一种提高发酵中草药中总黄酮含量的发酵菌剂及其应用

本发明属于发酵中草药，具体涉及一种提高发酵中草药中总黄酮含量的发酵菌剂及其应用。

背景技术：

1、发酵中草药是指以一种或几种益生菌为发酵菌种，在适宜条件下，通过发酵工程技术对中草药进行发酵而获得的生物制品。尽管天然中草药细胞中含有糖、氨基酸、蛋白质等多种营养物质，以及黄酮、生物碱、皂苷等药效成分，但由于有细胞壁、细胞膜等的阻碍，营养物质及药效成分不能完全释放出细胞外，因而不能完全被动物肌体吸收利用。利用益生菌对中草药进行发酵，充分发挥微生物强有力的分解作用，将植物细胞壁破坏，使中草药中的营养物质和药效成分充分地释放出来，同时还能使不易吸收的大分子物质转化为小分子物质，将中草药、益生菌和酶等有机地集合，是一种具有提高动物机体免疫力、改善肠道微生态平衡、补充动物内源酶不足、促进动物生长等功效的新型药品。

2、在畜牧养殖中使用抗生素作为饲料添加剂虽然能在一定程度上预防疾病的发生，但是过度使用抗生素会产生抗药性及产生药物残留，残留的抗生素在人食用动物食品中在人体中蓄积，且可能产生毒性很强的自由基而导致癌症的发生。而使用发酵中草药作为生物饲料添加剂则能有效地解决这些问题，有临床研究证明，利用益生菌对中草药进行发酵，只需要传统煎、煮、熬水提物量的1/28即可发挥同等功效，由此可为生物饲料开辟新的道路。由于目前国内采用微生物来发酵中草药的相关研究还处于起步阶段，对于发酵中草药的最优菌种和最佳发酵工艺还处于摸索阶段，所以本发明对复方中草药的发酵菌种进行筛选，并且通过对发酵后总黄酮含量的变化来确定最佳的发酵条件，为后续发酵中草药的进一步研究提供依据。

技术实现思路

1、为了提高发酵中草药中总黄酮的含量，本发明提供以下技术方案：

2、本发明公开了一株纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(lysinibacillus fusiformis)c-2，其保藏号为cctcc no:m 20232525，保藏单位：中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2023年12月11日，保藏地址：中国.武汉.武汉大学。

3、本发明公开了一种提高发酵中草药中总黄酮含量的发酵菌剂，所述发酵菌剂中包含所述的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(lysinibacillus fusiformis)c-2。

4、优选地，所述发酵菌剂中还包含地衣芽孢杆菌(bacillus licheniformis)c-1，所述地衣芽孢杆菌(bacillus licheniformis)c-1的保藏号为cctcc no:m 20232524，保藏单位：中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2023年12月11日，保藏地址：中国.武汉.武汉大学。

5、优选地，所述发酵菌剂中纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(lysinibacillus fusiformis)c-2与地衣芽孢杆菌(bacillus licheniformis)c-1的浓度比为1:1。

6、本发明公开了一株地衣芽孢杆菌(bacillus licheniformis)c-1，其保藏号为cctccno:m 20232524，保藏单位：中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2023年12月11日，保藏地址：中国.武汉.武汉大学。

7、纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(lysinibacillus fusiformis)c-2或发酵菌剂或地衣芽孢杆菌(bacillus licheniformis)c-1在提高发酵中草药总黄酮含量的应用。

8、纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(lysinibacillus fusiformis)c-2或发酵菌剂或地衣芽孢杆菌(bacillus licheniformis)c-1在制备能提高发酵中草药总黄酮含量的菌剂中的应用。

9、一种提高中草药发酵后总黄酮含量的方法，所述方法包含以下步骤：

10、(1)接种：将所述的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(lysinibacillus fusiformis)c-2或所述的发酵菌剂或所述的地衣芽孢杆菌(bacillus licheniformis)c-1接种于中草药中，得到接种后的中草药；

11、(2)发酵：将接种后的中草药调节固水比和发酵温度进行发酵。

12、优选地，所述步骤(1)中接种量为7％。

13、优选地，所述步骤(2)中固水比为1:0.66，发酵温度为32℃，发酵的时间为4d。

14、本发明的有益效果：

15、本发明以复方中草药为原料通过接种发酵复方中草药的最佳菌种，并通过单因素试验和响应面分析探究最优的发酵复方中草药的工艺。试验结果表明，最佳发酵菌种为地衣芽孢杆菌和纺锤形赖氨酸芽孢杆菌，采用混合菌种发酵的方式，最优发酵培养基配方为：中草药100％，硫酸铵1.29％，kh2po4 0.25％，mgso4·7h2o 0.20％，nacl 3％，最佳发酵条件为：接种量7％，固水比1:0.66，发酵温度32℃，此组合工艺下发酵后的总黄酮含量较自然发酵升高了2.5倍。

技术特征：

1.一株纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(lysinibacillus fusiformis)c-2，其特征在于，其保藏号为cctccno:m 20232525。

2.一种提高发酵中草药中总黄酮含量的发酵菌剂，其特征在于，所述发酵菌剂中包含权利要求1所述的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(lysinibacillus fusiformis)c-2。

3.根据权利要求2所述的发酵菌剂，其特征在于，所述发酵菌剂中还包含地衣芽孢杆菌(bacillus licheniformis)c-1，所述地衣芽孢杆菌(bacillus licheniformis)c-1的保藏号为cctccno:m 20232524。

4.根据权利要求3所述的发酵菌剂，其特征在于，所述发酵菌剂中纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(lysinibacillus fusiformis)c-2与地衣芽孢杆菌(bacillus licheniformis)c-1的浓度比为1:1。

5.一株地衣芽孢杆菌(bacillus licheniformis)c-1，其特征在于，其保藏号为cctccno:m20232524。

6.权利要求1所述的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(lysinibacillus fusiformis)c-2或权利要求2-4任一所述的发酵菌剂或权利要求5所述的地衣芽孢杆菌(bacilluslicheniformis)c-1在提高发酵中草药总黄酮含量的应用。

7.权利要求1所述的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(lysinibacillus fusiformis)c-2或权利要求2-4任一所述的发酵菌剂或权利要求5所述的地衣芽孢杆菌(bacilluslicheniformis)c-1在制备能提高发酵中草药总黄酮含量的菌剂中的应用。

8.一种提高中草药发酵后总黄酮含量的方法，其特征在于，所述方法包含以下步骤：

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中接种量为7％。

10.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中固水比为1:0.66，发酵温度为32℃，发酵的时间为4d。

技术总结
本发明属于发酵中草药技术领域，一种提高发酵中草药中总黄酮含量的发酵菌剂及其应用。本发明公开了一株纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus fusiformis)C‑2，其保藏号为CCTCC NO:M20232525，还公开了一株地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)C‑1，其保藏号为CCTCC NO:M20232524，本发明以复方中草药为原料通过接种发酵复方中草药的菌种，采用混合菌种发酵的方式，最优发酵培养基配方为：中草药100％，硫酸铵1.29％，KH2PO40.25％，MgSO4·7H2O 0.20％，NaCl3％，最佳发酵条件为：接种量7％，固水比1:0.66，发酵温度32℃，此组合工艺下发酵后的总黄酮含量较自然发酵升高了2.5倍。

技术研发人员：兰时乐,周庆雯,胡超,王征,张俊豪,舒志恒,郑竣,周燚
受保护的技术使用者：湖南农业大学
技术研发日：
技术公布日：2024/5/16