一种山茶籽多肽的制备方法及其在痤疮中的应用

本发明属于化妆品，尤其涉及一种山茶籽多肽的制备方法及其在痤疮中的应用。

背景技术：

1、山茶为山茶科山茶属，常绿、长寿的油料木本植物，山茶科植物主要集中在中国南方的长江中下游的省区。山茶属植物中富含多种活性成分，也是日化产品的重要功效添加物，具有抗氧化、抗菌、抗过敏、抗炎、促进伤口愈合等多种效果。山茶籽饼粕为山茶籽提取山茶籽油后的副产品，拥有多种有益成分：蛋白15％，各种糖类物质40％，油脂物质5％，各类纤维6％，皂素10-14％，单宁2％等。目前，山茶籽饼粕一般被用于田地增肥或者直接丢弃，造成了极大的资源浪费。山茶籽饼粕中蛋白含量高，可以进行多肽资源开发，具有开发生物功能活性多肽药物资源的潜力。

2、痤疮是一种累及毛囊皮脂腺单位的慢性炎症性疾病，近年来其发病率不断上升，发病年龄范围也越来越广。痤疮最常累及面部、胸部和背部，中重度的痤疮会出现脓疱、结节、囊肿，甚至瘢痕，可能会破坏患者的外观。炎症和皮肤微生态失衡是诱发痤疮的重要因素。痤疮丙酸杆菌过度增殖通过多种方式促炎导致痤疮发生。痤疮丙酸杆菌代谢过程将皮脂中的甘油三酯分解为游离脂肪酸，可以诱导粉刺的形成。其细胞壁上病原相关分子模式、水解皮脂产生的游离脂肪酸等物质均可通过刺激tlr2等途径启动皮肤固有免疫系统，诱导产生炎症介质，加重炎症反应。马拉色菌与难治性痤疮相关，限制性马拉色菌具有较强的脂酶活性，促进毛囊口角化，并可以诱导角质形成细胞分泌炎症因子，加剧炎症反应。

3、目前痤疮的外用药包括维a酸、过氧苯甲酰、抗生素、壬二酸类，口服药包括抗生素、异维生a酸、激素类药物等，都不适合长期、大量使用，因此研发一种安全有效的改善痤疮的制剂是很有必要的。

技术实现思路

1、有鉴于此，本发明提供了一种山茶籽多肽的制备方法及其在痤疮中的应用。本发明采用水提酸沉、酶解获得山茶籽多肽，将制备的山茶籽多肽用于化妆品中，起到抗炎作用，同时有效抑制痤疮丙酸杆菌和限制性马拉色菌的生长，调节皮肤微生态，进而改善痤疮，有利于皮肤健康。

2、本发明首先提供了一种山茶籽多肽的制备方法，包括以下步骤：

3、s1：将山茶籽粉加水混合，调ph 7.5～8.5后40～60℃恒温震荡提取，离心，取上清液过滤；

4、s2：将s1得到的上清液调ph 3.5～4.5以沉淀蛋白，离心收集蛋白沉淀；

5、s3：以s2得到的山茶籽蛋白为原料加水配制蛋白水溶液，超声处理，然后调ph中性，调温度45～55℃，依次加入木瓜蛋白酶和风味蛋白酶分别进行酶解，每一次酶解完毕后均需要水浴灭酶；

6、s4：离心收集上清液，然后装入透析袋(截留分子量为3500da)透析，透析后取保留液，经冷冻干燥得到山茶籽多肽。

7、进一步的，s1步骤，山茶籽粉与水的比例为1：10～18(w/v)，提取时间为2～3h。

8、进一步的，s3步骤，蛋白水溶液浓度为15～20mg/ml；采用100～200w超声处理15～30min。

9、进一步的，s3步骤，水浴灭酶温度为80～100℃，时间为10～15min。

10、进一步的，s5步骤中，透析温度为2～8℃，透析时间为72～96h。

11、上述方法制备的山茶籽多肽，在制备治疗痤疮的化妆品中的应用。

12、本发明还公开了所述的山茶籽多肽调节皮肤菌群，当山茶籽多肽浓度为20mg/ml，抑制痤疮丙酸杆菌ccsm0331增殖，抑制率为100％；抑制限制性马拉色菌cicc 33081生长，抑制率80.36％。

13、本发明还公开了所述的山茶籽多肽的抗炎效果，5mg/ml山茶籽多肽能显著地降低lps诱导引起的巨噬细胞raw264.7产生炎症因子il-6的表达水平，下降率为39.86％，具有良好抗炎功效。

14、相对于现有技术，本发明具有如下有益效果：本发明提供了一种山茶籽多肽的制备方法，以山茶籽饼粕为原料，采用水提酸沉、酶解获得山茶籽多肽。该方法获得的山茶籽多肽可有效抑制痤疮丙酸杆菌和限制性马拉色菌生长，调节皮肤微生态，同时降低lps诱导的巨噬细胞raw264.7产生的炎症因子il-6的水平，显示出良好的抗炎效果，进而改善痤疮。

技术特征：

1.一种山茶籽多肽的制备方法，其特征是，包括以下步骤：

2.如权利要求1所述的一种山茶籽多肽的制备方法，其特征是，所述s1步骤，山茶籽粉与水的质量体积比为1：10～18，提取时间为2～3h。

3.如权利要求1所述的一种山茶籽多肽的制备方法，其特征是，所述s3步骤，蛋白水溶液浓度为15～20mg/ml；采用100～200w超声处理15～30min。

4.如权利要求1所述的一种山茶籽多肽的制备方法，其特征是，所述s3步骤，每一次酶解完毕后均需要水浴灭酶。

5.如权利要求4所述的一种山茶籽多肽的制备方法，其特征是，所述s3步骤，水浴灭酶温度为80～100℃，时间为10～15min。

6.如权利要求1所述的一种山茶籽多肽的制备方法，其特征是，所述s5步骤中，透析温度为2～8℃，透析时间为72h～96h。

7.权利要求1-6中任一项所述方法制备的山茶籽多肽。

8.权利要求7所述的山茶籽多肽，在制备治疗痤疮的化妆品中的应用。

9.如权利要求8所述的应用，其特征是，所述的山茶籽多肽调节皮肤菌群，抑制痤疮丙酸杆菌和限制性马拉色菌增殖。

10.如权利要求8所述的应用，其特征是，所述山茶籽多肽降低lps诱导引起的巨噬细胞raw264.7产生炎症因子il-6的表达水平，具有抗炎功效。

技术总结
本发明公开了一种山茶籽多肽的制备方法及其在痤疮中的应用。本发明将山茶籽粉加水再调节pH7.5～8.5后40～60℃恒温震荡提取，离心，取上清液过滤然后调节pH3.5～4.5以沉淀蛋白质；然后以山茶籽蛋白为原料加水配制蛋白水溶液，超声处理，然后调pH中性，调温度45～55℃，依次加入木瓜蛋白酶和风味蛋白酶分别进行酶解；离心收集上清液，然后进行透析、冷冻干燥得到山茶籽多肽。将制备的山茶籽多肽用于化妆品中，起到抗炎作用，同时有效抑制痤疮丙酸杆菌和限制性马拉色菌的生长，调节皮肤微生态，进而改善痤疮，有利于皮肤健康。

技术研发人员：邵丽,王理壮,马来记,黄洁彦,岳佳威,唐婧,姚凌云
受保护的技术使用者：上海应用技术大学
技术研发日：
技术公布日：2024/4/29