一种DMAE类吖啶酯及其制备方法和应用与流程

本发明涉及，具体涉及一种dmae类吖啶酯其制备方法和应用。

背景技术：

1、目前，dmae类吖啶酯标记酶的方法中，发光原理是吖啶酯的分子受到过氧化氢离子进攻时，吖啶环上的取代基能与吖啶环上的c-9和h2o2(过氧化氢)形成不稳定的二氧乙烷，此二氧乙烷分解为co2和电子激发态的n-甲基吖啶酮。当其回到基态时发出最大发射波长为430nm的光子。然而在生物试验过程中，此类吖啶酯标记物发光效率较低，且稳定性较差。

2、因此，本领域亟待开发提高吖啶酯标记物发光效率及稳定性的方法。

技术实现思路

1、本发明的目的之一在于克服现有技术的不足，提供一种dmae类吖啶酯，可以应用于常规dmae类吖啶酯标记的方法，也可以有效地增加标记物的发光效率和稳定性。

2、为了解决上述问题，本发明所采用的技术方案是：

3、本发明提供一种dmae类吖啶酯，具有如下结构：

4、

5、其中，n为2。

6、优选地，所述dmae类吖啶酯的分子量为2227.26。

7、本发明将传统dmae-nhs吖啶酯(cas 115853-74-2)改造为聚合物，当受到过氧化氢离子进攻时，同时离去多个基团，发光值将会成倍增加，进而提升标记物的发光效率以及稳定性。

8、本发明的目的之二在于提供目的之一所述的dmae类吖啶酯的制备方法，所述制备方法包括如下步骤：

9、将化合物6与4-二甲氨基吡啶(dmap)、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺(edc)反应，得到化合物7，即为所述dmae类吖啶酯，反应式如下：：

10、

11、其中，化合物6的化学名称为(4-(9-((3-氨基-4-(((2,5-二氧代吡咯烷-1-基)氧)羰基)-2,6-二甲基苯氧基)羰基)吖啶-10-鎓-10-基)丁酸酯)。

12、优选地，化合物6与1.1当量的dmap、edc反应。

13、优选地，所述化合物6的制备方法包括如下步骤：

14、化合物5与氨基甲醇溶解在甲醇溶液中，在pd与碳的催化下反应，得化合物6，反应式如下：

15、

16、其中，化合物5的化学名称为(4-(9-((4-((((2,5-二氧代吡咯烷-1-基)氧基)羰基)-2,6-二甲基-3-硝基苯氧基))羰基)吖啶-10-鎓-10-基)丁酸酯)。

