CADPS2作为标记物在制备多发性骨髓瘤患者预后风险评估的产品中的应用

本发明属于医学检测，具体涉及cadps2作为标记物在制备多发性骨髓瘤患者预后风险评估的产品中的应用。

背景技术：

1、多发性骨髓瘤(multiple myeloma，mm)是一种克隆性浆细胞异常增殖的恶性疾病，其多发于老年，在许多国家是血液系统第2位常见的恶性肿瘤，约占血液系统恶性肿瘤的10％。mm常见症状包括骨髓瘤相关器官功能损害的表现，即“crab”症状(血钙增高，肾功能损害，贫血，骨病)，以及淀粉样变性等靶器官损害相关表现。在过去的二十年间，蛋白酶体抑制剂、免疫调节剂、抗cd38单克隆抗体及靶向b细胞成熟抗原(b cell maturationantigen，bcma)治疗等药物的应用，mm患者的治疗模式发生了极大的变化，患者的生存时间得到了明显的延长；且随着这些药物三药或四药的联合应用，患者的疗效反应显著加深，较多患者能达到完全缓解(complete remission，cr)，初治患者的cr率从以往的10％(沙利度胺和地塞米松治疗)到如今报道的高达95％(达雷妥尤单抗、卡非佐米、来那度胺和地塞米松)，复发/难治mm患者中也有同样的趋势。然而，即使达到完全缓解，多数患者仍会复发，提示患者仍残存肿瘤细胞，而既往评估体系已经不适应目前新的治疗模式，在预后分层和疗效评判方面，往往依靠细胞遗传学指标和生化指标，缺乏特异性的分子生物学标记物。

2、cadps2(calcium dependent secretion activator 2)基因编码的是钙依赖性分泌激活蛋白家族中的一个成员，作为钙结合蛋白具有调节神经元和神经内分泌细胞中突触和致密核心囊泡的胞外分泌的作用。研究发现，某些孤独症患者的cadps2 mrna存在异常的选择性剪切，导致了外显子3的丢失，从而导致cadps2蛋白功能异常，引起神经营养因子释放紊乱，可能是孤独症易感性增加的一个诱因。

