本发明属于生物医药领域,具体涉及针对tau蛋白的抗体。
背景技术:
1、神经退行性变性疾病(neurodegene-rative disease)是一类慢性进行性大脑和脊髓的细胞神经元退行性变性、丢失而导致的疾病的总称,阿尔茨海默病(alzheimerdisease,ad)就是其中一种与年龄相关的疾病,其起病隐袭,病程呈慢性进行性,正在成为严重的全球性健康问题。微管相关蛋白tau(microtubule-associatedprotein tau)的过度磷酸化而引起的神经纤维缠结是ad主要的病理特征之一,与ad的诊断密切相关。研究发现,和正常人相比,ad患者脑脊液和血液中tau蛋白水平明显升高,可以作为ad的重要生物标志物,在ad的早期发现、早期治疗、改善预后方面发挥重要作用。
2、因此,高特异性、高亲和力的针对tau蛋白的抗体的开发十分必要。
技术实现思路
1、为弥补现有技术的不足,本发明提供了针对tau蛋白的抗体。
2、为实现上述目的,本发明采用如下技术方案:
3、本发明的第一方面提供了针对tau蛋白的单克隆抗体,所述单克隆抗体包括三个cdr的重链可变区互补决定区和三个cdr的轻链可变区互补决定区,其中,重链可变区互补决定区cdr1、cdr2、cdr3的氨基酸序列分别如seq id no:1、2、3所示,轻链可变区互补决定区cdr1、cdr2、cdr3的氨基酸序列分别如seq id no:9、10、11所示。
4、进一步,所述单克隆抗体的重链可变区还包括四个fr的重链可变区框架区,轻链可变区还包括四个fr的轻链可变区框架区,其中,重链可变区框架区fr1、fr2、fr3和fr4的氨基酸序列分别如seq id no.4、5、6、7所示,轻链可变区框架区fr1、fr2、fr3和fr4的氨基酸序列分别如seq id no.12、13、14、15所示。
5、进一步,所述单克隆抗体的重链可变区的氨基酸序列如seq id no:8所示,
6、所述轻链可变区的氨基酸序列如seq id no:16所示。
7、进一步,所述单克隆抗体的重链可变区的氨基酸序列如seq id no:8所示,轻链可变区的氨基酸序列如seq id no:16所示。
8、进一步,所述cdr是根据kabat、imgt、chothia、abm或contact编号系统定义的。
9、进一步,所述cdr是根据kabat编号系统定义的。
10、进一步,所述单克隆抗体是无岩藻糖基化的单克隆抗体。
11、本发明的第二方面提供了编码本发明第一方面所述的单克隆抗体的核酸。
12、进一步,编码所述单克隆抗体重链可变区互补决定区cdr1、cdr2、cdr3的核酸分别具有如seq id no:17、18、19所示的核苷酸序列;编码所述单克隆抗体轻链可变区互补决定区cdr1、cdr2、cdr3的核酸分别具有如seq id no:20、21、22所示的核苷酸序列。
13、进一步,编码重链的核酸分子可操作的连接第一信号肽,编码轻链的核酸分子可操作的连接第二信号肽。
14、进一步,所述第一信号肽的核苷酸序列如seq id no:35所示,所述第二信号肽的核苷酸序列如seq id no:36所示。
15、进一步,所述信号肽与核酸的5’端连接。
16、本发明的第三方面提供了包括本发明第二方面所述的核酸的载体。
17、进一步,所述载体包括与所述单克隆抗体重链可操作的连接的第一信号肽,和/或与所述单克隆抗体轻链可操作的连接的第二信号肽。
18、进一步,所述第一信号肽的氨基酸序列如seq id no:33所示,所述第二信号肽的氨基酸序列如seq id no:34所示。
19、进一步,所述载体包括质粒载体、病毒载体或噬菌体载体。
20、本发明的第四方面提供了包括本发明第二方面所述的核酸或本发明第三方面所述的载体的宿主细胞。
21、进一步,所述宿主细胞包括原核细胞、真核细胞。
