一种度胺类药物耐药性检测试剂盒及其应用

本发明涉及生物，具体涉及一种度胺类药物耐药性检测试剂盒及其应用。

背景技术：

1、血液癌又称白血病，作为恶性肿瘤的一种，有着难治疗和易复发的特点，在我国各年龄组恶性肿瘤的死亡率中占第六位(男性)和第八位(女性)，在儿童及35岁以下的人群中则占第一位，严重威胁人类健康。

2、crbn作为目前最常用的e3泛素连接酶，是包括来那度胺、泊马度胺和沙利度胺在内的多种度胺类物的作用靶点，因此这些度胺类药物也被成为crbn类分子胶。crbn类分子胶药物在对血液癌的治疗上作用明显，其已知作用包括抗肿瘤、抗血管生成、促红细胞生成和免疫调节等。

3、在过去的治疗过程中，往往会出现一些患者，对度胺类药物产生耐药性，造成的后果不仅有害患者自身的治疗，还造成大量的金钱损失。目前市面上在售的crbn检测试剂盒采用单抗结合法，操作复杂，耗时长，不利于大范围推广。因此亟需研发一种能够简单快速地检测患者体内crbn表达量的试剂盒，从而判断度胺类药物能否在患者体内达到预期的治疗效果。

技术实现思路

1、本发明要解决的技术问题是提供一种用于检测e3泛素连接酶crbn的试剂盒。经实验发现赖氨酸特异性去甲基化酶kdm5c能与crbn相互作用，增加crbn在体内的稳定性，反之kdm5c表达量低的情况下，crbn的表达量也随之降低，因此kdm5c能够作为crbn检测的靶点，通过检测体内kdm5c的表达量或分泌量，达到检测crbn含量的目的，并用于判断患者是否会对度胺类药物产生耐药性。

2、本发明的第一个目的是提供一种度胺类药物耐药性检测试剂盒，试剂盒中含有用于扩增赖氨酸特异性去甲基化酶kdm5c的引物。

3、进一步地，试剂盒中含有用于检测所述kdm5c表达量或分泌量的试剂。

4、进一步地，度胺类药物作用靶点e3连接酶crbn的表达量与所述kdm5c的表达量或分泌量正相关。

5、进一步地，度胺类药物为来那度胺、泊马度胺或沙利度胺。

6、进一步地，引物包括正向引物和反向引物。

7、进一步地，正向引物如seq id no.1所示，反向引物如seq id no.2所示。

8、进一步地，试剂盒中还包括用于pcr扩增的组件。

9、进一步地，kdm5c低表达时，耐药性高，度胺类药物治疗效果差；kdm5c高表达时，耐药性低，度胺类药物治疗效果好。

10、本发明的第二个目的是提供扩增赖氨酸特异性去甲基化酶kdm5c的引物在制备度胺类药物耐药性检测试剂盒中的应用。

11、本发明的第三个目的是提供一种用于检测e3泛素连接酶crbn的试剂盒。

12、进一步地，试剂盒以赖氨酸特异性去甲基化酶kdm5c为靶点，检测kdm5c的分泌量或表达量。

13、本发明的有益效果：

14、本发明从crbn的亲和质谱数据中发现kdm5c的多个短肽，首次发现赖氨酸特异性去甲基化酶kdm5c与crbn蛋白相互作用，降低kdm5c的表达能够使crbn的表达量也相应降低，导致以crbn作为靶点的度胺类药物出现耐药性强的情况。kdm5c能够作为crbn检测的靶点，通过检测体内kdm5c的表达量或分泌量，达到检测crbn含量的目的，检测操作简单快速，为预防或治疗患者对度胺类药物存在耐药性导致治疗效果差的问题提供了新的可能性。

技术特征：

1.一种度胺类药物耐药性检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒中含有用于扩增赖氨酸特异性去甲基化酶kdm5c的引物。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒中含有用于检测所述kdm5c表达量或分泌量的试剂。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述度胺类药物作用靶点e3连接酶crbn的表达量与所述kdm5c的表达量或分泌量正相关。

4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述度胺类药物为来那度胺、泊马度胺或沙利度胺。

5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述引物包括正向引物和反向引物，正向引物如seq id no.1所示，反向引物如seq id no.2所示。

6.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒中还包括用于pcr扩增的组件。

7.扩增赖氨酸特异性去甲基化酶kdm5c的引物在制备度胺类药物耐药性检测试剂盒中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：所述引物包括正向引物和反向引物，正向引物如seq id no.1所示，反向引物如seq id no.2所示。

9.一种用于检测e3泛素连接酶crbn的试剂盒，其特征在于：以赖氨酸特异性去甲基化酶kdm5c为靶点。

10.根据权利要求9所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒中含有用于检测所述kdm5c表达量或分泌量的试剂。

技术总结
本发明涉及一种度胺类药物耐药性检测试剂盒及其应用。本发明从CRBN的亲和质谱数据中发现KDM5C的多个短肽，首次发现赖氨酸特异性去甲基化酶KDM5C与CRBN蛋白的相互作用，并通过蛋白免疫共沉淀和免疫印迹法证实。降低KDM5C的表达能够使CRBN的表达量也相应降低，导致以CRBN作为靶点的度胺类药物出现耐药性强的情况，为改善由于对度胺类药物耐药性导致的治疗效果差的问题提供了新的可能性。

技术研发人员：周亮,邹露,许国强
受保护的技术使用者：苏州大学
技术研发日：
技术公布日：2024/2/6