作为FGFR抑制剂的茚并吲哚化合物的制作方法

本发明属于fgfr抑制剂领域，尤其涉及一种作为fgfr抑制剂的茚并吲哚化合物。

背景技术：

1、成纤维母细胞生长因子受体(fgfr，fibroblast growth factors receptor)属于受体型蛋白酪氨酸激酶，该家族主要包括fgfr1、fgfr2、fgfr3和fgfr4四位成员。fgfr参与调节细胞增殖、凋亡、迁移、新生血管生成等多个过程。由于作用广泛，fgfr及其他rtk在正常情况下受到严格调控。在肿瘤中，如在肝癌、膀胱癌、肺癌、乳腺癌、前列腺癌等，fgfr激活突变或者配体/受体过表达导致其持续组成型激活，不仅与肿瘤的发生、发展、不良预后等密切相关，并且在肿瘤新生血管生成、肿瘤的侵袭与转移等过程中也发挥重要作用。因此，fgfr被公认为是抗肿瘤重要靶点，fgfr小分子抑制剂的研发逐步受到越来越多的关注。

2、成纤维生长因子(fgf)与受体fgfr结合后使受体胞内段酪氨酸残基或靶蛋白酪氨酸残基磷酸化激活，继而通过多种胞内信号传导分子活化相关传导途径.目前阐明fgf诱导的下游级联信号通路有：(1)pkc路径；(2)ras/raf/mek/erk路径；(3)jak/stat路径；(4)pi3k途径。有趣的是，fgf信号可激活蛋白激酶erk1和erk2，且激酶活性持续时间明显长于表皮生长因子(epidermal growth factor，egf)诱导的磷酸化激酶持续时间；不同路径的活化还能够磷酸化myc、fos等早期转录因子，促使相关靶基因转录；同时fgfr磷酸化后还可直接转入细胞核内发挥作用。

3、fgfr1的突变可导致3种遗传性疾病：kaliman综合征、pfeiffer综合征和osteoglophonic dysplasia，一些肿瘤中也发现fgfr1信号异常，如研究发现在乳腺癌、脑胶质瘤、肝癌细胞等有高水平的表达，且fgfr1介导的信号传递异常与纤维化疾病如肺纤维化、肝硬化等有密切关系，研究也发现fgfr1突变与非小细胞肺癌以及肺鳞状细胞癌相关。

4、已发现的20多种fgf中，fgfr1可以和10多种fgf结合，但是优先选择与fgf1(酸性成纤维细胞生长因子)和fgf2(碱性成纤维细胞生长因子)结合，它们具有刺激成纤维细胞、血管内皮细胞、平滑肌细胞和神经细胞生长的生物学活性，fgfr1是它们的高亲合性受体。当fgf与fgfr1胞外段结合后，受体细胞内段酪氨酸激酶活性区首先发生自身磷酸化，然后使受体靶蛋白发生反式磷酸化，通过蛋白质级联反应将配体的信号传递给细胞核，表现为促进损伤修复、胚胎发育、骨骼形成、血管新生和神经再生等功效。

5、fgfr2在胚胎发育和组织修复中发挥着重要作用，在骨骼和血管生成中的作用更为显著，也发现与肿瘤血管的形成、肿瘤的分期、转移、预后及化疗疗效密切相关，在多种人类恶性肿瘤都出现高表达，基因扩增或错义突变，如在胃癌，肺癌，乳腺癌，卵巢癌和子宫内膜癌等恶性肿瘤中普遍存在。在慢性炎症、吸烟，过高的热量摄取、运动减少的过程中，fgfr2的信号失控导致表观遗传修饰与基因变异的积累致使癌症的发生。fgfr2是进展期胃癌侵袭特性的基础，与胃癌的病理类型、临床分期、淋巴结及远处转移密切相关。fgfr2与多种fgfs具有高度亲和力。但是fgfr2的胞外区mrna的选择性剪接使该区的c端成为高度可变区，产生具有跨膜结构的高亲和力fgfr2-iiib或fgfr2-iiic两种亚型。fgfr2-iiib主要在上皮细胞中表达，fgfr2-iiic主要在间质细胞中表达。而间质细胞表达的fgf7和fgf10能特异性地激活fgfr2-iiib，其中，fgf10与fgfr2iiib亲和力较高，是fgfr2iiib的特异性配体。而fgf2、fgf4、fgf6、fgf8和fgf9则特异性激活fgfr2-iiic.研究发现胃间质细胞分泌来源的fgf7可促进胃癌细胞生长，细胞恶性程度越高，fgfr2-iiib表达程度越高，而胃间质纤维细胞未发现fgfr表达。围绕fgfr2分子进行的大量研究表明，针对fgfr2的单克隆抗体对fgfr2高表达或活化的胃癌细胞具有明显的抑制作用，联合化疗应用对胃癌的抑制具有协同作用，显示出以fgfr2为治疗靶点治疗进展期胃癌具有良好的应用前景。

