抗肿瘤活性化合物及其制法和应用

本发明涉及天然化合物，具体而言，涉及抗肿瘤活性化合物及其制法和应用。

背景技术：

1、肿瘤是一种严重影响个人身体健康的疾病。为了治疗肿瘤，已经开发了多种不同药物。

2、然而，对于某些肿瘤，目前缺乏有效的治疗药物。此外，一些抗肿瘤药物也具有明显的毒副作用。

3、因此，本领域迫切需要开发新的具有优良疗效和/或低毒副作用的抗肿瘤活性化合物。

技术实现思路

1、本发明的目的是为了提供新的具有优良疗效和/或低毒副作用的抗肿瘤活性化合物及其制法和应用。

2、在本发明的第一方面，提供了分离自算盘子属植物的活性化合物，所述活性化合物选自以下化学式所示的化合物：

3、

4、其中，

5、式(3)中，r1基团为葡萄糖-(1-3)-2-o-d-肌醇基，r2为羟基；

6、式(4)中，r1基团为葡萄糖-(1-5)-3-o-d-肌醇基，r2为羟基；

7、式(5)中，r1基团为葡萄糖-(1-3)-5-o-d-肌醇基，r2为羟基；

8、式(9)中，r基团为甲基；

9、式(10)中，r基团为醛基；

10、式(11)中，r基团为氢；

11、式(12)中，r基团为甲基。

12、在另一优选例中，所述活性化合物为式(1)、(3)、(4)或(5)所示的倍半萜类化合物。

13、在另一优选例中，所述活性化合物为式(6)、(7)、(8)、(9)、(10)、(11)或(12)所示的木脂素类化合物。

14、在另一优选例中，所述活性化合物为式(13)所示的酚酸苷类化合物。

15、在另一优选例中，所述活性化合物包括以下化学式所示的化合物：

16、

17、其中，

18、式(3)中，r1基团为葡萄糖-(1-3)-2-o-d-肌醇基，r2为羟基；

19、式(4)中，r1基团为葡萄糖-(1-5)-3-o-d-肌醇基，r2为羟基；

20、式(5)中，r1基团为葡萄糖-(1-3)-5-o-d-肌醇基，r2为羟基；

21、式(9)中，r基团为甲基；

22、式(10)中，r基团为醛基；

23、式(11)中，r基团为氢；

24、式(12)中，r基团为甲基。

25、在另一优选例中，所述活性化合物还包括以下化学式所示的化合物：

26、

27、在另一优选例中，所述化合物具有如下nmr数据：1h nmr(500mhz,cd3od)：4.00(m,h-1),1.49(m,h-2a),2.14(m,h-2b),2.84(m,h-3),1.92(m,h-4a),1.97(m,h-4b),4.27(m,h-5),2.05(m,h-6),1.94(m,h-9a),2.05(m,h-9b),3.83(m,h-10),1.79(m,h-11),3.39(dd,j＝11.4,4.8hz,h-12a),3.69(s,h-12b),3.64(d,j＝11.4hz,h-14a),3.66(d,j＝11.4hz,h-14b),0.86(d,j＝7.2hz,h-15),3.69(s,h-ome)；13c nmr(125mhz,cd3od):66.5(c-1),34.6(c-2),37.1(c-3),29.9(c-4),75.9(c-5),54.7(c-6),85.7(c-7),108.4(c-8),37.0(c-9),69.7(c-10),35.7(c-11),63.0(c-12),177.7(c-13),66.0(c-14),13.5(c-15),54.1(c-ome)。

