抗猴痘病毒抗体或其功能性片段、检测猴痘病毒的试剂和试剂盒的制作方法

本发明涉及抗体，具体而言，涉及抗猴痘病毒抗体或其功能性片段、检测猴痘病毒的试剂和试剂盒。

背景技术：

1、猴痘是由猴痘病毒(monkeypox virus，mpxv)引起的。猴痘病毒是一种双链dna病毒，属于痘病毒科正痘病毒属的一员。猴痘是一种病毒性人畜共患病，主要发生在中非和西非的热带雨林地区，偶尔输出到其它地区。目前研究发现，病毒经黏膜和破损的皮肤侵入人体。人主要通过接触感染动物病变渗出物、血液、其它体液，或被感染动物咬伤、抓伤而感染。人与人之间主要通过密切接触传播，也可通过飞沫传播，接触被病毒污染的物品也有可能感染，还可通过胎盘垂直传播。尚不能排除性传播。

2、在临床症状上，猴痘的感染症状与天花相似，但猴痘的临床症状较轻，潜伏期5-12天，多为6-13天。患者发病初期表现为发热、头痛、淋巴结肿大、肌肉酸痛、重度疲乏等症状，之后会引起面部和身体的皮疹。猴痘为自限性疾病，患者通常会在两到三个星期内自行康复；但对于儿童、孕妇或由于其他健康状况而免疫抑制的人来说，猴痘可能会导致其他继发性感染，如肺炎、败血症和脑炎等严重疾病。

3、目前，猴痘病毒的检测方法主要是pcr扩增法和免疫检测法，pcr扩增法是国内外检测猴痘病毒的主要检测方法，但对仪器设备、检测场地及环境条件要求高，存在检测时间长、通量低等缺点，不便于人群大规模检测。而基于胶体金的免疫检测法具有快速、方便、易携带等的优势，因此成为研发的热点，而胶体金的检测性能依赖于针对猴痘病毒的抗体的性能。

4、因此，本领域对于有效结合猴痘病毒并对其进行检测的抗体存在着强烈需求。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供抗猴痘病毒抗体或其功能性片段、检测猴痘病毒或猴痘病毒抗原的试剂和试剂盒。

2、本发明是这样实现的：

3、第一方面，本发明实施例提供了一种抗体或其功能性片段，包括hcdr1、hcdr2、hcdr3和lcdr1、lcdr2、lcdr3，所述hcdr1～3包括或为与seq id no:7或14所示重链可变区的hcdr1～3一致的氨基酸序列；所述lcdr1～3包括或为与seq id no:8所示轻链可变区的lcdr1～3一致的氨基酸序列。

4、第二方面，本发明实施例提供了一种抗体或其功能性片段，包括重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包括上述任一实施例所述的hcdr1～hcdr3和所述轻链可变区包括上述任一实施例所述的lcdr1～lcdr3。

5、可选地，所述重链可变区如与seq id no:7或14具有至少80％同一性的氨基酸序列所示和/或所述轻链可变区如与seq id no:8具有至少80％同一性的氨基酸序列所示。

6、第三方面，本发明实施例提供了一种抗体或其功能性片段，包括重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区如seq id no:7或seq id no:14所示；所述轻链可变区如seq idno:8所示。

7、第四方面，本发明实施例提供了一种抗体或其功能性片段，包括重链和轻链，所述重链如seq id no:11或15所示；所述轻链如seq id no:12所示。

8、第五方面，本发明实施例提供了一种抗体或其功能性片段，所述抗体或其功能性片段与上述任一实施例所述的抗体或其功能性片段结合猴痘病毒抗原蛋白氨基酸序列之中的同一表位；或，所述抗体或其功能性片段与上述任一实施例所述的抗体或其功能性片段竞争性结合猴痘病毒抗原。

9、第六方面，本发明实施例提供了一种抗体偶联物，其包括如前述实施例所述的抗体或其功能性片段。

10、第七方面，本发明实施例提供了一种试剂或试剂盒，其包括如前述实施例所述的抗体或其功能性片段或如前述实施例所述的抗体偶联物。

11、第八方面，本发明实施例提供了一种检测猴痘病毒或猴痘病毒抗原的方法，其包括：将如前述实施例所述的抗体或其功能性片段、抗体偶联物、试剂或试剂盒与待测样本中的猴痘病毒或猴痘病毒抗原接触，形成免疫复合物。

