一种动物双歧杆菌及其应用的制作方法

本发明属于微生物，具体涉及一种动物双歧杆菌及其应用。

背景技术：

1、肠道和人类的健康息息相关。它是人体重要的消化吸收场所，营养物质在这里被吸收运往全身，并排出身体代谢产生的毒素和垃圾。肠道也是人体最大的免疫器官，肠道的淋巴组织中分布着人体大部分的免疫细胞，抵抗着外来入侵的细菌和病毒。据世界卫生组织统计，肠胃疾病对人类的威胁触目惊心：全球每年死于肠胃疾病的人数在1000万以上，中国有1/5的人口患有肠胃疾病，居世界首位。

2、人类的胃肠内有数万亿个微生物，包括细菌、真菌和病毒。它们大多分布在大肠中，数量大致与全身的细胞数相当。在人体肠道细菌中，有10%到20%的细菌是与他人相同的。微生物群影响着人的健康和食欲、体重和心情。近年来，大量益生菌被发现对肠道健康具有好处，它们被用来预防或治疗炎性肠道疾病、肠道易激综合症甚至孤独症等。

3、多种肠道疾病都表现出炎性症状、粘膜层受损、腹泻或便秘，并以腹泻更为多见。放化疗引起的肠损伤是肠道损伤中较为严重的类型，其中化疗药物引起的腹泻（也称化疗相关性腹泻，cid）对患者影响较大，轻则影响患者生活质量，重则导致肿瘤治疗方案中断，更严重的还会导致患者脱水、感染、休克甚至死亡。化疗药物5-氟尿嘧啶(5-fu)和伊立替康（irinotecan , cpt-11）引起的腹泻发生率最高，可达80%。

4、益生菌维护胃肠道健康已经有较长的使用历史，其优点在于安全性较高，比如妈咪爱（枯草杆菌二联活菌）、益菌康（复方嗜酸乳杆菌）、整肠生（地衣芽孢杆菌活菌）、培菲康（双歧杆菌三联活菌）、金双歧（双歧杆菌乳杆菌三联活菌）等。joanne m bowen等人（ cancer  biology&therapy, 2007, 6(9): 1445-1450）在伊立替康介导的大鼠腹泻模型中证实了含有8株菌的vsl#3可以有效预防伊立替康化疗后的严重腹泻。应用广泛的明星菌株lgg可降低与5-fu化疗相关的严重腹泻和腹部不适（ british journal of cancer, 2007, 97(8):  1028-1034）。zhongyue ren等（ pharmacological research, 2022, 184: 106406）发现了一株动物双歧杆菌乳亚种菌株sf可以增强cpt-11的抗肿瘤活性并降低毒副作用。专利cn110938572b公开了一种含有植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、动物双歧杆菌和嗜酸乳杆菌的益生菌组合物，及其在减轻鼻咽癌放化疗副作用口腔粘膜炎中的用途。但迄今为止仍缺少能够有效预防/治疗化疗相关性腹泻的益生菌产品。

技术实现思路

1、本发明针对现有研究仍存在的不足，提供了一种能够改善受试者肠道不适症状，特别是腹泻症状的益生菌解决方案。

2、首先，本发明提供了一种动物双歧杆菌（ bifidobacterium animalis）菌株，所述菌株选自保藏号为cctcc no:m 20231933的动物双歧杆菌banim-1。

3、在一些具体实施方式中，所述菌株的16s rdna序列如seq id no.1所示，且所述菌株具有可编码序列如seq id no.2所示的产乙酸相关酶、seq id no.3所示的产丙酸相关酶的基因。

4、其次，本发明还提供了前述动物双歧杆菌（bifidobacterium animalis）菌株的培养方法，所述方法包括将所述动物双歧杆菌菌株接种至培养基，进行增殖培养，得到增殖的动物双歧杆菌菌株。

5、再次，本发明还提供了一种食品、保健品或药物组合物，其含有前述的动物双歧杆菌（bifidobacterium animalis）菌株，或含有通过前述的培养方法得到的动物双歧杆菌（bifidobacterium animalis）菌株。

6、在一些具体实施方式中，所述组合物中，动物双歧杆菌（bifidobacteriumanimalis）菌株作为唯一活性成分。

7、在一些具体实施方式中，将所述食品、保健品或药物组合物制备成单个制剂。

8、在一些具体实施方式中，所述单个制剂中含有102~1015 cfu的动物双歧杆菌（bifidobacterium animalis）菌株。

9、最后，本发明还提供了前述动物双歧杆菌（bifidobacterium animalis）菌株在制备微生态制剂中的应用，所述微生态制剂用于改善受试者的肠道健康状况，或治疗/预防腹泻和/或抑制肠道病原菌的繁殖。

