一种来源于中华鳖白细胞介素26的短肽片段在制备抑菌剂中的应用

本发明属于生物，具体涉及一种来源于中华鳖白细胞介素26的短肽片段在制备抑菌剂中的应用。

背景技术：

1、水产品是优质蛋白质的重要来源，随着人口增加和城镇化进程，目前水产品的供应越来越多依赖养殖。水产养殖在保障粮食安全和改善居民膳食结构等方面发挥重要作用。然而，水产病害频繁发生长期困扰集约化和规模化养殖业的发展，已成为了水产养殖业的重要威胁。无乳链球菌又名b族链球菌(group b streptococcus，gbs)，为革兰氏阳性细菌，通常定殖于人类的生殖道和胃肠道，能够感染哺乳动物和鱼类等，特别是其感染罗非鱼脑等组织引起链球菌病，导致养殖罗非鱼大量死亡而造成经济损失。爱德华氏菌(edwardsiella sp.)为革兰氏阴性细菌，其中部分种类为人畜共患病原，在水产养殖中感染宿主范围较广，是危害较大的全球性水产养殖病害，其引起黄颡鱼、斑点叉尾鮰、牙鲆、大菱鲆、鳗鲡、鳜、中华鳖等的爱德华氏菌病，导致养殖动物出血性败血症，已成为相关品种养殖业发展的瓶颈。目前水产养殖业对于细菌病的防控依赖于抗生素和化学杀菌剂的使用，然而近年来抗生素的滥用给环境保护、食品安全、水产品出口等方面带来了诸多负面影响，特别是病原细菌对抗生素耐药性的提高给水产疾病防控带来新的挑战。因此，利用生物技术研制更加安全高效的抑菌剂或药物在生产中替代抗生素具有重要意义。

2、水产动物天然免疫系统在抗感染反应中发挥重要作用。其中，抗菌肽是一类具有抗菌等功能的活性多肽，其能够被病原诱导表达，是抗感染免疫反应中的重要效应分子。白细胞介素26属于ii型细胞因子，是白细胞介素10家族成员，其具有多阿尔法螺旋结构，主要参与机体抗细菌免疫反应及免疫细胞功能调节等。然而，在水生动物中白细胞介素26是否具有保守功能及作用机制并不清楚。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种来源于中华鳖白细胞介素26的短肽(psil26helixe)，所述短肽的氨基酸序列为seq id no.1所示。

2、本发明的另一个目的在于提供了一中华鳖白细胞介素26的短肽在制备细菌抑菌剂中的应用。

3、为了达到上述目的，本发明采取以下技术措施：

4、本发明主要采用了生物信息学技术方法，对中华鳖白细胞介素26蛋白序列及结构进行解析，对中华鳖白细胞介素26蛋白进行了有效截短，截短至16个氨基酸，对获得的短肽进行了人工合成，最终获得了具有抑菌功能的短肽psil26helixe，序列为seq id no.1所示。

5、本发明的保护范围包括：表达seq id no.1所示短肽的重组载体，所述的重组载体通过将编码seq id no.1所示短肽的基因插入表达载体中得到。

6、表达seq id no.1所示短肽的重组微生物，所述的重组微生物是将上述重组载体导入微生物中获得，所述的微生物包括细菌，真菌。

7、seq id no.1所示短肽、重组载体或重组微生物在制备细菌抑菌剂中的应用；

8、seq id no.1所示短肽、重组载体或重组微生物在制备治疗或预防致病菌感染的药物中的应用；

9、以上所述的应用，优选的，所述的致病菌包括：爱德华氏菌(e.piscicida)、无乳链球菌(s.agalactiae)、金黄色葡萄球菌(s.aureus)和/或大肠杆菌(e.coli)。

10、与现有技术相比，本发明具有以下优点：

11、在本发明中，申请人首次鉴定出中华鳖白细胞介素26参与抗菌活性的helix e(psil26helixe)功能结构域；首次发现psil26helixe通过人工合成后，在体外具有显著的直接抑菌活性。特别是对于治疗水产动物病原(爱德华氏菌、无乳链球菌等)引起的细菌性疾病中具有良好的应用前景。此外，所合成的psil26helixe仅由16个氨基酸组成，突破了脊椎动物白细胞介素26仅全长蛋白(约200个氨基酸)具有抗菌活性的认知，同时相较于全长蛋白，具有功能的活性短肽具有易吸收、活性强、便于合成等优点，更有利于应用推广和工业化生产。

技术特征：

1. 一种人工合成的短肽，所述短肽为seq id no.1所示。

2. 表达seq id no.1所示短肽的重组载体。

3. 表达seq id no.1所示短肽的重组微生物，所述的微生物包括细菌，真菌。

4.权利要求1所述的短肽、权利要求2所述的重组载体或权利要求3所述的重组微生物在制备细菌抑菌剂中的应用。

5. 根据权利要求4所述的应用，所述的细菌为爱德华氏菌（e. piscicida）、无乳链球菌（s. agalactiae）、金黄色葡萄球菌（s. aureus）和/或大肠杆菌（e. coli）。

6.权利要求1所述的短肽、权利要求2所述的重组载体或权利要求3所述的重组微生物在制备治疗或预防致病菌感染的药物中的应用。

7. 根据权利要求6所述的应用，所述的致病菌为：爱德华氏菌（e. piscicida）、无乳链球菌（s. agalactiae）、金黄色葡萄球菌（s. aureus）和/或大肠杆菌（e. coli）。

技术总结
本发明属于生物技术领域，公开了一种来源于中华鳖白细胞介素26的短肽片段在制备抑菌剂中的应用。所述的短肽为SEQ ID NO.1所示，通过抑菌实验发现PSIL26helixE对革兰氏阳性细菌，包括金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）和无乳链球菌（Streptococcus agalactiae），以及革兰氏阴性细菌大肠杆菌（Escherichia coli）和杀鱼爱德华氏菌（Edwardsiella piscicida）均具有良好的抑制效果，因此，人工合成PSIL26helixE在治疗水产动物由无乳链球菌和杀鱼爱德华氏菌引起的细菌性疾病治疗中具有潜在的应用前景。

技术研发人员：陈善楠,聂品,霍慧君,李楠
受保护的技术使用者：中国科学院水生生物研究所
技术研发日：
技术公布日：2024/2/21