检测HCV核心抗原core的杂交瘤细胞GE1及其应用的制作方法

本发明涉及检测领域，具体涉及检测hcv核心抗原core的杂交瘤细胞，还涉及由该杂交瘤细胞分泌的抗体，以及在检测hcv核心抗原core中的应用。

背景技术：

1、丙型肝炎(hepatitis c)是由丙型肝炎病毒(hcv)感染导致的一种肝脏疾病，人群普遍易感，80％的急性丙型肝炎患者会转为慢性感染，10～20％的慢性患者会发展为肝硬化、肝癌。全球大约有1.5亿人感染丙型肝炎病毒,每年约39.9万人死于丙型肝炎以及相关的肝硬化和肝癌。我国属丙型肝炎高发地区，主要以hcv1b亚型感染为主，整体发病率呈现上升趋势。目前对于丙型肝炎的治疗，多为采用抗病毒药物，特别是新药司美匹韦(simeprevir)、索非布韦(sofosbuvir)的使用，显著提高了治疗效果，但新药费用较高，且有一定的毒副作用，限制其进一步推广使用。因此，开发新的hcv检测技术，特别是对hcv感染者早期及时诊断和治疗就十分重要。

2、抗-hcv抗体检测方法是最早确立的实验室诊断方法，目前已广泛用于临床诊断和无症状人群筛查。hcv抗体检测经历4次技术换代，第1～3代均是hcv抗原包被微孔板，辅以酶标鼠抗人igg单克隆抗体进行检测，而第4代检测技术使用hcv ns3/ns4双抗原夹心elisa进行检测，灵敏度和检出时间都有一定程度的改善。虽然抗-hcv抗体检测经济便捷、应用广泛，但抗体检测存在较长的“窗口期”，即在hcv感染后1-2个月的时间里，感染者体内不能及时产生足以检测的特异抗体量，而此时的血液具有传染性。另外，hcv抗体检测无法区分患者处于急性、慢性和既往感染，也无法对临床疗效进行监测。

3、hcv核心抗原core作为丙型肝炎早期感染特异诊断指标，其相关研究近年来得到特别关注和快速发展。hcv core位于多聚蛋白前体的n端，由191个氨基酸组成，分子量大小在21kda左右。与其它结构蛋白和非结构蛋白相比，核心蛋白在不同hcv病毒株间氨基酸序列保守，加工成熟后无糖基化位点，抗原性强，是hcv感染检测的良好标志蛋白。另外，hcvcore血清转化时间要先于hcv抗体2-8周，与hcv rna血清转化时间基本一致，因此是hcv早期感染的重要诊断靶点。但目前市面上还缺乏特异灵敏的国产hcv核心抗原单克隆抗体，这对hcv核心抗原core的免疫快速诊断试剂国产化开发带来一定困难。因此，开发优质的hcvcore抗原单克隆抗体具有重要的市场价值和临床意义。

技术实现思路

1、有鉴于此，本发明的目的之一在于提供一种检测hcv核心抗原core的杂交瘤细胞；本发明的目的之二在于提供杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体ge1；本发明的目的之三在于提供所述单克隆抗体ge1在制备检测检测hcv核心抗原core的检测试剂中的应用；本发明的目的之四在于提供含有所述单克隆抗体ge1的检测试剂。

2、为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：

3、1、检测hcv核心抗原core的杂交瘤细胞，所述杂交瘤细胞保藏编号为gdmcc no：63837，保藏日期为2023年09月26日，保藏单位为广东省微生物菌种保藏中心。

4、2、所述杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体ge1。

5、3、所述单克隆抗体ge1在制备检测hcv核心抗原core的检测试剂中的应用。

6、本发明优选的，所述检测试剂的检测原理为胶体金法、免疫荧光层析法、酶联免疫法或化学发光法。

7、4、含有所述单克隆抗体ge1的检测试剂。

8、本发明优选的，所述检测试剂为western blot试剂。

9、本发明优选的，所述检测试剂包括单克隆抗体ge1和hrp标记羊抗鼠igg。

10、本发明的有益效果在于：本发明公开了检测hcv核心抗原core的杂交瘤细胞，还公开了由该杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体ge1，分泌的抗体能够用于hcv核心抗原core检测，可检测到hcv核心抗原core，且对其他hcv抗原和其他病毒蛋白不呈现交叉反应，特异性好；按1：1000稀释，仍能检测到hcv核心抗原core，说明抗体ge1有良好的检测灵敏度，为hcv核心抗原core的检测提供了新的工具。

11、本发明受重庆市自然科学基金项目资助，项目名称：基于量子点标记技术对丙型肝炎早期感染高灵敏快速检测研究，项目编号：cstc2021jcyj-msxmx0198。

12、生物材料保藏

13、本发明的balb/c小鼠杂交瘤细胞hcv core抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株ge1保藏于广东省微生物菌种保藏中心，地址位于广州市先烈中路100号大院59号楼5楼广东省科学院微生物研究所，其保藏编号为gdmcc no：63837，保藏日期为2023年09月26日，分类命名为babl/c小鼠杂交瘤细胞。

14、本发明的balb/c小鼠杂交瘤细胞hcv core抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株df2保藏于广东省微生物菌种保藏中心，地址位于广州市先烈中路100号大院59号楼5楼广东省科学院微生物研究所，其保藏编号为gdmcc no：63836，保藏日期为2023年09月26日，分类命名为balb/c小鼠杂交瘤细胞。

技术特征：

1.检测hcv核心抗原core的杂交瘤细胞，其特征在于：所述杂交瘤细胞保藏编号为gdmcc no：63837，保藏日期为2023年09月26日，保藏单位为广东省微生物菌种保藏中心。

2.权利要求1所述杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体ge1。

3.权利要求2所述单克隆抗体ge1在制备检测hcv核心抗原core检测试剂中的应用。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述检测试剂的检测原理为胶体金法、免疫荧光层析法、酶联免疫法或化学发光法。

5.含有权利要求2所述单克隆抗体ge1的检测试剂。

6.根据权利要求5所述的检测试剂，其特征在于：所述检测试剂为western blot试剂。

7.根据权利要求6所述的检测试剂，其特征在于：所述检测试剂包括单克隆抗体ge1和hrp标记羊抗鼠igg。

技术总结
本发明公开了检测HCV核心抗原core的杂交瘤细胞GE1及单抗和应用，杂交瘤细胞保藏编号为GDMCC No：63837，保藏日期为2023年09月26日，保藏单位为广东省微生物菌种保藏中心，该杂交瘤细胞能够分泌单克隆抗体GE1，用于HCV核心抗原core的检测，具有特异性好和灵敏度高的优点，因此可作为检测HCV核心抗原core的检测试剂。

技术研发人员：张娟,袁作为,黄艺丹,申波,董子鹤,周芳竹
受保护的技术使用者：重庆奥创生物技术有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/2/19