一种抗DLL3嵌合抗原受体及其用途的制作方法

本发明涉及靶向dll3的嵌合抗原受体(car)及对dll3具有特异性的结合蛋白。本发明还涉及编码这些car或这些结合蛋白的核酸序列、表达这些car的经修饰的免疫细胞以及其用于治疗dll3相关病症的用途。

背景技术：

1、细胞免疫疗法的发展已提供一种有前景的治疗多种肿瘤的方法。一种这样的治疗涉及免疫细胞、特别是t细胞的基因工程化，以在细胞表面上表达嵌合抗原受体(car)。嵌合抗原受体是在通常型式下将单克隆抗体(mab)的特异性与t细胞的效应功能相结合的蛋白质。一旦car在t细胞中表达，经car修饰的t细胞(car-t或car-t细胞)即可获得一些特性，诸如抗原特异性识别、抗肿瘤反应性及增殖，因此可充当“活药物”来根除所靶向的肿瘤细胞。原则上，这些car-t细胞可靶向任何抗原(例如细胞表面分子)。car-t细胞疗法可克服对自体抗原的耐受性，且提供一种不依赖于患者mhc状态的治疗。近来的试验使用经工程改造以表达靶向cd19的嵌合抗原受体的t细胞，已证明在白血病及淋巴瘤患者中具有显著临床反应。

2、car表达为跨膜蛋白，包括抗原特异性结合位点、跨膜区及信号传导胞内结构域(例如cd3ζ链)。抗原特异性结合位点通常为源自单克隆抗体的单链可变片段(scfv)，由经柔性接头接合的重链及轻链组成。近来car构建体已合并来自cd28或4-1bb等共刺激分子的另外的胞内结构域以增强活体内t细胞存活率。还对car进行其他遗传修饰，例如添加细胞因子基因或避免肿瘤部位处免疫抑制机制的基因。

3、已发现dll3(δ样配体3)蛋白在临床上与多种增生性病症相关，这些增生性病症包括展现神经内分泌特征的肿瘤，诸如小细胞肺癌(sclc)。起源于神经内分泌祖细胞的sclc大约占所有肺癌的15％，且具有最低的5年存活率之一(存活率为6％)(alvarado-luna等人,2016,transl lung cancer res 5:26-38；siegel等人,2017,ca cancer j clin 67:7-30)。这是因为其具有高度侵袭性，约三分之二的患者在诊断时患有转移性疾病，且为常规治疗(例如基于铂的化学疗法)极难医治的。

4、需要改良的治疗sclc及其他表达dll3的癌症的治疗方法。

技术实现思路

1、在一方面，本披露提供一种嵌合抗原受体(car)，该嵌合抗原受体靶向dll3(抗dll3 car)。抗dll3 car包含dll3结合域，其中该dll3结合域包含或源自单域抗体(sdab)或单链可变片段(scfv)。

2、在一些实施例中，sdab包含多肽，该多肽包含：包含seq id no:1-81中的任一者的氨基酸序列的cdr1或其在该cdr1中包含至多约3个氨基酸取代的变体；包含seq id no:82-162中的任一者的氨基酸序列的cdr2或其在该cdr2中包含至多约3个氨基酸取代的变体；以及包含seq id no:163-243中的任一者的氨基酸序列的cdr3或其在该cdr3中包含至多约3个氨基酸取代的变体。

3、在一些实施例中，sdab包含多肽，该多肽包含：包含seq id no:1-81中的任一者的氨基酸序列的cdr1；包含seq id no:82-162中的任一者的氨基酸序列的cdr2；以及包含seqid no:163-243中的任一者的氨基酸序列的cdr3，或在cdr1、cdr2及cdr3中包含至多约3个氨基酸取代的多肽变体。

4、在一些实施例中，sdab包含多肽，该多肽包含以下中的任一种：

5、(1)包含seq id no:6的氨基酸序列的cdr1，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；包含seq id no:87的氨基酸序列的cdr2，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；以及包含seq id no:168的氨基酸序列的cdr3，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；

6、(2)包含seq id no:21的氨基酸序列的cdr1，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；包含seq id no:102的氨基酸序列的cdr2，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；以及包含seq id no:183的氨基酸序列的cdr3，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；

