本发明属于水产养殖，具体涉及刺激菲牛蛭分泌唾液的方法，进而能够从菲牛蛭唾液中提取更多的水蛭素及菲牛蛭素。
背景技术：
1、菲牛蛭（ poecilobdella manillensis lesson），俗称金边蚂蟥，是云南特色的药用动物资源。云南省制定了《菲牛蛭冻干粉质量标准》（云ypbz-0199-2013），将其作为直接口服中药饮片使用，具有破血通经、逐瘀消癥的功效。用于血瘀经闭、癥瘕痞块、中风偏瘫、跌打损伤，以及治疗脑血栓、脑溢血、高黏血症、高脂血症、高血压病、肺心病等。
2、现代医学研究证明，水蛭素和菲牛蛭素是菲牛蛭发挥上述药效的有效成分，其中水蛭素约由65-66个氨基酸分子组成，分子量约为7000d；菲牛蛭素则由60个左右氨基酸分子组成，分子量也为7000d，但二者仅有50%-60%的氨基酸残基是相同的，但菲牛蛭素的抗凝活性则是水蛭素的10倍以上。菲牛蛭素和水蛭素可用于治疗各种血栓性疾病，尤其是静脉血栓和弥漫性血管内凝血的治疗，也可用于外科手术后预防动脉血栓的形成，用于溶解血栓或预防血管再造后血栓的形成，改善体外血液循环和血液透析过程，可促进伤口愈合，在肿瘤治疗中也能发挥作用。动物试验和临床研究表明，静脉或皮下注射水蛭素均无明显毒副作用，对血压、心率、血相、出血时间和血液化学成分均不受影响，呼吸系统也没有影响，无过敏反应，无特异抗体发现，且非常安全。加之水蛭素和菲牛蛭素还可以口服，给用药带来很大方便。水蛭素和菲牛蛭素性质比较稳定，胰蛋白酶和糜蛋白酶不破坏其活性，某些水解片段仍有抑制凝血酶的作用，这也是口服菲牛蛭冻干粉及其提取物仍然有疗效的原因。
3、由于水蛭素和菲牛蛭素具有极其重要的开发价值，而菲牛蛭的来源有限，使用菲牛蛭提取的天然水蛭素和菲牛蛭素价格昂贵，故国内外医药界均着重研究通过基因工程获得重组水蛭素，目前上市的重组水蛭素类药品有来匹卢定、比伐卢定等。相对于天然水蛭素和菲牛蛭素，重组水蛭素由于63位酪氨酸残基未硫酸化，其对凝血酶的抑制常数比天然水蛭素和菲牛蛭素降低了90%以上，所以难以发挥溶栓效果；另一方面，存在容易引起出血的副作用，只能注射使用，半衰期短等缺陷。上述缺陷使其无法与天然水蛭素相比。因此，开发新的能够有效降低天然水蛭素和菲牛蛭素提取成本的方法，可以获得极大的社会效益和经济效益。
4、水蛭素和菲牛蛭素是菲牛蛭唾液腺分泌的成分，所以，刺激菲牛蛭分泌唾液并从菲牛蛭唾液中提取水蛭素和菲牛蛭素，是一种有效的降低水蛭素和菲牛蛭素提取成本的方法。
5、在此背景下，申请人持续开展了从活体菲牛蛭中提取天然水蛭素的相关研究，得到了如下研究结论：
6、①使用臭氧刺激菲牛蛭分泌唾液的方法不可行，该方法菲牛蛭分泌的唾液量极少且活性较低。
7、②使用负压刺激菲牛蛭分泌唾液的方法同样不可行，该方法菲牛蛭分泌的唾液量较少且活性较低。
8、③使用电刺激法可有效促使菲牛蛭分泌唾液，但电压较难控制，稍微偏高即可导致菲牛蛭吐血甚至致死，偏低则分泌唾液量极少，而且不论电压高低菲牛蛭分泌的唾液水蛭素活性均较低。
9、④使用香辛料如辣椒、木姜子、生姜、花椒等的提取物溶液可有效促进菲牛蛭分泌唾液，但同样存在分泌的唾液量较少，活性低等缺点，同时高浓度时可导致菲牛蛭吐血或死亡。
10、⑤使用中药如常山、瓜蒂等的提取物溶液可促进菲牛蛭分泌唾液，但唾液中水蛭素含量偏低。
11、⑥使用酸味水果如李子、苹果、杨梅、梅子、余甘子等的汁液则可以有效的促进菲牛蛭分泌唾液，其分泌的唾液量较多且活性高，同时实验过程中未发生菲牛蛭吐血或死亡现象。
12、中国专利申请cn117362415a公开了一种菲牛蛭催吐液及其在规模化水蛭素提取中的应用，其采用韭菜提取物、黄芪提取物、银杏叶提取物、八角莲提取物来作为菲牛蛭催吐液，将新鲜韭菜、干黄芪、干银杏叶或干八角莲用水熬煮提取并稀释后用作菲牛蛭催吐液。但其方法仍然较为繁琐，并且提取水蛭素和菲牛蛭素的提取效率以及提取物的抗凝血酶活性仍然不高。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供一种方法简单、成本低、效率高、并可提高菲牛蛭唾液中水蛭素和菲牛蛭素含量的菲牛蛭唾液提取方法。
2、本发明采取的技术方案如下：
3、使用酸味水果提取菲牛蛭唾液的方法，是使用酸味水果的汁液喂食菲牛蛭，刺激菲牛蛭分泌唾液并进行提取。
4、所述使用酸味水果提取菲牛蛭唾液的方法，步骤如下：
5、1）取新鲜酸味水果，榨汁，汁液用水稀释1-50倍备用；
6、2）取菲牛蛭，放入稀释的酸味水果汁液中，持续10-60分钟，刺激菲牛蛭分泌唾液；
7、3）收集菲牛蛭唾液即可。
8、较佳地，所述酸味水果为李子、苹果、杨梅、梅子、余甘子中的一种或几种。
9、上述酸味水果中含有苹果酸、酒石酸、琥珀酸、齐墩果酸、没食子酸、诃子酸等多种果酸，果酸的ph值为2-6。
10、本发明方法具有操作简单、材料易得价廉、菲牛蛭唾液提取率高、菲牛蛭唾液中水蛭素和菲牛蛭素活性高、菲牛蛭无死亡可重复利用等显著优点，可以极大的降低水蛭素和菲牛蛭素的提取成本。
1.使用酸味水果提取菲牛蛭唾液的方法，其特征是，使用酸味水果的汁液喂食菲牛蛭，刺激菲牛蛭分泌唾液并进行提取。
2.如权利要求1所述的使用酸味水果提取菲牛蛭唾液的方法，其特征在于，方法步骤如下：
3.如权利要求1或2所述的使用酸味水果提取菲牛蛭唾液的方法，其特征在于，所述酸味水果为李子、苹果、杨梅、梅子、余甘子等中的一种或几种。