12、第九方面，本发明实施例提供了一种分离的核酸、载体、细胞。

13、第十方面，本发明实施例提供了一种制备前述实施例所述的抗体或其功能性片段的方法，其包括：培养前述实施例所述的细胞。

14、第十一方面，本发明实施例提供了如前述实施例所述的抗体或其功能性片段、抗体偶联物、试剂或试剂盒在检测猴痘病毒或猴痘病毒抗原或制备检测猴痘病毒或猴痘病毒抗原的产品中的应用。

15、本发明具有以下有益效果：

16、本发明公开的抗猴痘病毒抗体包括上述重链互补决定区和轻链互补决定区，该抗体为猴痘病毒或猴痘病毒抗原的检测提供了重要的原料来源，具有改善的亲和力或活性。

技术特征：

1.一种抗体或其功能性片段，包括hcdr1、hcdr2、hcdr3和lcdr1、lcdr2、lcdr3，其特征在于，

2.一种抗体或其功能性片段，包括hcdr1、hcdr2、hcdr3和lcdr1、lcdr2、lcdr3，其特征在于，所述hcdr1的氨基酸序列包括seq id no:1或如seq id no:1所示；所述hcdr2的氨基酸序列包括seq id no:2或13，或如seq id no:2或13所示；所述hcdr3的氨基酸序列包括seq id no:3或如seq id no:3所示；和所述lcdr1、lcdr2和lcdr3的氨基酸序列依次包括seq id no:4～6或依次如seq id no:4～6所示。

3.一种抗体或其功能性片段，包括重链可变区和轻链可变区，其特征在于，所述重链可变区包括权利要求1～2任一项所述的hcdr1～hcdr3和所述轻链可变区包括权利要求1～2任一项所述的lcdr1～lcdr3；

4.一种抗体或其功能性片段，包括重链可变区和轻链可变区，其特征在于，所述重链可变区如seq id no:7或seq id no:14所示；所述轻链可变区如seq id no:8所示。

5.根据权利要求1～4任一项所述的抗体或其功能性片段，其特征在于，所述抗体或其功能性片段还包含恒定区；

6.一种抗体或其功能性片段，包括重链和轻链，其特征在于，所述重链的氨基酸序列如seq id no:11或15所示，所述轻链的氨基酸序列如seq id no:12所示。

7.一种抗体或其功能性片段，所述抗体或其功能性片段与权利要求1～6任一项所述的抗体或其功能性片段结合猴痘病毒抗原蛋白氨基酸序列之中的同一表位；或，所述抗体或其功能性片段与权利要求1～6任一项所述的抗体或其功能性片段竞争性结合猴痘病毒抗原。

8.根据权利要求1～7任一项所述的抗体或其功能性片段，其特征在于，所述抗体或其功能性片段以kd≤7.69×10-8m的亲和力结合猴痘病毒抗原；

9.根据权利要求1所述的抗体或其功能性片段，其特征在于，所述cdrs由kabat、chothia、abm、contact或imgt系统定义。

10.一种抗体偶联物，其特征在于，其包括如权利要求1～9任一项所述的抗体或其功能性片段；

11.一种试剂或试剂盒，其特征在于，其包括如权利要求1～9任一项所述的抗体或其功能性片段或如权利要求10所述的抗体偶联物；

12.一种检测猴痘病毒或猴痘病毒抗原的方法，其特征在于，其包括：

13.一种核酸、载体、细胞或制备权利要求1～9任一项所述的抗体或其功能性片段的方法，其特征在于，所述核酸编码权利要求1～9任一项所述的抗体或其功能性片段；所述载体含有上述的核酸；所述细胞含有上述的核酸或载体；所述方法包括：培养权利要求上述的细胞。

14.如权利要求1～9任一项所述的抗体或其功能性片段、如权利要求10所述的抗体偶联物或如权利要求11所述的试剂或试剂盒在检测猴痘病毒或猴痘病毒抗原或制备检测猴痘病毒或猴痘病毒抗原的产品中的应用。

技术总结
本发明公开了抗猴痘病毒抗体或其功能性片段、检测猴痘病毒的试剂和试剂盒，涉及抗体领域。本发明公开的抗猴痘病毒抗体包括重链互补决定区和轻链互补决定区，该抗体为猴痘病毒的检测提供了重要的原料来源，具有改善的亲和力或活性。

技术研发人员：孟媛,钟冬梅,唐丽娜,游辉,曹慧方
受保护的技术使用者：菲鹏生物股份有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/3/21