WNT10A和SLCO4A1-AS1在胶质瘤诊治中的应用的制作方法

本发明属于生物医药和分子生物学，具体涉及wnt10a和slco4a1-as1在胶质瘤诊治中的应用。

背景技术：

1、公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

2、胶质瘤是最常见的原发性颅内肿瘤，占恶性脑肿瘤的81％。胶质母细胞瘤是最常见的胶质瘤(约占所有胶质瘤的45％)，其特征是预后差，对手术和放化疗方案产生抵抗，5年相对生存率仅为5％。gbm患者预后不良的主要原因在于肿瘤细胞的高度增殖能力、浸润性生长、瘤内遗传异质性以及微血管增生等恶性表型及特征。目前，国际上治疗gbm的标准方案为最大限度手术切除后给予替莫唑胺(temolozomide，tmz)同步化疗，并联合应用放射治疗，但整体治疗效果并不理想。由于胶质瘤细胞向周围脑组织的浸润特性以及血脑屏障对化疗药物通透性较差，即使利用目前先进的显微外科手术技术，仍难以将肿瘤完全切除，且易导致胶质瘤细胞对治疗干预措施的高度抵抗及耐受。因此，寻找有效抑制胶质瘤恶性生物学特性的新型治疗方式，从而延长患者生存期、提高患者生存质量，是神经肿瘤治疗领域面临的重要挑战。

3、wnt信号通路显示多效性生理功能，从神经发生到干细胞增殖，并已涉及各种人类癌症，包括胶质瘤。这一途径在癌症干细胞(csc)的背景下尤其相关，csc已被指出为癌症复发和抗放疗和化疗的关键介质。因此，针对wnt通路特定成分的新型治疗策略已被广泛探索。已有研究发现wnt通路与胃癌和膀胱癌耐药、食管鳞状细胞癌患者预后差以及结直肠腺瘤风险增加有关。申请人前期筛选了胶质瘤中特异性表达的wnt成员，其中wnt10a作为候选基因，显著性差异最高。重要的是，迄今为止还没有研究探索wnt10a在人类胶质瘤中的相关性。

4、同时，在过去的十年中，长链非编码rna被发现与癌症的发展和恶化有潜在的关系。这些长链非编码rna大多是内源性的，长度不低于200个核苷酸，并且编码蛋白质的能力有限或没有。slco4a1反义rna 1(slco4a1-as1)位于20号染色体slco4a1的反义链上，在几种癌症类型中明显过表达，与预后不良有关。然而，其在胶质瘤中的作用尚未见报道。

技术实现思路

1、针对上述现有技术的不足，发明人经长期的技术与实践探索，提供wnt10a和slco4a1-as1在胶质瘤诊治中的应用。本发明首次研究证实wnt10a和slco4a1-as1在胶质瘤中高表达，且其表达量与胶质瘤的预后相关，同时通过调控wnt10a的表达可控制胶质瘤细胞的恶性生长及侵袭能力，有望开发其作为胶质瘤诊断/治疗/预后标志物的应用。

2、为实现上述技术目的，本发明采用如下技术方案：

3、本发明的第一个方面，提供检测wnt10a和slco4a1-as1的物质在制备用于诊断、检测、监测或预测胶质瘤的进展的产品中的应用。

4、本发明通过研究证实，wnt10a的表达水平在胶质瘤中上调，与肿瘤分子分级相关，同时wnt10a表达与预后存在显著关联，wnt10a的高表达则预示胶质瘤患者的较差预后。而slco4a1-as1的表达水平同样在胶质瘤中上调，且与肿瘤分级，idh突变状态，1p/19q编码状态相关。进一步的，在总体胶质瘤患者、lgg以及gbm患者中，高表达均预示不良预后。因此，所述wnt10a和slco4a1-as1可作为诊断、检测、监测或预测胶质瘤的进展的生物标志物。

5、本发明的第二个方面，提供一种用于诊断、检测、监测或预测胶质瘤的进展的产品，其包含基于高通量测序方法和/或基于定量pcr方法和/或基于探针杂交方法检测样品中wnt10a和slco4a1-as1的表达。

