本发明属于生物科技，具体涉及一种核桃糖肽的制备方法。
背景技术：
1、核桃（juglans regia）系胡桃科核桃属植物，又名胡桃、羌果，与扁桃、腰果、榛子并列为世界四大干果，原产于欧洲东南部、东亚及北美地区，是人类种植最古老的树生坚果之一。核桃有补气养血，润燥痰，益命门等功效，同时，也是一种高能食品，每100g核桃仁可提供6.31kcal能量，其蛋白质和脂肪占整个核桃仁重量80%以上，其中蛋白质占16.5%左右，脂类占65%左右。
2、核桃油作为一种最好的保健用油逐渐被消费者认可。然而长期以来人们只重视核桃油的保健价值和研究而忽视了核桃粕的利用和研究。核桃粕是核桃压榨制油的副产品，其含有大量的蛋白质和膳食纤维等营养物质，是一种良好的食品原料。核桃粕通过发酵法、酶法等方法制备得到的核桃多肽，相比于核桃蛋白具有更好的溶解性、吸湿性、乳化性、发泡性、热处理和胃肠消化的稳定性，还具有易吸收、无毒等优良特性。
3、核桃多肽作为一种新型核桃深加工产品，具有广阔的应用前景及市场潜力。目前，研究者对利用核桃粕进行核桃多肽的合成工艺进行了多方面的探索。例如，吕名蕊等通过将脱脂核桃粕加适量纯水调配，运用单酶或复合蛋白酶对核桃粕进行酶解，制备得到了核桃多肽。刘润民，魏冰等采用碱水解萃取二次，分离液相，盐酸沉淀制取核桃蛋白质，核桃蛋白加纯水调配，加蛋白酶酶解，酶解液分离、精制、浓缩、灭菌、喷雾干燥得核桃肽产品，核桃肽得率为15%，粗蛋白含量78.85%，分子量小于3000da，肽占98%。王瑞、周鸣翔等研究确定了酶法水解提取核桃多肽的最佳工艺条件为底物质量浓度2-3%，温度51℃，时间5.2h，ph6.5h，在此条件下多肽得率为45%。
4、由于核桃粕中含有40%以上的糖类，其中大部分为低聚糖，该部分多糖具有较好的生物功效。然而，目前在利用核桃粕生产核桃多肽时，制得的产品主要包含低聚肽，将这部分多糖作为废弃物排放，既浪费资源，又污染环境，且制得的产品色泽较差，收率较低。
5、因此，亟需开发一种能够改善核桃糖肽色泽及收率的制备方法。
技术实现思路
1、有鉴于此，本发明的目的在于提供一种核桃糖肽的制备方法，所述核桃糖肽为低聚肽和低聚糖的复合物，该方法能够有效改善核桃糖肽的色泽及提高核桃糖肽的收率，有利于实现核桃糖肽的产业化生产。
2、本发明解决其技术问题所采用的技术方案如下：
3、一种核桃糖肽的制备方法，包括如下步骤：
4、（1）将核桃粕粉加入乙醇溶液进行搅拌，以提取核桃粕中的酚醛复合物，过滤，得到去除酚醛复合物的核桃粕粉；
5、（2）将所述去除酚醛复合物的核桃粕粉进行高压均质处理，使核桃粕中的蛋白质游离出来，得到均质液；
6、（3）将所述均质液进行热处理，以增加蛋白质的溶解度，得到热处理液；
7、（4）将所述热处理液加入复合蛋白酶进行酶解，升温进行灭酶后，过滤，得到酶解液，酶解液经精制、脱盐、浓缩、除菌、喷雾干燥，得到核桃糖肽。优选的，所述步骤（1）中，所述核桃粕粉制备过程为：将去衣核桃仁进行低温冷榨，取副产物核桃粕进行亚临界萃取残油，得到残油含量＜1%的核桃粕，将其粉碎后过40-80目筛，即得到蛋白质含量为55%、总糖含量为40%的核桃粕粉。
8、优选的，所述步骤（1）中，所述核桃粕粉和乙醇溶液的料液比为：1:5-20，搅拌温度为50℃-80℃，搅拌时间为20min-100min。
9、优选的，所述乙醇溶液的浓度为50%-90%，ph为4.0-6.0。
10、优选的，所述步骤（2）中，高压均质处理具体为：将去除酚醛复合物的核桃粕用纯水调配至底物浓度为5%-20%，采用高压均质机在压力40mpa-150mpa下进行均质，得均质液。
11、优选的，所述步骤（3）中均质液热处理具体为：将均质液加热至45℃-70℃，用浓度为11.5%的naoh溶液调节ph至8.5-11.5，搅拌处理20min-100min。