28、在另一优选例中，所述化合物包括化学式如下的化合物：

29、

30、在本发明的第二方面，提供了一种本发明活性化合物的制备方法，包括步骤：

31、(s1)对算盘子属植物的材料进行提取，从而得到提取物；

32、(s2)对所述提取物用醚溶剂和水/醇混合溶剂进行萃取，使得活性化合物被萃取入水/醇混合溶剂相，从而得到含活性化合物的水/醇混合溶剂相；

33、(s3)对所述含活性化合物的水/醇混合溶剂相或其浓缩产物，用柱层析进行初步分离，从而得到初级分离组分；和

34、(s4)对所述初级分离组分中再次进行细分，从而得到本发明活性化合物。

35、在另一优选例中，所述的本发明活性化合物包括：如式(1)、式(3)-(13)所示的化合物、式(2)所示的化合物、或其组合。

36、在另一优选例中，所述的本发明活性化合物包括：如式(1a)、式(3)-(13)所示的化合物、式(2)所示的化合物、或其组合。

37、在另一优选例中，在步骤(s3)中，获得6个初级分离组分。

38、在另一优选例中，在步骤(s4)中，对所述6个初级分离组分中的第2个组分、第3个组分和第5个组分，分别进行进一步的分离，从而得到本发明活性化合物。

39、在另一优选例中，在步骤(s2)中，还包括：对所述的含活性化合物的水/醇混合溶剂相进行浓缩，从而获得浸膏。

40、在另一优选例中，所述算盘子属植物包括算盘子，更佳地为湖北算盘子。

41、在另一优选例中，所述算盘子属植物的材料选自下组：根、茎、叶、果或其组合。

42、在另一优选例中，所述算盘子属植物的材料为整株植物。

43、在另一优选例中，步骤(s1)中所述提取物选自下组：水提取物、c1-c3醇提取物、水/c1-c3醇混合溶剂提取物、石油醚提取物、或二氯甲烷提取物。

44、在另一优选例中，所述提取物选自下组：热水(如90至100℃)提取物、乙醇提取物、70％乙醇提取物、甲醇提取物、石油醚提取物、或二氯甲烷提取物。

45、在另一优选例中，在步骤(s2)中，包括以下子步骤：

46、(s2a)将醚类溶剂与所述提取物混合；

47、(s2b)加入醇-水混合溶剂进行萃取，并收集醇-水部的萃取物。

48、在另一优选例中，所述醇-水混合溶剂中，醇的质量百分数为10-60wt％，较佳地20-50wt％。

49、在另一优选例中，所述的醇-水混合溶剂中，醇为c1-c3醇，较佳地甲醇、乙醇、或其组合。

50、在另一优选例中，在步骤(s3)中，利用初级醚类-酯类混合溶剂，或初级烷基类-酯类混合溶剂和氯代烷类-醇类混合溶剂进行梯度洗脱。

51、在另一优选例中，所述初级醚类-酯类溶剂为石油醚和乙酸乙酯。

52、在另一优选例中，石油醚和乙酸乙酯的梯度范围为10:1-3:2；较佳地体积比为10:1、9:1和2:1；

53、在另一优选例中，初级烷基类-酯类混合溶剂为二氯甲烷-甲醇。

54、在另一优选例中，二氯甲烷-甲醇的梯度范围为10:1-3:2；较佳地体积比为9:1、8:2、7:3和6:4。

55、在另一优选例中，在步骤(s4)中包括以下子步骤：

56、(s4a)对所述第2组分进行第一次柱层析分离得到3个组分；

57、(s4b)对第一次柱层析分离得到的第2个组分进行第二次柱层析分离得到3个组分；

58、(s4c)对第二次柱层析分离得到的第3个组分进行反相高效液相分离。

59、在另一优选例中，第一次柱层析分离的步骤包括：利用第一醚类-酮类或烷基类-酯类混合溶剂进行洗脱得到3个组分。

60、在另一优选例中，第二次柱层析分离的步骤包括：利用第二醚类-酮类混合溶剂进行洗脱得到4个组分。

61、在另一优选例中，所述高效液相反相液相分离包括：利用乙腈-水混合溶剂进行梯度洗脱。

62、在另一优选例中，对步骤(s4)中所述第2组分进行进一步分离后，得到式(1)-式(4)所示的化合物。

63、在另一优选例中，对步骤(s4)中所述第2组分进行进一步分离后，得到式(1a)-式(4)所示的化合物。

64、在另一优选例中，所述第一醚类-酮类混合溶剂中的醚类溶剂为石油醚，酮类溶剂为丙酮，混合溶剂中所述石油醚和所述丙酮的体积比为100:1-1:1。

65、在另一优选例中，所述第一烷基类-酯类混合溶剂中的烷基类溶剂为己烷，酯类溶剂为乙酸乙酯，混合溶剂中所述己烷和乙酸乙酯的体积比为100:1-1:1。

66、在另一优选例中，所述第二醚类-酮类混合溶剂中的醚类溶剂为石油醚，酮类溶剂为丙酮。

67、在另一优选例中，所述石油醚和丙酮按照体积比为：80:1-1:1，而后进行梯度洗脱。