技术实现思路

1、本发明的一个目的是提供cadps2作为标记物的新用途。

2、本发明提供了cadps2作为标记物在如下(a1)-(a12)中任一种中的应用：

3、(a1)制备用于诊断或辅助诊断多发性骨髓瘤的产品；

4、(a2)制备用于筛查或辅助筛查多发性骨髓瘤患者的产品；

5、(a3)制备用于评估或辅助评估多发性骨髓瘤患者预后的产品；

6、(a4)制备用于评估或辅助评估多发性骨髓瘤患者无进展生存率的产品；

7、(a5)制备用于评估或辅助评估多发性骨髓瘤患者无进展生存时间的产品；

8、(a6)制备用于评估或辅助评估多发性骨髓瘤患者病程进展(复发风险)的产品；

9、(a7)诊断或辅助诊断多发性骨髓瘤；

10、(a8)筛查或辅助筛查多发性骨髓瘤患者；

11、(a9)评估或辅助评估多发性骨髓瘤患者预后；

12、(a10)评估或辅助评估多发性骨髓瘤患者无进展生存率；

13、(a11)评估或辅助评估多发性骨髓瘤患者无进展生存时间；

14、(a12)评估或辅助评估多发性骨髓瘤患者病程进展(复发风险)。

15、本发明的另一个目的是提供检测cadps2表达量的物质的新用途。

16、本发明提供了检测cadps2表达量的物质在如下(a1)-(a12)中任一种中的应用：

17、(a1)制备用于诊断或辅助诊断多发性骨髓瘤的产品；

18、(a2)制备用于筛查或辅助筛查多发性骨髓瘤患者的产品；

19、(a3)制备用于评估或辅助评估多发性骨髓瘤患者预后的产品；

20、(a4)制备用于评估或辅助评估多发性骨髓瘤患者无进展生存率的产品；

21、(a5)制备用于评估或辅助评估多发性骨髓瘤患者无进展生存时间的产品；

22、(a6)制备用于评估或辅助评估多发性骨髓瘤患者病程进展(复发风险)的产品；

23、(a7)诊断或辅助诊断多发性骨髓瘤；

24、(a8)筛查或辅助筛查多发性骨髓瘤患者；

25、(a9)评估或辅助评估多发性骨髓瘤患者预后；

26、(a10)评估或辅助评估多发性骨髓瘤患者无进展生存率；

27、(a11)评估或辅助评估多发性骨髓瘤患者无进展生存时间；

28、(a12)评估或辅助评估多发性骨髓瘤患者病程进展(复发风险)。

29、本发明还有一个目的是提供一种试剂盒，所述试剂盒的功能为如下(c1)-(c6)中任一种：

30、(c1)诊断或辅助诊断多发性骨髓瘤；

31、(c2)筛查或辅助筛查多发性骨髓瘤患者；

32、(c3)评估或辅助评估多发性骨髓瘤患者预后风险；

33、(c4)评估或辅助评估多发性骨髓瘤患者无进展生存率；

34、(c5)评估或辅助评估多发性骨髓瘤患者无进展生存时间；

35、(c6)评估或辅助评估多发性骨髓瘤患者病程进展(复发风险)。

36、本发明提供的试剂盒包括检测cadps2表达量的物质。

37、上述任一所述应用或试剂盒中，所述检测cadps2表达量的物质可为检测cadps2基因表达量的物质或检测cadps2基因编码的mrna表达量的物质或检测cadps2基因编码的蛋白含量的物质。

38、进一步的，所述检测cadps2基因表达量的物质可为利用现有技术中的方法检测所述cadps2基因表达量所需的试剂和/或仪器，如利用高通量测序检测所述基因表达量所需的试剂和/或仪器，或利用定量pcr检测所述基因表达量所需的试剂和/或仪器，或利用northern杂交技术检测所述基因表达量所需的试剂和/或仪器。

39、所述检测cadps2基因编码的蛋白含量的物质可为利用现有技术中的方法检测所述蛋白含量所需的试剂和/或仪器，如利用质谱或其相关技术检测所述蛋白含量所需的试剂和/或仪器，或利用免疫杂交技术检测所述蛋白含量所需的试剂和/或仪器，或利用elisa技术检测所述蛋白含量所需的试剂和/或仪器，或利用蛋白芯片或试纸检测所述蛋白含量所需的试剂和/或仪器。

40、所述检测cadps2基因编码的mrna表达量的物质可包括用于检测cadps2基因mrna的特异性扩增引物和/或探针。在本发明的一个具体实施例中，用于检测cadps2基因mrna的特异性扩增引物由序列1所示的单链dna分子和序列2所示的单链dna分子组成。用于检测cadps2基因mrna的探针为序列3所示的单链dna分子，所述探针的5’端可标记有荧光报告基团(如fam)，所述单链探针的3’端可标记有荧光猝灭基团(如bhq)。

41、再进一步的，所述表达量为cadps2基因参比内参基因的相对表达量，具体可为cadps2基因的表达量与内参基因的表达量之比。所述cadps2基因的表达量和所述内参基因的表达量均可为根据标准曲线和ct值得到的拷贝数。

42、更进一步的，所述检测cadps2基因编码的mrna表达量的物质还可包括用于检测内参基因mrna的特异性扩增引物和/或探针。所述内参基因具体可为abl1基因。在本发明的一个具体实施例中，用于检测abl1基因mrna的特异性扩增引物由序列4所示的单链dna分子和序列5所示的单链dna分子组成；用于检测abl1基因mrna的探针为序列6所示的单链dna分子，所述探针的5’端可标记有荧光报告基团(如fam)，所述单链探针的3’端可标记有荧光猝灭基团(如bhq)。