12、优选的，所述步骤（4）中热处理液进行酶解前，先降温至45℃-55℃，调节ph至9.0-9.5，然后加入复合蛋白酶进行酶解3-6h，调节料液ph至6.0-7.0，最后再升温至85℃进行15min灭酶，得到酶解产物。
13、优选的，所述复合蛋白酶的加入量占核桃粕蛋白质总量的1%-5%。
14、优选的，所述复合蛋白酶包括以下重量百分比的组分：碱性蛋白酶 40%-70%，中性蛋白酶20%-60%，木瓜蛋白酶10%-30%，风味酶1%-10%。
15、优选的，所述碱性蛋白酶选用诺维信alcalase 2.4l，酶活为2.4au/g；中性蛋白酶选用1398中性蛋白酶，酶活为10万u/g；木瓜蛋白酶的酶活为60万u/g。
16、由上述技术方案可知，本发明提供了一种核桃糖肽的制备方法，相比现有技术其有益效果是：本发明通过在核桃粕粉中加入乙醇溶液，利用乙醇溶液溶解核桃粕中的酚醛复合物，使酚醛复合物与蛋白质分离，制备得到的核桃糖肽为正常的类白色，而不是灰色，色泽较好。同时，本发明通过对去除酚醛复合物的核桃粕粉进行高压均质处理，以切断核桃粕中蛋白质和糖及纤维素的连接，使蛋白质尽可能的游离出来，然后再对均质液进行热处理，使蛋白质中难溶于水且含量高达70%的谷蛋白最大限度溶于水，以便被复合蛋白酶酶解，最后通过筛选核桃粕蛋白质酶解的最佳复合蛋白酶对热处理液进行酶解，以提高核桃蛋白的水解效率，进而提高了核桃糖肽的收率。采用该方法制备得到的核桃糖肽色泽好，收率≥70%，有利于实现核桃糖肽的产业化生产。
1.一种核桃糖肽的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：
2.如权利要求1所述的一种核桃糖肽的制备方法，其特征在于：所述步骤（1）中，所述核桃粕粉制备过程为：将去衣核桃仁进行低温冷榨，取副产物核桃粕进行亚临界萃取残油，得到残油含量＜1%的核桃粕，将其粉碎后过40-80目筛，即得到蛋白质含量为55%、总糖含量为40%的核桃粕粉。
3.如权利要求1所述的一种核桃糖肽的制备方法，其特征在于：所述步骤（1）中，所述核桃粕粉和乙醇溶液的料液比为：1:5-20，搅拌温度为50℃-80℃，搅拌时间为20min-100min。
4.如权利要求3所述的一种核桃糖肽的制备方法，其特征在于：所述乙醇溶液的浓度为50%-90%，ph为4.0-6.0。
5.如权利要求1所述的一种核桃糖肽的制备方法，其特征在于：所述步骤（2）中，高压均质处理具体为：将去除酚醛复合物的核桃粕粉用纯水调配至底物浓度为5%-20%，采用高压均质机在压力40mpa-150mpa下进行均质，得均质液。
6.如权利要求1所述的一种核桃糖肽的制备方法，其特征在于：所述步骤（3）中均质液热处理具体为：将均质液加热至45℃-70℃，用浓度为11.5%的naoh溶液调节ph至8.5-11.5，搅拌处理20min-100min。
7.如权利要求1所述的一种核桃糖肽的制备方法，其特征在于：所述步骤（4）中热处理液进行酶解前，先降温至45℃-55℃，调节ph至9.0-9.5，然后加入复合蛋白酶进行酶解3-6h，调节料液ph至6.0-7.0，最后再升温至85℃进行15min灭酶，得到酶解产物。
8.如权利要求1所述的一种核桃糖肽的制备方法，其特征在于：所述复合蛋白酶的加入量占核桃粕蛋白质总量的1%-5%。
9. 如权利要求8所述的一种核桃糖肽的制备方法，其特征在于：所述复合蛋白酶包括以下重量百分比的组分：碱性蛋白酶 40%-70%，中性蛋白酶20%-60%，木瓜蛋白酶10%-30%，风味酶1%-10%。
10. 如权利要求9所述的一种核桃糖肽的制备方法，其特征在于：所述碱性蛋白酶选用诺维信alcalase 2.4l，酶活为2.4au/g；中性蛋白酶选用1398中性蛋白酶，酶活为10万u/g；木瓜蛋白酶的酶活为60万u/g。