℃。

12、进一步地，步骤s3中离心机型号为td-5m，购自济南天勤好生物科技有限公司；减压蒸发仪器为旋转蒸发仪re-10l，购自郑州衡铎仪器设备有限公司。

13、进一步地，步骤s3中超声提取2次，离心转速3000rpm，离心时间为12min，减压蒸发压力为0.04mpa，减压蒸发温度为250℃，减压蒸发时间为9min，超滤膜尺寸为0.01μm。

14、进一步地，步骤s4中乙醇水溶液和氯化钠水溶液是总质量5倍，乙醇水溶液质量浓度为95％，氯化钠水溶液质量浓度为0.1mol/l，乙醇水溶液-氯化钠水溶液体积比为3:1，加热48℃搅拌混匀。阳离子交换层析柱的制备方法是取阳离子纤维素8g，加去离子水50ml，溶散后装柱。先加0.2mmol/l的naoh溶液洗涤，加水洗涤至中性，再加0.2mmol/l的hcl洗涤，加水洗涤至中性，保存备用。

15、进一步地，阳离子纤维素是氯化-2-羟基-3-(三甲氨基)丙基聚环氧乙烷纤维素醚，购自济宁棠邑化工有限公司。

16、更进一步地，步骤s5所述的活性炭添加量为0.2g/ml，混合均匀后，恒温温度为45℃，恒温水浴2h；离心后取上清液，利用微孔滤膜进行抽滤2次，去除活性炭残渣，其中微孔滤膜的孔径大小为0.45μm，其中离心转速为2000rpm，微孔滤膜购自广东环凯微生物科技有限公司。

17、更进一步地，玫瑰花是鲜玫瑰花或玫瑰花渣中的任一种。

18、更进一步地，所提取得到的玫瑰苷在制备抗氧化药物中的应用。

19、更进一步地，所提取得到的玫瑰苷在制备抗肿瘤药物中的应用

20、与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明提供一种低频超声获取玫瑰苷的方法，将玫瑰花烘干粉碎，扩大与提取剂的接触面积，有利于提高玫瑰苷的提取率。使用聚乙二醇-硫酸铵作为提取剂，能够把玫瑰花中有效成分挥发油、单萜类、多酚类、生物碱类等物质带出，且聚乙二醇能蒸发去除，无有机溶剂残留保证安全。浓缩液溶解于乙醇和氯化钠混合液中，在室温条件下，快速通过阳离子纤维素，使蛋白质吸附于阳离子纤维素后去除，有效去除掉杂质蛋白，保证玫瑰苷的纯度。本发明可充分提取玫瑰花渣中的有效成分，避免浪费。

技术特征：

1.一种低频超声获取玫瑰苷的方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种低频超声获取玫瑰苷的方法，其特征在于，步骤s2中玫瑰粉末和提取剂按质量比1:7混合，超声提取25min，聚乙二醇、硫酸铵和水的质量比为1：4：8，超声功率为2kw，超声频率为25khz，提取温度40℃。

3.根据权利要求1所述的一种低频超声获取玫瑰苷的方法，其特征在于，步骤s3中超声提取2次，离心转速3000rpm，离心时间为12min，减压蒸发压力为0.04mpa，减压蒸发温度为250℃，减压蒸发时间为9min。

4.根据权利要求1所述的一种低频超声获取玫瑰苷的方法，其特征在于，步骤s4中乙醇水溶液和氯化钠水溶液是总质量的5倍，乙醇水溶液质量浓度为95％，氯化钠水溶液质量浓度为0.1mol/l，乙醇水溶液-氯化钠水溶液体积比为3:1，加热48℃搅拌混匀。

5.根据权利要求1所述的一种低频超声获取玫瑰苷的方法，其特征在于，步骤s5所述的活性炭添加量为0.2g/ml，混合均匀后，恒温温度为45℃，恒温水浴2h；离心后取上清液，利用微孔滤膜进行抽滤2次，去除活性炭残渣，其中离心转速为2000rpm，微孔滤膜的孔径大小为0.45μm。

6.根据权利要求1所述的一种低频超声获取玫瑰苷的方法，其特征在于，玫瑰花是鲜玫瑰花或玫瑰花渣中的任一种。

7.由权利要求1-6任一项所述的方法提取得到的玫瑰苷。

8.权利要求7所述的玫瑰苷在制备抗氧化药物中的应用。

9.权利要求7所述的玫瑰苷在制备抗肿瘤药物中的应用。

技术总结
本发明公开一种低频超声获取玫瑰苷的方法，包括以下步骤：(1)原料预处理；(2)原料超声提取；(3)混合液处理；(4)提取液处理(5)脱色精制。本发明将玫瑰花烘干粉碎，扩大与提取剂的接触面积，有利于提高玫瑰苷的提取率。同时使用聚乙二醇‑硫酸铵‑水作为提取剂，能够把玫瑰花中有效成分挥发油、单萜类、多酚类、生物碱类等物质带出，且聚乙二醇能减压蒸发去除，无有机溶剂残留保证安全。提取液溶解于乙醇和氯化钠混合液中，在室温条件下，快速通过阳离子纤维素，使杂质蛋白质吸附于阳离子纤维素后去除。本发明具有快速、高效、操作简便等优势，具有较高的应用价值和开发前景。

技术研发人员：杨莹,石晓光,许惠秋,苏文茂,张贻雷,洪世阳,黎经田,陈泰浩,何爱川,梁丽菁
受保护的技术使用者：海南玫瑰谷产业发展有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15