68、在另一优选例中，所述石油醚和丙酮梯度洗脱体积比例为：50:1，20:1，10:1，5:1和1:1。

69、在另一优选例中，所述洗脱步骤包括：0-10min 20％乙腈，10-25min 20～40％乙腈，25-40min 60％甲醇。

70、在另一优选例中，在步骤(s4)中，对所述的第3组分进行进一步分离，包括以下子步骤：

71、(i)对所述第3组分进行第三次柱层析分离得到2个组分；

72、(ii)对第三次柱层析分离得到的第2个组分进行液相分离；

73、其中，

74、第三次柱层析分离的步骤包括：利用第三氯代烷类-酮类混合溶剂或者第三氯代烷类-酯类混合溶剂进行洗脱得到3个组分；

75、高效液相分离的条件包括：以乙腈-水溶液为洗脱剂。

76、在另一优选例中，在步骤(s4)中，对所述的第3组分进行分离后，得到式(5)-式(11)所示的化合物。

77、在另一优选例中，所述第三氯代烷类-酮类混合溶剂中的氯代烷类溶剂为二氯甲烷，酮类溶剂为丙酮。

78、在另一优选例中，所述第三氯代烷类-酮类混合溶剂由二氯甲烷和丙酮按照体积比为10:1-1:1的比例混合形成，而后进行梯度洗脱。

79、在另一优选例中，所述第三氯代烷类-酯类混合溶剂中的氯代烷类溶剂为三氯甲烷，酯类溶剂为乙酸乙酯。

80、在另一优选例中，所述第三氯代烷类-酯类混合溶剂由三氯甲烷和乙酸乙酯按照体积比为10:1、5:1和1:1的比例混合形成，而后进行梯度洗脱。

81、在另一优选例中，所述洗脱剂洗脱过程：0-10min，10％乙腈等度洗脱；10-20min，10-40％乙腈梯度洗脱；20-50min 60％乙腈等度洗脱。

82、在另一优选例中，对步骤(s4)中，所述的第5组分进行进一步分离，包括以下子步骤：

83、(i)对所述第5组分进行第四次柱层析分离得到3个组分；

84、(ii)对第四次柱层析分离得到的第3组分进行反相液相分离；

85、其中，

86、第四次柱层析分离的步骤包括：利用第四氯代烷-醇类混合溶剂进行洗脱得到3个组分；

87、反相液相分离的步骤包括：利用乙腈-水混合溶剂进行梯度洗脱。

88、在另一优选例中，对步骤(s4)中，对所述的第5组分进行分离后，得到式(12)-式(14)所示的化合物。

89、在另一优选例中，所述第四氯代烷-醇类混合溶剂中的氯代烷类溶剂为三氯甲烷，所述醇类溶剂为甲醇。

90、在另一优选例中，所述第四氯代烷-醇类混合溶剂由三氯甲烷和甲醇按照体积比为5:1-1:1的比例混合形成，而后进行梯度洗脱。

91、在另一优选例中，所述梯度洗脱步骤包括：0-20min 10％乙腈，20-40min 20～40％乙腈。

92、在本发明的第三方面，提供了一种药物组合物，所述药物组合物含有：(a)本发明活性化合物(优选本发明第一方面所述的活性化合物)；和(b)药学上可接受的载体。

93、在另一优选例中，所述药物组合物的剂型选自下组：口服制剂、注射剂、外用制剂。

94、在另一优选例中，所述的口服制剂选自下组：片剂、胶囊剂、颗粒剂。

95、在另一优选例中，所述的本发明活性化合物包括如式(1)、式(3)-(13)所示的化合物、式(2)所示的化合物、或其组合。

96、在另一优选例中，所述的本发明活性化合物包括如式(1a)、式(3)-(13)所示的化合物、式(2)所示的化合物、或其组合。

97、在本发明的第四方面，提供了一种本发明活性化合物的用途，用于制备抗肿瘤药物。

98、在另一优选例中，所述的肿瘤包括肺癌、宫颈癌、肝癌、胃癌等。

99、在另一优选例中，所述抗肿瘤药物抑制肺癌细胞。

100、在本发明的第五方面，提供了一种体外抑制肿瘤细胞的方法，包括步骤：

101、(a)在本发明活性化合物存在下，培养肿瘤细胞，从而抑制所述肿瘤细胞。

102、在另一优选例中，所述的肿瘤细胞包括选自下组肿瘤的细胞：肺癌、宫颈癌、肝癌、胃癌等。

103、在另一优选例中，所述肿瘤细胞包括肺癌细胞，较佳地a549细胞。

104、在另一优选例中，所述方法为非诊断非治疗的方法。

105、在本发明的第六方面，提供了一种治疗肿瘤的方法，包括步骤：给需要的对象施用本发明活性化合物。

106、在另一优选例中，所述的对象包括人和非人哺乳动物。

107、在另一优选例中，所述的对象为肿瘤患者。

108、应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。