6、fgfr3在骨骼、关节软骨发育过程中以及关节软骨细胞稳态维持中发挥重要作用，在骨关节炎中也起重要作用，研究发现fgfr3基因突变激活会会导致一系列遗传性骨骼发育缺陷，如致死性侏儒症、软骨发育不全、颅缝早闭综合征等。近来，肿瘤研究发现多发性骨髓瘤、宫颈癌和膀胱癌中存在fgfr3基因突变，特别是在原发性和淋巴结转移的膀胱癌均发现突变。fgfr3胞外区域中不同的mrna剪接机制产生了不同的fgfr3受体同系物，如：fgfr3a、fgfr3b、fgfr3c，这些同系物的不同在于它们与配体结合的选择倾向性和亲和力及组织表达性不同，如fgfr3b是人类上皮细胞中的主要存在形式，其也是膀胱癌中发现的主要突变形式。在发现的23种fgfs中，fgf9和fgf18是fgfr3b的相对特异性配体。因此，靶向fgfr3治疗，也许会为膀胱癌病人带来一线曙光。

7、fgfr4是肝脏中主要的fgf受体亚型。迄今发现的20多种成纤维生长因子(fgf)中有10个能与fgfr4结合，其中仅有fgf19与fgfr4特异性结合。近年来研究表明，fgfr4的改变，如过表达、突变、易位、和截短等，与多种癌症的进展有关，包括横纹肌肉瘤、肾细胞癌、骨髓瘤、乳腺癌、胃癌、结肠癌、膀胱癌、胰腺癌和肝细胞癌等。

8、因此，可以预测，开发新的抑制fgfr的化合物，可以用于治疗和预防fgfr介导的多种相关疾病。

技术实现思路

1、本发明提供了作为fgfr抑制剂的一种如式(ii)所示的化合物、其异构体、前药、稳定的同位素衍生物及药学上可接受的盐：

2、

3、r1、r2独立地选自氢、c1-c6烷基、卤素或氰基；

4、r3独立地选自自氢、c1-c6烷基；

5、r4独立地选自氢、卤素、c1-c6烷基、c3-c8环基、c2-c6炔基；

6、r5独立地选自氢、c1-c6烷基、氟原子、三氟甲基、卤素或氰基。

7、进一步地，所述茚并吲哚化合物的制备过程包括如下步骤：在烘干的schlenk反应管中加入0.2mmol化合物i和0.3mlthf，在－78℃下依次滴加1.6mol/l的n-buli的正己烷溶液0.13ml、1.0mol/l的zni2的thf溶液0.13ml和1.0mol/llii的thf溶液0.5ml，恢复到室温继续搅拌30min，然后加入1.86ml甲苯，升温至110℃反应24h。反应液用饱和nh4cl溶液2ml淬灭，用10mlet2o萃取3次，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，减压旋蒸除去溶剂，以石油醚：乙酸乙酯体积比为5∶1作为洗脱剂，经硅胶柱层析得化合物ii。

8、反应式如下：

9、

10、进一步地，所述茚并吲哚化合物选自下列结构中的一种：

11、

12、

13、进一步地，所述茚并吲哚化合物具有以下用途：

14、(a)制备治疗与fgfr活性或表达相关的疾病的药物；

15、(b)制备fgfr靶向抑制剂；

16、(c)体外非治疗性地抑制fgfr的活性。

17、进一步地，所述疾病选自下组：肿瘤、与骨骼相关的疾病、t细胞调节的炎症和自身免疫疾病。

18、进一步地，所述肿瘤选自下组：肺癌、膀胱癌、乳腺癌、胃癌、肝癌、唾液腺肉瘤、卵巢癌、前列腺癌、宫颈癌、上皮细胞癌、多发性骨髓瘤、胰腺癌、淋巴瘤、慢性髓性白血病、淋巴细胞性白血病、皮肤t细胞淋巴瘤。

19、本发明的有益效果是：

20、(1)发明的药物制剂可以以每剂量单位包含预定量的活性成分的剂量单位形式给药，这种单位可根据治疗的病症、给药方法和患者的年龄、体重和状况包含例如0.5毫克至1克，优选1毫克至700毫克，特别优选5毫克至300毫克的本发明的化合物，或药物制剂可以以每剂量单位包含预定量的活性成分的剂量单位形式给药，优选剂量单位制剂是包含如上指示的日剂量或分剂量或其相应分数的活性成分的那些，此外，可以使用制药领域中公知的方法制备这种类型的药物制剂；

21、(2)本发明药物制剂可适于通过任何所需的合适方法给药，例如通过经口(包括口腔或舌下)、直肠、经鼻、局部(包括口腔、舌下或经皮)、阴道或肠道外(包括皮下、肌内、静脉内或皮内)方法给药，可以使用制药领域中已知的所有方法通过例如将活性成分与一种或多种赋形剂或一种或多种辅助剂合并来制备这样的制剂。