22、进一步,所述真核细胞包括低等真核细胞和高等真核细胞。
23、进一步,所述高等真核细胞包括哺乳动物细胞。
24、进一步,所述哺乳动物细胞包括骨髓瘤细胞系、hut78细胞、293t细胞、293f细胞、cho细胞、w138、bhk细胞。
25、本发明的第五方面提供了一种产品,所述产品包括本发明第一方面所述的单克隆抗体、本发明第二方面所述的核酸、本发明第三方面所述的载体或本发明第四方面所述的宿主细胞。
26、进一步,所述产品包括试剂盒。
27、进一步,所述试剂盒还包括缀合于抗体的可检测标记。
28、进一步,所述可检测标记包括荧光标记、放射性同位素、化学发光分子、顺磁性离子或自旋捕获试剂。
29、进一步,所述产品还包括药物组合物。
30、进一步,所述药物组合物还包括药学相容性载剂。
31、进一步,所述药物组合物还包括缓冲剂。
32、本发明的第六方面提供了如下任一项方法:
33、(1)一种制备本发明第一方面所述的单克隆抗体的方法,所述方法包括培养本发明第四方面所述的宿主细胞,回收单克隆抗体;
34、(2)一种检测样本中tau蛋白的方法,所述方法包括:使本发明第一方面所述的单克隆抗体与待测样本接触,从而检测待测样本中tau蛋白的水平。
35、进一步,(1)中所述的方法还包括纯化所述的单克隆抗体。
36、进一步,所述方法为非诊断目的的方法。
37、本发明的第七方面提供了如下任一项应用:
38、(1)本发明第一方面所述的单克隆抗体、本发明第二方面所述的核酸、本发明第三方面所述的载体或本发明第四方面所述的宿主细胞在检测tau蛋白中的应用;
39、(2)本发明第一方面所述的单克隆抗体、本发明第二方面所述的核酸、本发明第三方面所述的载体或本发明第四方面所述的宿主细胞在制备诊断tau蛋白相关疾病的产品中的应用;
40、(3)本发明第一方面所述的单克隆抗体、本发明第二方面所述的核酸、本发明第三方面所述的载体或本发明第四方面所述的宿主细胞在制备预防和/或治疗tau蛋白相关疾病的药物组合物中的应用。
41、本发明的优点和有益效果:
42、本发明提供的针对tau蛋白的单克隆抗体,对于tau蛋白具有很强的亲和活性,能够特异性的结合tau蛋白,为tau蛋白的检测tau蛋白相关疾病的治疗提供了新的方案,具有广阔的应用前景。
1.针对tau蛋白的单克隆抗体,其特征在于,所述单克隆抗体包括三个cdr的重链可变区互补决定区和三个cdr的轻链可变区互补决定区,其中,重链可变区互补决定区cdr1、cdr2、cdr3的氨基酸序列分别如seq id no:1、2、3所示,轻链可变区互补决定区cdr1、cdr2、cdr3的氨基酸序列分别如seq id no:9、10、11所示。
2.根据权利要求1所述的单克隆抗体,其特征在于,所述单克隆抗体的重链可变区还包括四个fr的重链可变区框架区,轻链可变区还包括四个fr的轻链可变区框架区,其中,重链可变区框架区fr1、fr2、fr3和fr4的氨基酸序列分别如seq id no.4、5、6、7所示,轻链可变区框架区fr1、fr2、fr3和fr4的氨基酸序列分别如seq id no.12、13、14、15所示。
3.根据权利要求2所述的单克隆抗体,其特征在于,所述单克隆抗体的重链可变区的氨基酸序列如seq id no:8所示,
4.编码权利要求1-3任一项所述的单克隆抗体的核酸。
5.包括权利要求4所述的核酸的载体。
6.根据权利要求5所述的载体,其特征在于,所述载体包括与所述单克隆抗体重链可操作的连接的第一信号肽,和/或与所述单克隆抗体轻链可操作的连接的第二信号肽。
7.包括权利要求4所述的核酸或权利要求5或6所述的载体的宿主细胞。
8.一种产品,其特征在于,所述产品包括权利要求1-3任一项所述的单克隆抗体、权利要求4所述的核酸、权利要求5或6所述的载体或权利要求7所述的宿主细胞。
9.如下任一项方法:
10.如下任一项应用: