植物内生普里斯特氏菌、利用其制备的微生物菌剂及应用

本发明涉及微生物菌种及其应用，特别是指植物内生普里斯特氏菌、利用其制备的微生物菌剂及应用。

背景技术：

1、番茄是我国北方设施栽培蔬菜的主要种类之一，是一种喜温性蔬菜作物，低温胁迫是影响其产量和品质的主要障碍因子。目前国内外针对提高植物抗冷性的方法主要有三种：培育耐低温品种，低温锻炼以及化学试剂处理，传统的育种途径可以培育出优良的耐低温品种，如荷兰专家培育出可耐2℃～3℃低温的番茄品种“富尤109”，我国选育出的耐低温品种“草莓番茄”、“普罗旺斯”等，但所需的时间较长；低温锻炼有针对性，需要针对植物自身的生理生化变化进行处理，所需时间较长且效果不稳定；化学试剂虽见效快，但是这些化学分子残留对蔬菜和环境造成潜在威胁，研发绿色环保的防控技术以缓解低温对设施番茄的伤害，对于高产优质番茄的生产极为重要。近年来，随着人们对资源环境和食品质量要求的提高，有益微生物在生态绿色农业中发挥着越来越重要的作用，微生物提高植物耐冷性已成为新的研究热点。

2、公开号为cn116463242a的发明专利申请中公开了一株多粘类芽孢杆菌(paenibacillus polymyxa)x-11，保藏编号为cgmcc no.20476，该菌种能促进番茄种子萌发，胚根伸长，且其促生的最佳浓度因番茄品种不同而存在差异，且多粘类芽孢杆菌x-11浓度过高会抑制种子萌发和胚根伸长，多粘类芽孢杆菌x-11同时可诱导番茄叶片pal活性提高，并且诱导效果比多菌灵好。对番茄抗冷性的冷害调查结果表明，多粘类芽孢杆菌x-11处理的病情指数均显著低于对照，申请人未发现植物内生普里斯特氏菌能够对于番茄促生及耐冷的专利文献报道。

技术实现思路

1、本发明的目的之一是提供一种对番茄具有促生效果且可提高其抗冷性功能的植物内生普里斯特氏菌(priestia endophytica)cgmcc no.29318。

2、本发明中的菌种从具有耐冷性的番茄根系分离得到。该菌株于2023年12月15日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，分类名为植物内生普里斯特氏菌(priestia endophytica)，保藏编号为cgmcc no.29318，保藏机构的地址位于北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所(简称cgmcc)。

3、该菌种的菌落形态及生理生化特性如下：

4、该菌种的菌落呈圆形，边缘不光滑，乳白色，不透明，可以合成铁载体，产生生长素(iaa)和1-氨基环丙烷基-1-羧酸脱氨酶(accd)，有固氮能力。与priestia endophyticastrain s2-11相似性100％。

5、本发明的目的之二是提供含有植物内生普里斯特氏菌(priestia endo phytica)cgmcc no.29318的微生物菌剂。

6、本发明的目的之三是提供含有植物内生普里斯特氏菌(priestia endo phytica)cgmcc no.29318，含有其的发酵液、微生物菌剂在促进植物生长中的应用，所述的植物为番茄。

7、本发明的目的之四是提供含有植物内生普里斯特氏菌(priestia endo phytica)cgmcc no.29318，含有其的发酵液、微生物菌剂在提高植物抗冷性中的应用，所述的植物为番茄。

8、具体地，所述的含有植物内生普里斯特氏菌是将拉丁文名称为priestiaendophytica，保藏编号为cgmcc no.29318的植物内生普里斯特氏菌接种于灭菌后且含有碳源、氮源及无机盐的培养基中通气培养后获得。

9、具体地，培养基选用灭菌后的lb培养基。

10、该菌种的培养条件为：

11、1、斜面菌种培养：将该菌株接入试管斜面，培养温度为25℃～32℃，ph＝7.0～7.2，培养时间1～3天。

12、2、摇瓶培养：将斜面菌种接种到装有lb培养基的三角瓶中，在温度为25℃～32℃、ph＝7.0～7.2、转速180～220转/分钟的条件下培养24～60小时，使菌数达到2×108cfu/ml。

13、本发明所取得的实质性特点和显著的技术进步在于：

14、本发明筛选方法获得了一株拉丁文名称为priestia endophytica，保藏编号为cgmcc no.29318的植物内生普里斯特氏菌，经申请人实验证实，该菌种可以合成铁载体，产生生长素(iaa)和1-氨基环丙烷基-1-羧酸脱氨酶(accd)，有固氮能力。应用于番茄生产上，能提高番茄植株的株高和叶面积，具有更好的促生效果；从番茄株高、生物量、保护性物质的积累、抗氧化酶活力、叶绿素含量和光合参数等方面发现可显著提高番茄的抗冷性。

15、本发明中的菌种于2023年12月15日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，分类名为植物内生普里斯特氏菌(priestia endoph ytica)，保藏编号为cgmcc no.29318，保藏机构的地址位于北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所(简称cgmcc)。

技术特征：

1.植物内生普里斯特氏菌，其拉丁文名称为priestia endophytica，保藏编号为cgmccno.29318。

2.含有权利要求1所述的拉丁文名称为priestia endophytica，保藏编号为cgmccno.29318的植物内生普里斯特氏菌的微生物菌剂。

3.如含有权利要求1所述的拉丁文名称为priestia endophytica，保藏编号为cgmccno.29318的植物内生普里斯特氏菌或含有其的发酵液或权利要求2所述的微生物菌剂在促进植物生长中的应用，所述的植物为番茄。

4.如含有权利要求1所述的拉丁文名称为priestia endophytica，保藏编号为cgmccno.29318的植物内生普里斯特氏菌或含有其的发酵液或权利要求2所述的微生物菌剂在提高植物抗冷性中的应用，所述的植物为番茄。

5.根据权利要求3或4所述的应用，其特征在于所述的含有植物内生普里斯特氏菌是将拉丁文名称为priestia endophytica，保藏编号为cgmccno.29318的植物内生普里斯特氏菌接种于灭菌后且含有碳源、氮源及无机盐的培养基中通气培养后获得。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于所述的培养基选用lb培养基。

7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于菌种的培养条件包括如下步骤：

技术总结
本发明涉及微生物菌种及其应用，特别是指植物内生普里斯特氏菌、利用其制备的微生物菌剂及应用。本发明提供了一株具有对番茄具有促生效果且可提高其抗冷性功能的植物内生普里斯特氏菌(Priestia endophytica)CGMCC No.29318，该菌株可以合成铁载体，产生生长素(IAA)和1‑氨基环丙烷基‑1‑羧酸脱氨酶(ACCD)，有固氮能力。利用该菌株制成的微生物菌剂或发酵液应用于番茄生产上能提高番茄植株的株高和叶面积，具有更好的促生效果；从番茄株高、生物量、保护性物质的积累、抗氧化酶活力、叶绿素含量和光合参数等方面可显著提高番茄的抗冷性。

技术研发人员：马佳,胡栋,王旭,彭杰丽,贾楠,王占武
受保护的技术使用者：河北省农林科学院农业资源环境研究所
技术研发日：
技术公布日：2024/4/17