7、(3)包含seq id no:24的氨基酸序列的cdr1，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；包含seq id no:105的氨基酸序列的cdr2，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；以及包含seq id no:186的氨基酸序列的cdr3，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；

8、(4)包含seq id no:27的氨基酸序列的cdr1，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；包含seq id no:108的氨基酸序列的cdr2，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；以及包含seq id no:189的氨基酸序列的cdr3，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；

9、(5)包含seq id no:34的氨基酸序列的cdr1，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；包含seq id no:115的氨基酸序列的cdr2，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；以及包含seq id no:196的氨基酸序列的cdr3，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；

10、(6)包含seq id no:39的氨基酸序列的cdr1，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；包含seq id no:120的氨基酸序列的cdr2，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；以及包含seq id no:201的氨基酸序列的cdr3，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；

11、(7)包含seq id no:7的氨基酸序列的cdr1，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；包含seq id no:88的氨基酸序列的cdr2，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；以及包含seq id no:169的氨基酸序列的cdr3，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；

12、(8)包含seq id no:8的氨基酸序列的cdr1，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；包含seq id no:89的氨基酸序列的cdr2，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；以及包含seq id no:170的氨基酸序列的cdr3，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；或

13、(9)包含seq id no:9的氨基酸序列的cdr1，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；包含seq id no:90的氨基酸序列的cdr2，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；以及包含seq id no:171的氨基酸序列的cdr3，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体。

14、在一些实施例中，sdab包含多肽，该多肽包含以下中的任一种：

15、(1)包含seq id no:6的氨基酸序列的cdr1；包含seq id no:87的氨基酸序列的cdr2；以及包含seq id no:168的氨基酸序列的cdr3；

16、(2)包含seq id no:21的氨基酸序列的cdr1；包含seq id no:102的氨基酸序列的cdr2；以及包含seq id no:183的氨基酸序列的cdr3；

17、(3)包含seq id no:24的氨基酸序列的cdr1；包含seq id no:105的氨基酸序列的cdr2；以及包含seq id no:186的氨基酸序列的cdr3；

18、(4)包含seq id no:27的氨基酸序列的cdr1；包含seq id no:108的氨基酸序列的cdr2；以及包含seq id no:189的氨基酸序列的cdr3；

19、(5)包含seq id no:34的氨基酸序列的cdr1；包含seq id no:115的氨基酸序列的cdr 2；以及包含seq id no:196的氨基酸序列的cdr 3；

20、(6)包含seq id no:39的氨基酸序列的cdr1；包含seq id no:120的氨基酸序列的cdr2；以及包含seq id no:201的氨基酸序列的cdr 3；

21、(7)包含seq id no:7的氨基酸序列的cdr1；包含seq id no:88的氨基酸序列的cdr2；以及包含seq id no:169的氨基酸序列的cdr 3；

22、(8)包含seq id no:8的氨基酸序列的cdr1；包含seq id no:89的氨基酸序列的cdr2；以及包含seq id no:170的氨基酸序列的cdr 3；或

23、(9)包含seq id no:9的氨基酸序列的cdr1；包含seq id no:90的氨基酸序列的cdr 2；以及包含seq id no:171的氨基酸序列的cdr 3。

24、在一些实施例中，sdab为针对人类或恒河猴dll3产生的骆驼sdab。

25、在一些实施例中，sdab包含与seq id no:274-354中的任一者的氨基酸序列具有至少约95％序列同一性的氨基酸序列。

26、在一些实施例中，sdab通过cdr移植进行人源化。

27、在一些实施例中，人源化sdab包含与seq id no:355-367中的任一者的氨基酸序列具有至少约95％序列同一性的氨基酸序列。

28、在一些实施例中，scfv包含重链可变区(vh)及轻链可变区(vl)，其中该scfv的vh结构域包含seq id no:498或504中所示的cdr1或其在该cdr1中包含至多约3个氨基酸取代的变体、seq id no:499或505中所示的cdr2或其在该cdr2中包含至多约3个氨基酸取代的变体以及seq id no:500或506中所示的cdr3或其在该cdr3中包含至多约3个氨基酸取代的变体，且该scfv的vl结构域包含seq id no:495或501中所示的cdr1或其在该cdr1中包含至多约3个氨基酸取代的变体、seq id no:496或502中所示的cdr2或其在该cdr2中包含至多约3个氨基酸取代的变体以及seq id no:497或503中所示的cdr3或其在该cdr3中包含至多约3个氨基酸取代的变体。

