调控辣椒红素合成酶基因的转录因子WRKY6及应用

本申请涉及辣椒红素的生物合成调控，具体涉及调控辣椒红素合成酶基因的转录因子wrky6及应用。

背景技术：

1、辣椒红素(capsanthin)是一种天然有机化合物，分子式为c40h56o3，辣椒红素普遍存在于辣椒果实组织中，属于四萜类衍生物，是一种深胭脂红色针状晶体。辣椒红素作为一种纯天然植物色素，具有色泽鲜艳、色价高、着色力强、保色效果好和安全性高的特点，在食品、医药、化妆品等领域广泛应用。其经济价值十分可观，在国内外的需求紧俏。

2、辣椒红素是辣椒中的主要类胡萝卜素之一，成熟辣椒果实的颜色主要取决于辣椒红素和辣椒玉红素的积累。辣椒红素是红色辣椒果实中类胡萝卜素生物合成途径中的代谢终产物，其生物合成从牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸(ggpp)开始，在八氢番茄红素合成酶(psy)的催化下将2分子的ggpp转化生成八氢番茄红素，进一步经过一系列的脱氢和异构化步骤，被氧化成番茄红素。在辣椒中，番茄红素经过lcye、lcyb、bch、zep和ccs一系列酶和氧气的共同参与下，最终将番茄红素转化形成辣椒红素和辣椒玉红素。

3、目前，尽管辣椒红素的合成途径已基本明确，但是其合成过程中关键酶基因(如ccs)的调控机制仍不清楚，而现有技术中仍缺乏通过干预ccs基因调控来选育高辣椒红素含量品种的方法。

技术实现思路

1、本申请实施例发现了一种能够作用于辣椒红素合成酶基因ccs启动子的转录因子wrky6，从而为选育高辣椒红素含量的辣椒品种提供了技术支持。

2、为此，本申请实施例至少公开了以下技术方案：

3、第一方面，实施例提供了一种调控辣椒红素合成酶基因的转录因子wrky6，所述转录因子wrky6的氨基酸序列如seq id no.1所示。

4、第二方面，实施例提供了一种dna，所述dna的核苷酸序列如seq id no.2所示，所述dna编码前述转录因子wrky6。

5、第三方面，实施例提供了含有前述dna的重组载体。

6、第四方面，实施例提供了前述重组载体的制备方法，其包括：以前述dna为模板，并进行扩增，获得dna序列；将所述dna的序列重组入线性化的pgadt7载体中，获得pgadt7-cawrky6载体，即所述重组载体。

7、第四方面，本申请实施例提供了含有前述重组载体的宿主微生物。

8、第六方面，本申请实施例提供了一种提高辣椒红素含量的方法，其包括将编码前述dna编码到辣椒中的步骤。

9、第七方面，本申请实施例提供了一种选育高含量辣椒红素辣椒的方法，其包括选育能提高前述转录因子wrky6含量的辣椒的步骤。

10、第八方面，本申请实施例提供了前述转录因子wrky6或前述dna或前述重组载体或前述方法在调节辣椒红素合成中的应用。

技术特征：

1.一种调控辣椒红素合成酶基因的转录因子wrky6，其氨基酸序列如seq id no.1所示。

2.一种dna，其核苷酸序列如seq id no.2所示，所述dna编码如权利要求1所述的转录因子wrky6。

3.一种含有权利要求2所述dna的重组载体。

4.根据权利要求3所述的重组载体，所述重组载体为重组质粒。

5.权利要求3所述重组载体的构建方法，其包括：

6.一种含有权利要求3所述重组载体的宿主微生物。

7.一种提高辣椒红素含量的方法，其包括将权利要求2所述dna编码到辣椒中的步骤。

8.根据权利要求7所述的方法，还包括将过表达如seq id no.2所示的dna的表达载体于辣椒中表达转录因子wrky6的步骤。

9.一种选育高含量辣椒红素辣椒的方法，所述方法包括选育能提高权利要求1所述转录因子wrky6含量的辣椒的步骤；可选地，所述方法包括选育通过基因工程手段构建的过表达权利要求1所述转录因子wrky6的辣椒的步骤。

10.权利要求1所述转录因子wrky6或权利要求2所述dna或权利要求3～4任一所述重组载体或权利要求7～8任一所述方法在调节辣椒红素合成中的应用。

技术总结
本申请涉及辣椒红素的生物合成调控技术领域，具体涉及调控辣椒红素合成酶基因的转录因子WRKY6及应用。实施例发现WRKY6与辣椒红素合成酶(CCS)基因在高红素材料GB23中具有相同的表达模式。实施例证明了WRKY6能够与CCS基因的启动子结合并激活基因的表达。实施例发现WRKY6表达量的下降能够显著降低辣椒果实中CCS基因的表达及辣椒红素的含量，WRKY6作为CCS基因的调控因子能够正调控辣椒红素的合成。实施例提供的WRKY6能够与辣椒红素合成酶基因CCS的启动子结合，并正向调控辣椒红素的合成。

技术研发人员：欧阳波,唐亚萍,杨生保,甘宇枫,张国儒,沈心彦,石春美,卢永恩,邓萱
受保护的技术使用者：华中农业大学
技术研发日：
技术公布日：2024/2/1