一种大灰藓体细胞快速再生的方法与流程

本发明属于苔藓的组织培养，具体涉及一种大灰藓体细胞快速再生的方法。

背景技术：

1、苔藓植物作为生物多样性的重要组成部分，在全球范围内广泛分布，种类繁多。苔藓植物由于其特殊的进化地位，使其在植物分子生物学方面的研究十分重要，并且随着近年来苔藓植物景观的风靡，苔藓植物在园林园艺领域的应用研究备受重视。苔藓植物大部分个体微小，结构较为独特，具有较高的观赏价值，但是，野生苔藓材料被过度破坏，苔藓植物原材料不足已经成为当下亟需解决的问题。

2、大灰藓(hypnumplumaeforme)多生于阔叶林、针阔混交林等林下环境，其配子体呈黄绿色或绿色，是雌雄异株的苔藓植物。大灰藓的茎匍匐生长，匍匐茎长达10cm，呈现出规则或不规则状分枝。目前，大量野生大灰藓被过度利用，严重威胁苔藓植物生存与苔藓植物资源的可持续利用。因此，提出一种大灰藓体细胞快速再生的方法十分必要。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种大灰藓体细胞快速再生的方法，该方法简单、高效，能够有效地增加大灰藓配子体的数量，实现大灰藓植株快速再生，缩短大灰藓植株组培周期。

2、为了解决上述问题，本发明提供了以下技术方案：

3、本发明提供了一种大灰藓配子体的高温干旱处理方法，所述高温干旱处理的温度为60～80℃，时间为180～300min。

4、优选的，所述高温干旱处理应用的设备包括烘箱。

5、本发明提供了一种大灰藓体细胞快速再生的方法，包括如下步骤：

6、采用上述技术方案所述的高温干旱处理方法对大灰藓配子体进行处理；

7、将高温干旱处理后的大灰藓配子体进行浸水恢复；

8、将浸水恢复后的大灰藓配子体进行培养，得到配子体再生的大灰藓。

9、优选的，所述浸水恢复的时间为4.5～5.5min。

10、优选的，所述培养的温度为24～26℃，培养的时间为21～30d。

11、优选的，所述培养包括光暗交替培养；每个光暗交替培养周期中黑暗培养的时间为7～9h，光照培养的时间为15～17h。

12、优选的，所述培养的光照强度为60～80lx。

13、优选的，所述培养应用的容器包括培养皿；所述培养皿中放置滤纸。

14、优选的，对所述滤纸定期补充水溶液，保持滤纸湿润。

15、本发明提供了上述技术方案所述的高温干旱处理方法或上述技术方案所述的方法在提高大灰藓植株新增配子体数量中的应用。

16、本发明的有益效果：本发明踢提供了一种大灰藓配子体的高温干旱处理方法，所述高温干旱处理的温度为60～80℃，时间为180～300min。本发明所述高温干旱处理创造一个干旱胁迫环境，在培养环境正常之后，在大灰藓的生长恢复期诱导配子体快速再生，提高大灰藓的配子体数量。该方法操作简单，价格低廉，实用性强，可以实现大灰藓规模化生产。

17、本发明提供了一种大灰藓体细胞快速再生的方法，该方法短时间可以诱导大量配子体产生，实现大灰藓体细胞快速再生并增加生物量，相比于未处理的大灰藓配子体植株，处理后植株配子体新生数目显著增加。本发明公开的大灰藓体细胞快速再生的方法，形成了大灰藓规模化生产的关键技术，为大灰藓规模化生产和应用提供理论支持，对野生大灰藓的保护以及大灰藓产业化发展具有重要的意义。

技术特征：

1.一种大灰藓配子体的高温干旱处理方法，其特征在于，所述高温干旱处理的温度为60～80℃，时间为180～300min。

2.根据权利要求1所述的高温干旱处理方法，其特征在于，所述高温干旱处理应用的设备包括烘箱。

3.一种大灰藓体细胞快速再生的方法，其特征在于，包括如下步骤：

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述浸水恢复的时间为4.5～5.5min。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述培养的温度为24～26℃，培养的时间为21～30d。

6.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述培养包括光暗交替培养；每个光暗交替培养周期中黑暗培养的时间为7～9h，光照培养的时间为15～17h。

7.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述培养的光照强度为60～80lx。

8.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述培养应用的容器包括培养皿；所述培养皿中放置滤纸。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，对所述滤纸定期补充水溶液，保持滤纸湿润。

10.权利要求1或2所述的高温干旱处理方法或权利要求3～9任一项所述的方法在提高大灰藓植株新增配子体数量中的应用。

技术总结
本发明属于苔藓的组织培养技术领域，具体涉及一种大灰藓体细胞快速再生的方法。本发明提供一种大灰藓配子体的高温干旱处理方法，所述高温干旱处理的温度为60～80℃，时间为180～300min。本发明所述高温干旱处理可以促进大灰藓在生长恢复期的体细胞再生，显著提高大灰藓的配子体数量。且高温干旱处理方法操作简单，价格低廉，实用性强。本发明在高温干旱胁迫处理条件下探索大灰藓体细胞快速再生技术，可以实现大灰藓规模化生产。本发明提出的大灰藓体细胞快速再生的方法形成了大灰藓规模化生产的关键技术，对野生大灰藓的保护以及大灰藓产业化发展具有重要的意义。

技术研发人员：刘莉,温从发,程钰惠,梁赫,段柳,陈刘柱
受保护的技术使用者：丽水市润物苔藓科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15