29、在一些实施例中，该scfv的vh结构域包含seq id no:498中所示的cdr1、seq idno:499中所示的cdr2及seq id no:500中所示的cdr3，且该scfv的vl结构域包含seq idno:495中所示的cdr1、seq id no:496中所示的cdr2及seq id no:497中所示的cdr3；或该scfv的vh结构域包含seq id no:504中所示的cdr1、seq id no:505中所示的cdr2及seq idno:506中所示的cdr3，且该scfv的vl结构域包含seq id no:501中所示的cdr1、seq id no:502中所示的cdr2及seq id no:503中所示的cdr3。

30、在一些实施例中，该scfv的vh结构域包含与seq id no:508中所示的氨基酸序列具有至少约95％序列同一性的氨基酸序列，且该scfv的vl结构域包含与seq id no:507中所示的氨基酸序列具有至少约95％序列同一性的氨基酸序列；或该scfv的vh结构域包含与seq id no:510中所示的氨基酸序列具有至少约95％序列同一性的氨基酸序列，且该scfv的vl结构域包含与seq id no:509中所示的氨基酸序列具有至少约95％序列同一性的氨基酸序列。

31、在一些实施例中，scfv自合成人类fab噬菌体文库获得。

32、在一些实施例中，dll3为人类或恒河猴dll3。

33、在一些实施例中，抗dll3 car自n末端至c末端包含信号肽、dll3结合域、铰链域、跨膜域及细胞内信号传导域。

34、在一些实施例中，细胞内信号传导域源自cd3ζ、fcrγ、fcrβ、cd3γ、cd3δ、cd3ε、cd5、cd22、cd79a、cd79b或cd66d。

35、在一些实施例中，细胞内信号传导域进一步包含细胞内共刺激序列。

36、在一些实施例中，细胞内共刺激序列源自选自由以下组成的组的共刺激分子：cd27、cd28、4-1bb、ox40、cd40、pd-1、lfa-1、icos、cd2、cd7、light、nkg2c、b7-h3、tnfrsf9、tnfrsf4、tnfrsf8、cd40lg、itgb2、klrc2、tnfrsf18、tnfrsf14、havcr1、lgals9、dap10、dap12、cd83、cd83配体及其组合。

37、在一些实施例中，car包含与选自由seq id no:476-484、seq id no:485-494或seq id no:515-516组成的组的氨基酸序列具有至少约95％序列同一性的氨基酸序列。

38、在一些实施例中，dll3结合域包含彼此连接的两个sdab。

39、在一些实施例中，sdab中的每一者独立地包含与seq id no:356或seq id no:366具有至少约95％序列同一性的氨基酸序列。

40、在一些实施例中，car包含与选自由seq id no:518-520组成的组的氨基酸序列具有至少约95％序列同一性的氨基酸序列。

41、在一些实施例中，car包含seq id no:520的氨基酸序列。

42、在另一方面，本披露提供dll3结合蛋白，该dll3结合蛋白包含特异性地结合于dll3的单域抗体(sdab)部分，其中该sdab部分包含多肽，该多肽包含：包含seq id no:1-81中的任一者的氨基酸序列的cdr1或其在该cdr1中包含至多约3个氨基酸取代的变体；包含seq id no:82-162中的任一者的氨基酸序列的cdr2或其在该cdr2中包含至多约3个氨基酸取代的变体；以及包含seq id no:163-243中的任一者的氨基酸序列的cdr3或其在该cdr3中包含至多约3个氨基酸取代的变体。

43、在一些实施例中，sdab部分包含多肽，该多肽包含：包含seq id no:1-81中的任一者的氨基酸序列的cdr1；包含seq id no:82-162中的任一者的氨基酸序列的cdr2；以及包含seq id no:163-243中的任一者的氨基酸序列的cdr3，或在cdr1、cdr2及cdr3中包含至多约3个氨基酸取代的多肽变体。

