一种Ctsk基因及其表达产物在诊断卵巢功能衰退中的应用

本申请涉及生物医学领域，尤其涉及一种ctsk基因及其表达产物在诊断卵巢功能衰退中的应用。

背景技术：

1、卵巢功能衰退是最常见的女性生殖衰老性疾病，以卵巢性激素缺乏和卵巢储备减少为主要特征，由此导致不孕、更年期相关症状甚至早亡，会严重影响女性身心健康。因此，对卵巢功能衰退的预警、早期诊断和治疗在衰老领域越来越受到关注。卵巢功能衰退受到年龄、遗传、环境、医疗、免疫、生活习惯等多种复杂因素的影响，并且涉及到多种分子的调节，尤其是在转录调控水平，然而，目前对调控卵巢功能衰退的具体分子机制尚不明确，导致现阶段中缺乏卵巢功能衰退的早期预警、诊断及干预用的标志物和分子靶点。

2、目前，dna甲基化在衰老相关疾病的发生发展、治疗和预后中展现出非常重要的作用，通过检测血液或者组织中dna甲基化的变化，可为制定综合防治措施提供理论依据。近年来，血液生物标志物在疾病的早期预警、病程分析、疗效监测、预后判断及并发症风险评价上已展现出强大的应用前景。由于dna甲基化这种表观遗传变化可以优先于表型出现，并且相比基因表达改变表现出更高的稳定性，因此差异甲基化基开发疾病的预警和诊断指标提供了良好的机遇。

3、ctsk基因编码组织蛋白酶k(cathepsin k)，它是一种参与骨重塑和再吸收的溶酶体半胱氨酸蛋白酶；ctsk主要在破骨细胞、癌细胞和卵巢中表达，而ctsk抑制剂在骨质疏松治疗中显示巨大的潜力，另外有研究提示ctsk可促进乳腺癌的侵袭，高ctsk活性可作为胚胎低质量的标记物。然而，目前缺乏有关ctsk基因及其表达产物和卵巢功能之间的关联。因此如何提供一种ctsk基因在诊断卵巢功能衰退中的应用，以填补有关ctsk基因及其表达产物和卵巢功能衰退之间关联的空白，是目前亟需解决的技术问题。

技术实现思路

1、本申请提供了一种ctsk基因及其表达产物在诊断卵巢功能衰退中的应用，以填补现有技术中ctsk基因甲基化和卵巢功能衰退之间关联的空白。

2、第一方面，本申请提供了一种ctsk基因在作为诊断卵巢功能衰退的标志物的应用，所述应用包括：将低于正常甲基化水平的ctsk基因作为诊断卵巢功能衰退的标志物的应用；

3、其中，所述ctsk基因的甲基化区域为启动子区域；

4、所述ctsk基因的甲基化水平低于所述正常ctsk基因的甲基化水平的5％及以上。

5、可选的，所述ctsk基因的甲基化水平和所述卵巢功能衰退的程度呈负相关。

6、可选的，所述的卵巢功能衰退的特征包括早发性卵巢功能不全和/或卵巢储备功能下降。

7、第二方面，本申请提供了一种ctsk基因的表达产物作为诊断卵巢功能衰退的标志物的应用，所述ctsk基因的表达产物包括低于正常甲基化水平的ctsk基因所表达的ctsk蛋白；

8、其中，所述ctsk基因的甲基化区域为启动子区域；

9、所述ctsk基因的甲基化水平低于所述正常ctsk基因的甲基化水平的5％及以上。

10、可选的，所述ctsk蛋白表达水平和所述卵巢功能衰退的程度呈正相关。

11、第三方面，本申请提供了一种ctsk基因在作为诊断卵巢功能衰退的试剂盒中的应用，所述试剂盒包括检测ctsk基因甲基化水平；其中，所述ctsk基因的甲基化区域为启动子区域。

12、可选的，所述试剂盒还包括用于检测所述ctsk基因甲基化水平的扩增引物对，所述扩增引物对的上游引物序列如seq id no:1所示，所述扩增引物对的下游引物序列如seqid no:2所示。

