一种同时提取樟树籽仁多种成分的方法与流程

本发明涉及提取，尤其涉及一种同时提取樟树籽仁多种成分的方法。

背景技术：

1、樟树是一种樟科植物，樟树籽全身是宝，樟树籽仁中主要成分为脂肪、蛋白质、膳食纤维及皂素，分别占59.3％、19.34％、10.91％和4.09％。樟树籽仁油的脂肪酸组成以癸酸和月桂酸为主，两者占90％以上，接近中碳链甘油三酯(mct)的组成，可以成为优良的营养油品。樟树籽仁蛋白富含各种必需氨基酸，可进一步开发应用于食品、饲料行业。皂素是一种非常好的非离子表面活性剂，具有良好的起泡性、乳化性，还具有杀菌、除病虫等功能，可应用于生活日用品、工农业产品中。

2、目前，大部分樟树籽均自熟落果，无人收购，资源利用率极低，造成资源浪费。因此，对樟树籽仁中多种成分进行高值化的开发利用很有必要。

3、现有技术中，樟树籽的开发利用主要集中于樟树籽仁油上，但针对樟树籽中茶皂素的提取与利用还不曾报道。樟树籽仁油提取技术主要有水代法、浸出法、水酶法、闪式提取法和超声提取法。水酶法出油率较高，但水酶法提油需对乳状液进行破乳得到清油，增加工艺步骤，目前破乳难点是亟需解决的问题之一，且该法需引入酶制剂，后期涉及酶制剂的除去步骤。其它提油技术存在出油率低或有害溶剂残留或能耗高或工艺复杂、耗时久等弊端。

4、如申请公布号为cn104946375a公开了一种解淀粉芽孢杆菌z16-1水酶法提取樟树籽仁油的方法，包括解淀粉芽孢杆菌发酵酶液的制备、樟树籽仁湿法粉碎、酶解处理、离心分离、变温处理破乳化释放樟树籽仁油等步骤，从樟树籽仁中提取樟树籽仁油。但是该方法存在油脂易被分解、使用的生物酶成本过高等问题。

5、对樟树籽仁蛋白仍处于研究阶段。目前，樟树籽仁蛋白提取方法主要以经正己烷等溶剂脱脂后的粕为原料，采用碱溶酸沉法来制备较高纯度的樟树籽仁分离蛋白。但碱溶酸沉法存在有机溶剂引入的问题，不符合绿色加工概念。

6、在樟树籽仁的开发利用上，目前只针对单一产品的研究和应用。在樟树籽仁的综合开发利用方面仍为空白，针对樟树籽仁多种成分的提取技术还有待完善。

技术实现思路

1、目前，针对樟树籽仁的综合提取方法尚未出现，为了解决上述技术问题，本发明提供了一种同时提取樟树籽仁多种成分的方法。该方法以脱壳樟树籽为原料进行冷榨，分离得到樟树籽仁油产品以及樟树籽粕a；然后通过体积浓度为45～85％的乙醇溶液对樟树籽粕a进行处理，分离得到皂素产品以及樟树籽滤渣b；最后，通过水对樟树籽滤渣b中蛋白质进行提取，并通过调节体系的ph，实现蛋白质与杂质的分离，获得高纯度樟树籽蛋白产品。基于此，本发明实现樟树籽仁多种成分的同时提取。

2、本发明的具体技术方案为：

3、本发明提供了一种同时提取樟树籽仁多种成分的方法，包括以下步骤：

4、(1)以脱壳樟树籽为原料，进行冷榨，得到樟树籽仁油产品和樟树籽粕a；

5、(2)往籽粕a中加入体积浓度为45～85％的乙醇溶液进行提取，固液分离得到皂素粗提液和樟树籽滤渣b；

6、(3)取樟树籽滤渣b进行粉碎处理，然后加入水并调节ph至碱性进行提取，过滤，取滤液进行一次离心，分层得到上层液相、中间层液相、下层沉淀相；取中间层液相调节ph至酸性，析出沉淀，进行二次离心，收集沉淀加水溶解，调节ph至中性，进行三次离心，收集液体，冷冻干燥得到樟树籽蛋白产品。