44、在一些实施例中，sdab部分包含多肽，该多肽包含以下中的任一种：

45、(1)包含seq id no:6的氨基酸序列的cdr1，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；包含seq id no:87的氨基酸序列的cdr 2，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；以及包含seq id no:168的氨基酸序列的cdr 3，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；

46、(2)包含seq id no:21的氨基酸序列的cdr1，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；包含seq id no:102的氨基酸序列的cdr2，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；以及包含seq id no:183的氨基酸序列的cdr3，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；

47、(3)包含seq id no:24的氨基酸序列的cdr1，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；包含seq id no:105的氨基酸序列的cdr2，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；以及包含seq id no:186的氨基酸序列的cdr3，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；

48、(4)包含seq id no:27的氨基酸序列的cdr1，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；包含seq id no:108的氨基酸序列的cdr2，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；以及包含seq id no:189的氨基酸序列的cdr3，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；

49、(5)包含seq id no:34的氨基酸序列的cdr1，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；包含seq id no:115的氨基酸序列的cdr2，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；以及包含seq id no:196的氨基酸序列的cdr3，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；

50、(6)包含seq id no:39的氨基酸序列的cdr1，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；包含seq id no:120的氨基酸序列的cdr2，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；以及包含seq id no:201的氨基酸序列的cdr 3，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；

51、(7)包含seq id no:7的氨基酸序列的cdr1，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；包含seq id no:88的氨基酸序列的cdr2，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；以及包含seq id no:169的氨基酸序列的cdr 3，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；

52、(8)包含seq id no:8的氨基酸序列的cdr1，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；包含seq id no:89的氨基酸序列的cdr 2，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；以及包含seq id no:170的氨基酸序列的cdr3，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；或

53、(9)包含seq id no:9的氨基酸序列的cdr1，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；包含seq id no:90的氨基酸序列的cdr2，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体；以及包含seq id no:171的氨基酸序列的cdr 3，或其包含至多约3个氨基酸取代的变体。

54、在一些实施例中，sdab部分包含多肽，该多肽包含以下中的任一种：

55、(1)包含seq id no:6的氨基酸序列的cdr1；包含seq id no:87的氨基酸序列的cdr2；以及包含seq id no:168的氨基酸序列的cdr 3；

56、(2)包含seq id no:21的氨基酸序列的cdr1；包含seq id no:102的氨基酸序列的cdr 2；以及包含seq id no:183的氨基酸序列的cdr 3；

57、(3)包含seq id no:24的氨基酸序列的cdr1；包含seq id no:105的氨基酸序列的cdr2；以及包含seq id no:186的氨基酸序列的cdr 3；

58、(4)包含seq id no:27的氨基酸序列的cdr1；包含seq id no:108的氨基酸序列的cdr 2；以及包含seq id no:189的氨基酸序列的cdr3；

59、(5)包含seq id no:34的氨基酸序列的cdr1；包含seq id no:115的氨基酸序列的cdr2；以及包含seq id no:196的氨基酸序列的cdr3；

60、(6)包含seq id no:39的氨基酸序列的cdr1；包含seq id no:120的氨基酸序列的cdr2；以及包含seq id no:201的氨基酸序列的cdr3；

61、(7)包含seq id no:7的氨基酸序列的cdr1；包含seq id no:88的氨基酸序列的cdr2；以及包含seq id no:169的氨基酸序列的cdr3；

62、(8)包含seq id no:8的氨基酸序列的cdr1；包含seq id no:89的氨基酸序列的cdr2；以及包含seq id no:170的氨基酸序列的cdr3；或

63、(9)包含seq id no:9的氨基酸序列的cdr1；包含seq id no:90的氨基酸序列的cdr2；以及包含seq id no:171的氨基酸序列的cdr3。