13、可选的，所述试剂盒还包括：ctsk基因提取试剂、甲基化片段富集试剂、dna甲基化测序试剂和dna甲基化分析试剂中的至少一种。

14、第四方面，本申请提供了一种ctsk蛋白在作为诊断卵巢功能衰退的试剂盒中的应用，所述试剂盒包括检测ctsk蛋白水平的试剂，所述ctsk蛋白是低于正常甲基化水平的ctsk基因所表达的；其中，所述ctsk基因的甲基化区域为启动子区域；

15、所述ctsk基因的甲基化水平低于所述正常ctsk基因的甲基化水平的5％及以上。

16、可选的，所述试剂盒还包括ctsk蛋白特异性抗体和/或ctsk蛋白免疫印记实验试剂。

17、本申请实施例提供的上述技术方案与现有技术相比具有如下优点：

18、本申请实施例提供的一种ctsk基因在作为诊断卵巢功能衰退的标志物的应用，通过大量的人群实验发现，正常女性和卵巢功能衰退的病人在ctsk基因的启动子区域的甲基化水平上具有明显的差异，而该差异可以作为诊断卵巢功能衰退的重要依据，因此通过对ctsk基因的启动子区域的甲基化水平的测定，就能明确卵巢功能衰退的程度，使得甲基化的ctsk基因可以作为诊断卵巢功能衰退的标志物，从而填补了有关ctsk基因甲基化和卵巢功能衰退之间关联的空白。

技术特征：

1.一种ctsk基因在作为诊断卵巢功能衰退的标志物的应用，其特征在于，所述应用包括：将低于正常甲基化水平的ctsk基因作为诊断卵巢功能衰退的标志物的应用；

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述ctsk基因的甲基化水平和所述卵巢功能衰退的程度呈负相关。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的卵巢功能衰退的特征包括早发性卵巢功能不全和/或卵巢储备功能下降。

4.一种ctsk基因的表达产物作为诊断卵巢功能衰退的标志物的应用，其特征在于，所述ctsk基因的表达产物包括低于正常甲基化水平的ctsk基因所表达的ctsk蛋白；

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述ctsk蛋白表达水平和所述卵巢功能衰退的程度呈正相关。

6.一种ctsk基因在作为诊断卵巢功能衰退的试剂盒中的应用，其特征在于，所述试剂盒包括检测ctsk基因甲基化水平；其中，所述ctsk基因的甲基化区域为启动子区域。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述试剂盒还包括用于检测所述ctsk基因甲基化水平的扩增引物对，所述扩增引物对的上游引物序列如seq id no：1所示，所述扩增引物对的下游引物序列如seq id no：2所示。

8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述试剂盒还包括：ctsk基因提取试剂、甲基化片段富集试剂、dna甲基化测序试剂和dna甲基化分析试剂中的至少一种。

9.一种ctsk蛋白在作为诊断卵巢功能衰退的试剂盒中的应用，其特征在于，所述试剂盒包括检测ctsk蛋白水平的试剂，所述ctsk蛋白是低于正常甲基化水平的ctsk基因所表达的；其中，所述ctsk基因的甲基化区域为启动子区域；

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述试剂盒还包括ctsk蛋白特异性抗体和/或ctsk蛋白免疫印记实验试剂。

技术总结
本申请涉及生物医学领域，尤其涉及一种Ctsk基因及其表达产物在诊断卵巢功能衰退中的应用；所述应用包括：将低于正常甲基化水平的Ctsk基因作为诊断的标志物的应用；其中，Ctsk基因的甲基化区域为启动子区域；Ctsk基因的甲基化水平低于正常Ctsk基因的甲基化水平的5％及以上；Ctsk基因的表达产物包括低于正常甲基化水平的Ctsk基因所表达的CTSK蛋白；其中，Ctsk基因的甲基化区域为启动子区域；卵巢功能衰退的女性和正常女性在Ctsk基因启动子区域的甲基化水平上具有明显的差异，而该差异可以作为诊断卵巢功能衰退的重要依据，这使得Ctsk基因可以作为诊断卵巢功能衰退的标志物，从而填补了有关Ctsk基因甲基化和卵巢功能衰退之间关联的空白。

技术研发人员：王世宣,李咪璐,张金金
受保护的技术使用者：华中科技大学同济医学院附属同济医院
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15