43、上述试剂盒还可包含数据处理装置a；所述数据处理装置a内设模块；所述模块具有如下功能：根据待测者骨髓单个核细胞中cadps2的相对表达量诊断待测者是否为多发性骨髓瘤患者：如果待测者骨髓单个核细胞中cadps2的相对表达量大于健康对照者，则该待测者为或疑似为多发性骨髓瘤患者；否则该待测者不为或疑似不为多发性骨髓瘤患者。

44、上述试剂盒还可包含数据处理装置b；所述数据处理装置b内设模块；所述模块具有如下功能：根据多发性骨髓瘤患者骨髓单个核细胞中cadps2的相对表达量评估多发性骨髓瘤患者的预后风险：cadps2低表达组的多发性骨髓瘤患者的预后风险低于或候选低于cadps2高表达组的多发性骨髓瘤患者。

45、上述试剂盒还可包含数据处理装置c；所述数据处理装置c内设模块；所述模块具有如下功能：根据多发性骨髓瘤患者骨髓单个核细胞中cadps2的相对表达量评估多发性骨髓瘤患者的无进展生存率：cadps2低表达组的多发性骨髓瘤患者的无进展生存率高于或候选高于cadps2高表达组的多发性骨髓瘤患者。

46、上述试剂盒还可包含数据处理装置d；所述数据处理装置d内设模块；所述模块具有如下功能：根据多发性骨髓瘤患者骨髓单个核细胞中cadps2的相对表达量评估多发性骨髓瘤患者的无进展生存时间：cadps2低表达组的多发性骨髓瘤患者的无进展生存时间长于或候选长于cadps2高表达组的多发性骨髓瘤患者。

47、上述试剂盒还可包含数据处理装置d；所述数据处理装置d内设模块；所述模块具有如下功能：根据多发性骨髓瘤患者骨髓单个核细胞中cadps2的相对表达量评估多发性骨髓瘤患者的病程进展：cadps2低表达组的多发性骨髓瘤患者的复发风险低于或候选低于cadps2高表达组的多发性骨髓瘤患者。

48、上述cadps2高表达组和cadps2低表达组可按照如下方法判定：以由若干名未采取任何治疗措施的多发性骨髓瘤患者组成的待测群体的离体骨髓为标本，测定每份标本中cadps2基因编码的mrna的相对表达量，然后按照所述mrna的相对表达量由低到高的顺序将所述待测群体进行排列并进行四等分，将表达量低的3/4所述待测群体作为cadps2低表达组，将其余1/4所述待测群体作为cadps2高表达组。

49、上述任一所述应用或试剂盒中，所述cadps2的核苷酸序列如序列表中序列9所示(ncbi reference sequence：nm_017954.11)。

50、在本发明中，所述预后风险为初诊为多发性骨髓瘤患者预后风险。所述预后风险的高低具体可体现为如下指标中的全部或部分：无进展生存时间、无进展生存率。无进展生存时间越长，则预后风险越低；无进展生存率越高，则预后风险越低。

51、所述病程进展是指多发性骨髓瘤患者缓解后的复发风险。

52、上述任一所述应用或试剂盒中，所述筛查或辅助筛查多发性骨髓瘤患者包括筛查或辅助筛查初诊多发性骨髓瘤患者和筛查或辅助筛查复发多发性骨髓瘤患者。

53、上述任一所述应用或试剂盒中，所述多发性骨髓瘤为成人多发性骨髓瘤。

54、本发明通过rt-qpcr方法对初诊和缓解mm患者骨髓单个核细胞中的cadps2表达水平进行了分析，结合临床病程及生存资料，首次发现cadps2高表达是mm患者低无进展生存(pfs)的危险因素。cadps2在多发性骨髓瘤的诊断与预后中具有重要价值。