17、优选地，化合物5与1.2当量的氨基甲醇反应。

18、优选地，所述化合物5的制备方法包括如下步骤：

19、将化合物4与丁酸在无水甲苯中反应，反应后混合物过滤纯化后得到化合物5，反应式如下：

20、

21、其中，化合物4的化学名称为(4-(((2,5-二氧代吡咯烷-1-基)氧基)羰基)-2,6-二甲基-3-硝基苯基吖啶-9-甲酸酯)。

22、优选地，所述化合物4的制备方法包括如下步骤：

23、将化合物3与乙腈混合，室温反应，过滤后得到化合物4，反应式如下：

24、

25、其中，化合物3的化学名称为(4-((吖啶-9-羰基)氧基)-3,5-二甲基-2-硝基苯甲酸)与当量1.1倍的n-甲酰基-n-羟基丙酰胺。

26、优选地，所述化合物3与乙腈反应的时间为1-3h，优选2h。

27、优选地，所述化合物3的制备方法包括如下步骤：

28、将化合物2与氯胺混合，常温反应，纯化后得到化合物3，反应式如下：

29、

30、其中，化合物2的化学名称为(4-(甲氧基羰基)-2,6-二甲基-3-硝基苯基吖啶-9-甲酸酯)。

31、优选地，所述化合物2与1.05当量的氯胺反应。

32、优选地，所述化合物2与氯胺反应的时间为4-6h，优选5h。

33、优选地，所述化合物2的制备方法包括如下步骤：

34、将化合物1与吖啶-9-甲酸、4-甲苯磺酰氯(tscl)混合，反应，，纯化后得到化合物2，反应式如下：

35、

36、其中，化合物1的化学名称为(4-羟基-3,5-二甲基-2-硝基苯甲酸甲酯)。

37、优选地，所述化合物1与吖啶-9-甲酸、4-甲苯磺酰氯反应的温度为160-180℃，优选170℃。

38、优选地，所述化合物1与吖啶-9-甲酸、4-甲苯磺酰氯反应的时间为8-12h，优选10h。

39、优选地，所述化合物1的制备方法包括如下步骤：

40、将4-羟基-3,5-二甲基-2-硝基苯甲酸、氯化亚砜(socl2)及甲醇混合，反应，纯化后得到化合物1，反应式如下：

41、

42、优选地，所述4-羟基-3,5-二甲基-2-硝基苯甲酸、氯化亚砜及甲醇反应的温度为90-110℃，优选100℃。

43、优选地，所述4-羟基-3,5-二甲基-2-硝基苯甲酸、氯化亚砜及甲醇反应的时间为6-10h，优选8h。

44、优选地，所述dmae类吖啶酯的制备方法包括如下步骤：

45、(1)将4-羟基-3,5-二甲基-2-硝基苯甲酸、氯化亚砜(socl2)及甲醇混合，反应，纯化后得到化合物1，反应式如下：

46、

47、(2)将化合物1与吖啶-9-甲酸、4-甲苯磺酰氯(tscl)混合，反应，纯化后得到化合物2，反应式如下：

48、

49、(3)将化合物2与氯胺混合，常温反应，纯化后得到化合物3，反应式如下：

50、

51、(4)将化合物3与乙腈混合，室温反应，过滤后得到化合物4，反应式如下：

52、

53、(5)将化合物4与丁酸在无水甲苯中反应，反应后混合物过滤纯化后得到化合物5，反应式如下：

54、

55、(6)化合物5与氨基甲醇溶解在甲醇溶液中，在pd与碳的催化下反应，得化合物6，反应式如下：

56、

57、(7)将化合物6与4-二甲氨基吡啶(dmap)、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺(edc)反应，得到化合物7，即为所述dmae类吖啶酯，反应式如下：

58、

59、本发明的目的之三在于提供一种检测试剂盒，所述检测试剂盒中包含目的之一所述的dmae类吖啶酯。

60、优选地，所述检测试剂盒为化学发光免疫试剂盒。

61、本发明的目的之四在于提供一种目的之一所述的dmae类吖啶酯在制备用于血清或者血浆中疾病标志物的定量或定性的检测试剂盒。

62、相较于现有技术，本发明具有如下有益效果：

63、本发明提供的改造后的dmae类吖啶酯，可以有效地提升标记物的发光效率和稳定性，极大地提升了试剂盒的发光效率及灵敏度，使试剂检测的能力得到最大化的发挥，减少实验结果的误差。

技术特征：

1.一种dmae类吖啶酯，其特征在于，具有如下结构：

2.一种权利要求1所述的dmae类吖啶酯的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述化合物6的制备方法包括如下步骤：

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述化合物5的制备方法包括如下步骤：

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述化合物4的制备方法包括如下步骤：

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述化合物3的制备方法包括如下步骤：

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述化合物2的制备方法包括如下步骤：

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述化合物1的制备方法包括如下步骤：

9.一种检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒中包含权利要求1所述的dmae类吖啶酯；

10.一种权利要求1所述的dmae类吖啶酯在制备用于血清或者血浆中疾病标志物的定量或定性的检测试剂盒。

技术总结
本发明涉及一种DMAE类吖啶酯及其制备方法和应用，本发明提供的DMAE类吖啶酯为聚合物吖啶酯，通过将传统DMAE‑NHS吖啶酯改造得到，当受到过氧化氢离子进攻时，同时离去多个基团，发光值将会成倍增加，进而提升标记物的发光效率以及稳定性，极大地提升了试剂盒的发光效率及灵敏度，使试剂检测的能力得到最大化的发挥，减少实验结果的误差。

技术研发人员：许灿灿,张越,孙国龙,李奎,翟改萍,刘登辉,武慧锋
受保护的技术使用者：上海品峰医疗科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15