7、现有技术中，在提取樟树籽仁油时，不考虑提取对樟树籽仁粕的影响，樟树籽仁粕一般被丢弃或直接作为饲料；在提取樟树籽蛋白时，仅考虑将樟树籽的油脂完全脱除，进而用来制备蛋白质产品，未考虑脱油脂的方法对蛋白质结构、功能特性及品质的影响，也未考虑油脂的品质等问题。为了解决樟树籽仁多种成分的综合提取问题，本发明提供上述同时提取樟树籽仁多种成分的方法。其中，通过步骤(1)以脱壳樟树籽为原料进行冷榨，可以得到樟树籽粕a和樟树籽仁油产品；然后进一步地通过步骤(2)对樟树籽粕a进行处理，提取出皂素粗提液，进而可得到皂素产品；最后通过步骤(3)对樟树籽滤渣b进行处理，获得高纯度樟树籽蛋白产品。基于此，利用本发明实现樟树籽仁多种成分的同时提取。本发明提供方法能实现同时提取樟树籽仁多种成分的原理在于：

8、①首先，步骤(1)中对脱壳樟树籽进行冷榨，通过较低温度下对脱壳樟树籽压榨，除了能够直接有效分离樟树籽仁油和粕、得到品质较高的樟树籽仁油产品外，还能较好地保护樟树籽中的蛋白质结构，减少蛋白质产品的损失。同时，通过机械压榨的冷榨方式分离樟树籽仁油产品还能减少皂素的损失。

9、②其次，通过步骤(2)，先从樟树籽粕a中分离出皂素，进而通过步骤(3)实现樟树籽蛋白质成分的纯化，可以同时得到樟树籽皂素产品及樟树籽蛋白产品。具体而言，樟树籽粕a的多种成分主要为樟树籽蛋白质和皂素，本技术人发现，通过体积浓度为45～85％的乙醇溶液对樟树籽粕a进行提取，可以实现樟树籽粕a中皂素与蛋白质的有效分离。乙醇溶液的体积浓度为45～85％，能使樟树籽粕a中皂素溶出，溶解于乙醇溶液中，而蛋白质留在樟树籽粕a中，实现蛋白质和皂素的有效分离。若乙醇溶液的体积浓度低于45％，蛋白质也会部分溶解于乙醇溶液中，降低蛋白产品得率的同时，使得皂素产品纯度降低。若乙醇溶液的体积浓度高于85％，皂素较难洗脱，皂素产品得率降低的同时，蛋白产品纯度降低。本发明通过步骤(1)分离得到樟树籽仁油产品、通过步骤(2)分离得到皂素产品，依次实现樟树籽中除蛋白质以外的多种成分的分离，可以使得最后通过步骤(3)得到的樟树籽蛋白产品具有较高的纯度。

10、③步骤(3)为高纯度樟树籽蛋白产品的获取步骤。除了步骤(2)体积浓度为45～85％的乙醇溶液提取实现樟树籽蛋白质和皂素的有效分离保证高纯度蛋白的获取外，该步骤(3)中，通过水对樟树籽滤渣b中的蛋白质进行提取，并通过调节体系的ph，实现蛋白质与杂质的分离，保证高纯度樟树籽蛋白产品的获取。调节ph至碱性进行提取，可以使樟树籽滤渣b中蛋白质溶出，溶解于水中，过滤后滤液进行一次离心，会出现分层现象，分为上层液相、中间层液相、下层沉淀相。上层主要为脂肪、脂肪-蛋白质结合物，中间层液相主要为蛋白质、可溶性糖类，下层沉淀相主要为颗粒较小的纤维、密度较大容易沉淀的蛋白质-脂质结合物。然后取中间层液相调节ph至酸性，蛋白质析出为沉淀，可以除去可溶性糖类杂质。最后取沉淀溶解，调节ph至中性，进一步确保蛋白质与杂质的分离，提高蛋白产品纯度。

11、作为本发明上述技术方案的优选，步骤(1)中，进行冷榨前，对原料进行低温烘烤；所述低温烘烤的温度为32～48℃。

12、在进行冷榨前对原料进行低温烘烤，可以提高出油率。低温烘烤的温度优选为32～48℃。烘烤温度不宜过高，否则会破坏油品质，导致酸价、过氧化值均会上升；烘烤温度过低则无法起到干燥作用，同时，出油率无法得到提高。

13、作为本发明上述技术方案的优选，步骤(1)中，所述冷榨的温度为35～45℃、时间为30～60min。

14、冷榨能够直接有效分离樟树籽仁油和粕、得到品质较高的樟树籽仁油产品；还能较好地保护樟树籽中的蛋白质结构，减少蛋白质产品的损失。冷榨的温度优选为35～45℃，在此温度范围内进行冷榨，可以蛋白质结构不受破坏，能有效减少蛋白质产品的损失；同时，在该温度下，脱壳樟树籽具有较高的出油率。