64、在一些实施例中，sdab部分为针对人类或恒河猴dll3产生的骆驼sdab。

65、在一些实施例中，sdab部分包含与seq id no:274-354中的任一者的氨基酸序列具有至少约95％序列同一性的氨基酸序列。

66、在一些实施例中，sdab部分通过cdr移植进行人源化。

67、在一些实施例中，人源化sdab包含与seq id no:355-367中的任一者的氨基酸序列具有至少约95％序列同一性的氨基酸序列。

68、在一些实施例中，dll3为人类或恒河猴dll3。

69、在另一方面，本披露提供一种dll3结合蛋白，该dll3结合蛋白包含特异性地结合于dll3的单链可变片段(scfv)部分，其中该scfv部分包含重链可变区(vh)及轻链可变区(vl)，其中该scfv部分的vh结构域包含seq id no:498或504中所示的cdr1或其在该cdr1中包含至多约3个氨基酸取代的变体、seq id no:499或505中所示的cdr2或其在该cdr2中包含至多约3个氨基酸取代的变体以及seq id no:500或506中所示的cdr3或其在该cdr3中包含至多约3个氨基酸取代的变体，且该scfv部分的vl结构域包含seq id no:495或501中所示的cdr1或其在该cdr1中包含至多约3个氨基酸取代的变体、seq id no:496或502中所示的cdr2或其在该cdr2中包含至多约3个氨基酸取代的变体以及seq id no:497或503中所示的cdr3或其在该cdr3中包含至多约3个氨基酸取代的变体。

70、在一些实施例中，scfv部分包含重链可变区(vh)及轻链可变区(vl)，其中该scfv部分的vh结构域包含seq id no:498中所示的cdr1、seq id no:499中所示的cdr2及seq idno:500中所示的cdr3，且该scfv部分的vl结构域包含seq id no:495中所示的cdr1、seq idno:496中所示的cdr2及seq id no:497中所示的cdr3；或该scfv部分的vh结构域包含seqid no:504中所示的cdr1、seq id no:505中所示的cdr2及seq id no:506中所示的cdr3，且该scfv部分的vl结构域包含seq id no:501中所示的cdr1、seq id no:502中所示的cdr2及seq id no:503中所示的cdr3。

71、在一些实施例中，该scfv部分的vh结构域包含与seq id no:508中所示的氨基酸序列具有至少约95％序列同一性的氨基酸序列，且该scfv部分的vl结构域包含与seq idno:507中所示的氨基酸序列具有至少约95％序列同一性的氨基酸序列；或该scfv部分的vh结构域包含与seq id no:510中所示的氨基酸序列具有至少约95％序列同一性的氨基酸序列，且该scfv部分的vl结构域包含与seq id no:509中所示的氨基酸序列具有至少约95％序列同一性的氨基酸序列。

72、在一些实施例中，scfv部分自合成人类fab噬菌体文库获得。

73、在一些实施例中，dll3为人类或恒河猴dll3。

74、在另一方面，本披露提供一种经分离的核酸分子，该经分离的核酸分子编码如上所述的抗dll3 car或dll3结合蛋白。

75、在一些实施例中，该经分离的核酸分子包含选自由seq id no:368-448组成的组的多核苷酸序列，该多核苷酸序列编码骆驼单域抗体(sdab)。

76、在一些实施例中，该经分离的核酸分子包含选自由seq id no:449-461组成的组的多核苷酸序列，该多核苷酸序列编码人源化骆驼sdab。

77、在一些实施例中，该核酸分子包含选自由seq id no:511-514组成的组的多核苷酸序列，该多核苷酸序列编码人类scfv的vl或vh结构域。

78、在一些实施例中，该核酸分子进一步包含编码嵌合转换受体(csr)或显性负性受体(dnr)的多核苷酸序列。

79、在一些实施例中，该核酸分子进一步包含编码pd-1显性负性受体(pd-1dnr)、pd-1嵌合转换受体(pd-1csr)或tgf-β显性负性受体(tgf-βdnr)的多核苷酸序列。

80、在一些实施例中，pd-1dnr包含与seq id no:523具有至少约95％序列同一性的氨基酸序列。

81、在一些实施例中，pd-1csr包含与seq id no:524具有至少约95％序列同一性的氨基酸序列。

82、在一些实施例中，tgf-βdnr包含与seq id no:529具有至少约95％序列同一性的氨基酸序列。

83、在一些实施例中，编码pd-1dnr、pd-1csr或tgf-βdnr的多核苷酸序列通过编码2a自裂解肽的多核苷酸序列连接至编码car的多核苷酸序列。

84、在一些实施例中，2a自裂解肽为t2a或p2a肽。

85、在一些实施例中，核酸分子在5'至3'方向上包含编码car的多核苷酸序列、编码2a自裂解肽的多核苷酸序列以及编码pd-1dnr、pd-1csr或tgf-βdnr的多核苷酸序列。

86、在一些实施例中，该核酸分子编码与seq id no:521或522具有至少约95％序列同一性的肽，或该核酸分子编码与选自由seq id no:525-528组成的组的氨基酸序列具有至少约95％序列同一性的肽。

87、在另一方面，本披露提供一种表达载体，该表达载体包含如上所述的经分离的核酸分子。

88、在另一方面，本披露提供一种经工程改造的免疫细胞，该经工程改造的免疫细胞包含如上所述的经分离的核酸分子。

89、在一些实施例中，该经工程改造的免疫细胞选自由以下组成的组：细胞毒性t细胞、辅助t细胞、自然杀伤t细胞、γδt细胞、nkt细胞及自然杀伤细胞。

90、在另一方面，本披露提供一种经工程改造的免疫细胞，该经工程改造的免疫细胞表达如上所述的抗dll3 car。

91、在一些实施例中，该经工程改造的免疫细胞还表达csr或dnr。

92、在一些实施例中，该csr为pd-1csr，该dnr为pd-1dnr或tgf-βdnr。

93、在一些实施例中，pd-1dnr包含与seq id no:523具有至少约95％序列同一性的氨基酸序列。

94、在一些实施例中，pd-1csr包含与seq id no:524具有至少约95％序列同一性的氨基酸序列。

95、在一些实施例中，tgf-βdnr包含与seq id no:529具有至少约95％序列同一性的氨基酸序列。

96、在一些实施例中，该car及该csr、或该car及该dnr通过2a自裂解肽共表达。

97、在一些实施例中，2a自裂解肽为t2a或p2a肽。

98、在一些实施例中，该经工程改造的免疫细胞表达car及pd-1dnr，且经表达dll3及pd-l1的细胞刺激。

99、在一些实施例中，该经工程改造的免疫细胞表达car及pd-1csr，且经表达dll3及pd-l1的细胞刺激。

100、在一些实施例中，该经工程改造的免疫细胞表达car及tgf-βdnr，且在tgf-β存在下经表达dll3的细胞刺激。

101、在一些实施例中，该经工程改造的免疫细胞选自由以下组成的组：细胞毒性t细胞、辅助t细胞、自然杀伤t细胞、γδt细胞、nkt细胞及自然杀伤细胞。

102、在另一方面，本披露提供一种药物组合物，该药物组合物包含如上所述的抗dll3car、经分离的dll3结合蛋白、表达载体或经工程改造的免疫细胞，以及生理学上可接受的赋形剂。

103、在另一方面，本披露提供一种用于治疗受试者的dll3相关病症的方法，该方法包括向该受试者施用治疗有效量的如上所述的经工程改造的免疫细胞或治疗有效量的如上所述的药物组合物。

104、在另一方面，本披露提供如上所述的抗dll3 car、经分离的dll3结合蛋白、表达载体或经工程改造的免疫细胞用于制备用以治疗dll3相关病症的药物的用途。

105、在另一方面，本披露提供一种用于治疗dll3相关病症的药物，该药物包含如上所述的抗dll3 car、dll3结合蛋白、表达载体或经工程改造的免疫细胞。

106、在一些实施例中，dll3相关病症为选自由以下组成的组的癌症：肺癌、黑素瘤、乳腺癌、前列腺癌、结肠癌、肾细胞癌、卵巢癌、神经母细胞瘤、横纹肌肉瘤、白血病及淋巴瘤。

107、在一些实施例中，癌症表达dll3及pd-l1。

108、在一些实施例中，癌症与对应正常组织相比具有较高tgf-β表达水平。

109、在一些实施例中，dll3相关病症为小细胞肺癌。