10、在一些具体实施方式中，所述腹泻为化疗相关性腹泻。

11、在一些具体实施方式中，所述化疗相关性腹泻是活性成分选自如下一种或其组合引起的腹泻：5-氟尿嘧啶、替加氟、5'-2'-脱氧尿苷、卡培他滨、替吉奥、紫杉醇、多西他赛、长春瑞滨、顺铂、卡铂、奈达铂、奥沙利铂、洛铂、环磷酰胺、异环磷酰胺、美法仑、卡莫司汀、伊立替康。

12、在一些具体实施方式中，所述病原菌选自铜绿假单胞菌、志贺氏菌、小肠结肠炎耶尔森菌和副溶血性弧菌中的一种或其组合。

13、本发明的动物双歧杆菌具有如下特点：

14、1）无毒力因子、非溶血，具有较好的安全性；

15、2）抑制多种致病菌，调节肠道菌群，抑制致病菌生长；

16、3）抑制肠道促炎因子的表达，减轻肠道炎症反应；

17、4）在腹泻总分指标中相比模型组动物有显著改善，与阳性对照洛哌丁胺效果相当，而且不存在抑制胃肠道蠕动等的副作用，能满足肿瘤患者需要长期服用的需求。

18、本发明的菌株保藏信息如下：

19、菌株名称：动物双歧杆菌（ bifidobacterium animalis）banim-1

20、保藏日期：2023年10月18日

21、保藏单位：中国典型培养物保藏中心（china center for type culturecollection，cctcc），地址：湖北省武汉市武汉大学，邮编：430072，电话：027-68754052

22、保藏编号：cctcc no:m 20231933。

技术特征：

1.一种动物双歧杆菌（bifidobacterium animalis）菌株，所述菌株选自保藏号为cctcc no:m 20231933的动物双歧杆菌banim-1。

2.根据权利要求1所述的动物双歧杆菌（bifidobacterium animalis）菌株，其特征在于，所述菌株的16s rdna序列如seq id no.1所示，且所述菌株具有可编码序列如seq idno.2所示的产乙酸相关酶、seq id no.3所示的产丙酸相关酶的基因。

3.如权利要求1或2所述的动物双歧杆菌（bifidobacterium animalis）菌株的培养方法，其特征在于，将所述动物双歧杆菌菌株接种至培养基，进行增殖培养，得到增殖的动物双歧杆菌菌株。

4.一种食品、保健品或药物组合物，含有权利要求1或2所述的动物双歧杆菌（bifidobacterium animalis）菌株，或含有通过权利要求3所述的培养方法得到的动物双歧杆菌（bifidobacterium animalis）菌株。

5.根据权利要求4所述的组合物，其特征在于，所述动物双歧杆菌（bifidobacteriumanimalis）菌株作为唯一活性成分。

6.根据权利要求4所述的组合物，其特征在于，组合物的单个制剂中含有102~1015 cfu的动物双歧杆菌（bifidobacterium animalis）菌株。

7.权利要求1或2所述的动物双歧杆菌（bifidobacterium animalis）菌株在制备微生态制剂中的应用，所述微生态制剂用于改善受试者的肠道健康状况，或治疗/预防腹泻和/或抑制肠道病原菌的繁殖。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述腹泻为化疗相关性腹泻。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述化疗相关性腹泻是活性成分选自如下一种或其组合引起的腹泻：5-氟尿嘧啶、替加氟、5'-2'-脱氧尿苷、卡培他滨、替吉奥、紫杉醇、多西他赛、长春瑞滨、顺铂、卡铂、奈达铂、奥沙利铂、洛铂、环磷酰胺、异环磷酰胺、美法仑、卡莫司汀、伊立替康。

10.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述病原菌选自铜绿假单胞菌、志贺氏菌、小肠结肠炎耶尔森菌和副溶血性弧菌中的一种或其组合。

技术总结
本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种动物双歧杆菌及其应用。所述动物双歧杆菌Banim‑1选自保藏号为CCTCC NO:M 20231933的动物双歧杆菌Banim‑1，该菌株较为安全，能抑制多种致病菌、抑制促炎因子表达和改善腹泻，具有改善个体胃肠道功能以及预防/治疗腹泻的潜力。

技术研发人员：李璟欣,张旭朏,高翔,吴佳静,王琼,郭亚鹏
受保护的技术使用者：四川厌氧生物科技有限责任公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/5