15、作为本发明上述技术方案的优选，步骤(2)中，所述提取的料液比为1:10～30。

16、步骤(2)是分离樟树籽粕a中皂素和蛋白质的关键步骤。用乙醇溶液对樟树籽粕a中皂素和蛋白质进行提取分离，其料液比优选为1:10～30。若料液比低于1:30，皂素产品的纯度会下降；若料液比高于1:10，皂素产品的得率会下降，比如，料液比为1:5时，皂素产品的得率大大下降。

17、作为本发明上述技术方案的优选，步骤(2)中，所述提取的温度为20～35℃、时间为60～120min。

18、作为本发明上述技术方案的优选，步骤(2)中，加入体积浓度为45～85％的乙醇溶液后，调节体系ph至6.0～8.0。

19、用乙醇溶液对樟树籽粕a中皂素和蛋白质进行提取分离时，提取的ph条件对蛋白质产品及皂素产品的得率、纯度均有较大的影响，体系ph为6.0～8.0，蛋白质产品及皂素产品的得率、纯度较优。ph较大时，对皂素产品的纯度影响显著，ph大于8.0时，皂素溶出减少，同时蛋白质存在部分溶出现象，皂素产品的纯度大大降低。ph较小时，对皂素产品得率、蛋白产品纯度影响较大，ph小于6.0时，皂素溶出减少，皂素产品得率低，同时，皂素作为后期蛋白产品的杂质，其纯度降低。除此之外，皂素残留不仅影响蛋白产品的纯度，还会对蛋白质的色泽、结构特性带来的影响。

20、具体地，步骤(2)的一个优选方案为：

21、将籽粕a经粉碎机粉碎后，依次过30、60和80目筛，然后以1:10～30的料液比加入体积浓度为45～85％的乙醇溶液，混合均匀，将ph调节至6～8，在20～35℃下搅拌提取60～120min，重复提取2～3次，抽滤，合并滤液得到皂素粗提液，合并滤渣得到樟树籽滤渣b。

22、作为本发明上述技术方案的优选，步骤(3)中，所述提取的料液比为1:10～25。

23、作为本发明上述技术方案的优选，步骤(3)中，所述提取的温度为20～35℃、时间为60～120min。

24、作为本发明上述技术方案的优选，步骤(3)中，所述调节ph至碱性为：调节ph至7.5～9.5；所述调节ph至酸性为：调节ph至4.5～5.0；所述调节ph至中性为：调节ph至6.5～7.5。

25、步骤(3)中，通过水对樟树籽滤渣b中的蛋白质进行提取，并通过调节体系的ph，实现蛋白质与杂质的分离，保证高纯度樟树籽蛋白产品的获取。调节ph至碱性优选为调节至7.5～9.5，在该ph下进行提取，可以使樟树籽滤渣b中蛋白质溶出效果最好。取中间层液相调节ph至酸性，优选为调节至4.5～5.0，其目的是使蛋白质析出为沉淀，除去可溶性糖类杂质，该ph条件下，除杂效果最好。最后取沉淀溶解，调节ph至6.5～7.5，进一步确保蛋白质与杂质的分离，提高蛋白产品纯度。

26、作为本发明上述技术方案的优选，所述方法还包括以下步骤：取皂素粗提液进行旋蒸，得到皂素浓缩液，然后进行冷冻干燥，得到樟树籽皂素产品。

27、与现有技术相比，本发明具有以下技术效果：

28、本发明提供方法以脱壳樟树籽为原料进行冷榨，分离得到樟树籽仁油产品以及樟树籽粕a；然后通过体积浓度为45～85％的乙醇溶液对樟树籽粕a进行处理，分离得到皂素产品以及樟树籽滤渣b；最后，通过水对樟树籽滤渣b中蛋白质进行提取，并通过调节体系的ph，实现蛋白质与杂质的分离，获得高纯度樟树籽蛋白产品。基于此，可以实现樟树籽仁多种成分的同时提取。

29、本发明通过较低温度下对脱壳樟树籽压榨，除了能够直接有效分离樟树籽仁油和粕、得到品质较高的樟树籽仁油产品外，还能较好地保护樟树籽中的蛋白质结构，减少蛋白质产品的损失；同时，通过机械压榨的冷榨方式分离樟树籽仁油产品还能减少皂素的损失。

30、本发明通过体积浓度为45～85％的乙醇溶液对樟树籽粕a中的皂素与蛋白质进行提取分离，可以实现樟树籽粕中皂素与蛋白质的有效分离。本发明还提供了以乙醇溶液为提取液对樟树籽粕中蛋白质和皂素进行提取分离的最优体积浓度，为45～85％，该浓度下能使樟树籽粕中皂素尽可能多地溶出，溶解于乙醇溶液中，而蛋白质留在樟树籽粕中。