6、本发明的第三个方面，提供一种用于诊断、检测、监测或预测胶质瘤的进展的系统，所述系统包括：

7、i)分析单元，所述分析单元包含用于确定受试者的待测样品中选自上述wnt10a和slco4a1-as1表达水平的检测物质，以及；

8、ii)评估单元，所述评估单元包含：根据i)中确定的所述wnt10a和slco4a1-as1的表达水平判断所述受试者患病情况。

9、本发明的第四个方面，提供抑制wnt10a和slco4a1-as1表达和/或使其活性降低的物质在如下a1)-a5)至少一种中的应用：

10、a1)抑制胶质瘤细胞增殖或制备抑制胶质瘤细胞增殖的产品；

11、a2)抑制胶质瘤细胞的集落形成能力或制备抑制胶质瘤细胞集落形成能力的产品；

12、a3)抑制胶质瘤细胞侵袭能力或制备抑制胶质瘤细胞侵袭能力的产品；

13、a4)抑制胶质瘤生长或/或侵袭或制备抑制胶质瘤生长或/或侵袭的产品；

14、a5)治疗胶质瘤或制备治疗胶质瘤的产品。

15、本发明的第五个方面，提供一种预防和/或治疗胶质瘤的方法，所述方法包括向受试者施用上述抑制wnt10a和slco4a1-as1表达和/或使其活性降低的物质。

16、与现有技术方案相比，上述一个或多个技术方案具有如下有益效果：

17、上述技术方案首次证明了wnt10a和slco4a1-as1表达随胶质瘤恶性程度的增加而升高，且与生存率呈负相关；同时wnt10a沉默慢病毒可显著抑制胶质瘤wnt10a表达水平，wnt10a的沉默抑制了胶质瘤细胞的增殖和集落形成，可作为一种有效的药物用于预防和/或治疗胶质瘤；同时，slco4a1-as1基因下调亦可有效抑制胶质瘤细胞的恶性生长和侵袭能力。

18、总之，上述技术方案为寻找胶质瘤临床诊断和预后评估的生物标志物及药物治疗靶点提供了新的视野，为相关药物研发奠定了基础，对于胶质瘤的研究、治疗具有重要的意义，因此具有良好的实际应用之价值。

技术特征：

1.检测wnt10a和slco4a1-as1的物质在制备用于诊断、检测、监测或预测胶质瘤的进展的产品中的应用。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述wnt10a和slco4a1-as1为人源；

3.如权利要求1所述应用，其特征在于，所述用于诊断、检测、监测或预测胶质瘤的进展包括对胶质瘤的(早期或辅助)诊断、恶性程度评估以及胶质瘤患者的预后评估；

4.一种用于诊断、检测、监测或预测胶质瘤的进展的产品，其特征在于，所述产品包含基于高通量测序方法和/或基于定量pcr方法和/或基于探针杂交方法检测样品中wnt10a和slco4a1-as1的表达情况的物质。

5.如权利要求4所述产品，其特征在于，所述样品为受试者胶质瘤样品，包括受试者胶质瘤细胞或胶质瘤组织；

6.一种用于诊断、检测、监测或预测胶质瘤的进展的系统，其特征在于，所述系统包括：

7.如权利要求7所述系统，其特征在于，所述wnt10a和slco4a1-as1为人源；

8.抑制wnt10a和slco4a1-as1表达和/或使其活性降低的物质在如下a1)-a5)至少一种中的应用：

9.如权利要求8所述应用，其特征在于，抑制wnt10a和slco4a1-as1表达和/或使其活性降低的物质包括针对抑制wnt10a和slco4a1-as1的rna干扰分子或反义寡核苷酸、小分子抑制剂、sirna，实施慢病毒感染或基因敲减的物质。

10.如权利要求8所述应用，其特征在于，所述产品为药物或者实验试剂，所述实验试剂供基础研究使用。

技术总结
本发明属于生物医药和分子生物学技术领域，具体涉及WNT10A和SLCO4A1‑AS1在胶质瘤诊治中的应用。本发明首次证明了WNT10A和SLCO4A1‑AS1表达随胶质瘤恶性程度的增加而升高，且与生存率呈负相关；同时WNT10A沉默慢病毒可显著抑制胶质瘤WNT10A表达水平，WNT10A的沉默抑制了胶质瘤细胞的增殖和集落形成，可作为一种有效的药物用于预防和/或治疗胶质瘤；同时，SLCO4A1‑AS1基因下调亦可有效抑制胶质瘤细胞的恶性生长和侵袭能力。本发明为寻找胶质瘤临床诊断和预后评估的生物标志物及药物治疗靶点提供了新的视野，为相关药物研发奠定了基础，对于胶质瘤的研究、治疗具有重要的意义。

技术研发人员：韩明志,薛志伟,吴毅博,牟广靖,黄斌,李新钢
受保护的技术使用者：济南微生态生物医学省实验室
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15