本发明涉及生物，特别是涉及一种ns1蛋白单克隆抗体及基应用。
背景技术：
1、呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,rsv)是一种季节性病毒，是婴幼儿、老年人和那些患有增加rsv风险的潜在疾病的人下呼吸道感染的常见原因。据统计，大多数儿童在2岁时至少会经历一次rsv感染。
2、rsv是一种非节段性单股负链rna病毒，属于副粘病毒科、肺炎病毒属、肺炎病毒亚科，直径约为150nm，基因组为15.2kb，含有10个基因，编码11个开放阅读框(openreadingframes,orfs)，因为在m2mrna中有两个重叠的开放阅读框，产生了两个不同的基质蛋白，m2-1和m2-2。病毒包膜包含四种蛋白质，基质蛋白(m)、g糖蛋白、融合(f)糖蛋白和小疏水蛋白(sh)。rsv病毒包括五种核糖体蛋白，多聚酶亚单位蛋白(l)、核衣壳(n)、磷蛋白(p)、m2-1和m2-2，以及两个非结构蛋白(ns1和ns2)。
3、ns1基因全长417bp，编码139个氨基酸残基，蛋白大小为15.6kda。ns1被认为在rsv发病机制中有多种作用。在rsv感染的a549细胞中，ns1通过上调转录因子kruppel样因子-6来抑制mir-24的表达，该因子驱动tgf-β的表达。值得注意的是，抑制mir-24实际上可以抑制a549细胞中的rsv复制。可能是ns1在感染后24小时内抑制了rsv诱导的mir-24的上调，而随后，mir-24的表达被上调以增强病毒的复制。除感染气道上皮细胞外，rsv还可以感染树突状细胞并通过pamps激活prrs。感染野生型和ns缺陷的rsv菌株表明，ns1抑制了人树突状细胞的成熟。此外，mavs也受到了强烈的抑制，mavs是rsv诱导的i型ifn产生的必要信号蛋白。另有研究表明，ns1的缺失可以促进cd103+cd8+t细胞和th17细胞的增殖和激活，这2个细胞群可以抵消rsv，并抑制产生il-4的cd4+t细胞的激活。
4、ns1的晶体结构在2017年被确定，其与rsv基质蛋白(m)的n端结构域具有显著的结构同源性。ns1和m之间的一个明显区别是在ns1的c端存在一个α-螺旋(α3)。研究表明，c端α螺旋的突变不影响ns1的核定位，但α3螺旋与其他蛋白的相互作用很重要，缺乏α3螺旋的ns1部分消除了ns1介导的ifn-β诱导抑制，也失去了对树突状细胞成熟的拮抗功能，表明这种独特的螺旋结构对于ns1介导的ifn拮抗和免疫反应的调节至关重要。且与感染野生型(wild type,wt)rsv相比，突变ns1c端α螺旋的重组毒株在a549细胞中的病毒复制率降低。目前的研究结果证实，ns1在细胞质和细胞核中均有分布，ns1进入细胞核后，通过与中介体互作，结合宿主免疫基因的启动子和增强子，调控宿主免疫基因的转录，从而拮抗宿主抗病毒免疫反应，但这种抑制的确切分子机制尚未明确。因此，进一步研究非结构蛋白ns1与宿主因子的相互作用将有助于系统性了解rsv感染及其免疫逃逸的分子机制。
5、由于目前尚无商品化抗rsv ns1单克隆抗体(monoclonal antibody,mab)，限制了对ns1蛋白功能和调控机制的深入研究。本研究成功制备了ns1mab，同时将该单抗用于间接免疫荧光(indirect immunofluorescence assay,ifa)和westernblotting检测，分析rsvns1在过表达细胞和病毒感染细胞中的表达与分布情况，为进一步研究rsv感染过程中非结构蛋白ns1与宿主蛋白互作机制提供有利的工具。
技术实现思路
1、为了解决上述问题，本发明提供了一种ns1蛋白单克隆抗体及基应用，本发明提供的ns1单克隆抗体能够特异性结合rsvns1蛋白。
2、为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
3、本发明还提供了一种ns1蛋白单克隆抗体，所述ns1蛋白单克隆抗体的重链可变区氨基酸序列如seq id no.1所示，轻链可变区氨基酸序列如seq idno.2所示。
4、优选的，所述ns1蛋白单克隆抗体的重链可变区核苷酸序列如seq id no.3所示。
5、优选的，所述ns1蛋白单克隆抗体的轻链可变区氨基酸序列如seq id no.4所示。
6、优选的，所述ns1蛋白单克隆抗体的重链可变区的cdr序列如seq idno.5～7所示。
7、优选的，所述ns1蛋白单克隆抗体的轻链可变区的cdr序列包括轻链cdr1序列、轻链cdr2序列和轻链cdr3序列；
8、所述轻链cdr1序列如seq id no.8所示；
9、所述轻链cdr2序列为kvs；
10、所述轻链cdr3序列如seq id no.9所示。
11、优选的，所述ns1蛋白单克隆抗体由rsvns1蛋白免疫动物后获得。
12、优选的，所述rsvns1蛋白的氨基酸序列如seq id no.10所示。
13、本发明还提供了上述技术方案所述的ns1蛋白单克隆抗体在制备特异性结合rsvns1蛋白药物中的应用。
14、本发明还提供了一种治疗呼吸道合胞病毒的药物，包括上述技术方案所述的ns1单克隆抗体。
15、优选的，还包括药学上可接受的载体。
16、本发明的有益效果：
17、本发明提供了一种呼吸道合胞病毒非结构蛋白ns1蛋白的特异性单克隆抗体，所述单克隆抗体为igg1型单克隆抗体；
18、westernblotting试验表明其特异性地和非结构蛋白ns1反应；
19、间接免疫荧光试验表明其和rsva2毒株具有很好的反应性。
1.一种ns1蛋白单克隆抗体，其特征在于，所述ns1蛋白单克隆抗体的重链可变区氨基酸序列如seq id no.1所示，轻链可变区氨基酸序列如seq idno.2所示。
2.根据权利要求1所述的ns1蛋白单克隆抗体，其特征在于，所述ns1蛋白单克隆抗体的重链可变区核苷酸序列如seq id no.3所示。
3.根据权利要求1所述的ns1蛋白单克隆抗体，其特征在于，所述ns1蛋白单克隆抗体的轻链可变区氨基酸序列如seq id no.4所示。
4.根据权利要求1所述的ns1蛋白单克隆抗体，其特征在于，所述ns1蛋白单克隆抗体的重链可变区的cdr序列如seq id no.5～7所示。
5.根据权利要求1所述的ns1蛋白单克隆抗体，其特征在于，所述ns1蛋白单克隆抗体的轻链可变区的cdr序列包括轻链cdr1序列、轻链cdr2序列和轻链cdr3序列；
6.根据权利要求1所述的ns1蛋白单克隆抗体，其特征在于，所述ns1蛋白单克隆抗体由rsvns1蛋白免疫动物后获得。
7.根据权利要求6所述的ns1蛋白单克隆抗体，其特征在于，所述rsvns1蛋白的氨基酸序列如seq id no.10所示。
8.权利要求1～7任一项所述的ns1蛋白单克隆抗体在制备特异性结合rsv ns1蛋白药物中的应用。
9.一种治疗呼吸道合胞病毒的药物，其特征在于，包括权利要求1～7任一项所述的ns1单克隆抗体。
10.根据权利要求9所述的药物，其特征在于，还包括药学上可接受的载体。