本发明属于基因工程，具体涉及中和抗d抗体的抗独特型抗体及其用途。
背景技术：
1、在临床输血治疗中，rh血型系统的重要性仅次于abo血型系统。rh血型主要的抗原是d、c、c、e和e抗原，rh血型系统抗原的免疫原性很强，其中以d抗原的免疫原性最强。红细胞血型抗体遵循免疫学的通行原理：个体如果存在/表达某种抗原，就不会产生相对应的抗体；如果缺失某种抗原，就有可能产生相对应的抗体。机体免疫系统在外来的红细胞血型抗原的刺激下，由b淋巴细胞或记忆b淋巴细胞增殖分化成的浆细胞就会产生的可与相应红细胞抗原发生特异性结合的抗体。有研究发现rh阴性个体首次输入2ml以上的rh阳性红细胞就有可能产生抗-d。近年来，随着实验技术进步和数据的共享，发现部分rhd基因突变而导致d抗原不完全表达的d变异型个体，由于d抗原表位的缺失，在受到d抗原的刺激下，也会产生抗-d。抗-d主要是igg型免疫性抗体，可经输血或怀孕等免疫途径产生。抗-d可引起急性或慢性溶血性输血反应及胎儿新生儿溶血病(hdfn)，因此临床工作中，准确检出抗-d是输血安全的基本保障，也是指导rh-hdfn预防和诊治的依据。
2、目前红细胞血型抗体检测所用的方法为免疫血清学方法，其原理是用已知抗原检测未知抗体。由于目前无法得到单一的、纯化的红细胞血型抗原，所以只能选择携有多种抗原的红细胞来进行抗体检测，并按照一定的反应格局来判定意外抗体的特异性。目前检出igg型抗-d的方法是间接抗人球蛋白法，采用抗fc端的二抗作为中介，使结合igg抗体的红细胞出现凝集；检测抗体的金标准是试管间接抗人球蛋白法，但存在操作繁琐，受操作人员技术水平影响较大的缺点。对抗-d的浓度通常以效价或滴度来表示，检测方法是稀释抗体并用间接抗人球蛋白法检测，无法准确检测抗-d的量。对于产生血型意外抗体的病患，为消除意外抗体的影响，在输血治疗中只能采取对应抗原阴性的血液，紧急情况下，受此限制可能无法找到相合的血液，耽误患者的救治；而常见的产生抗-d的rh阴性孕妇，如抗-d效价高则导致hdfn的风险和严重程度增加，往往在妊娠早期出现死胎和流产。
3、目前红细胞血型抗体检测所用的方法为免疫血清学方法，其原理是用已知抗原检测未知抗体。由于目前无法得到单一的、纯化的红细胞血型抗原，所以只能选择携有多种抗原的红细胞来进行抗体检测，并按照一定的反应格局来判定意外抗体的特异性。目前检出igg型抗-d的方法是间接抗人球蛋白法，采用抗fc端的二抗作为中介，使结合igg抗体的红细胞出现凝集；检测抗体的金标准是试管间接抗人球蛋白法，但存在操作繁琐，受操作人员技术水平影响较大的缺点。
4、解决上述问题，需要获得能特异性与抗d的fab端相结合的“抗原”来捕获抗体。由于rhd蛋白是跨膜蛋白，除穿膜折叠外，还需要与rh相关蛋白相互作用形成空间构象才具有抗原性。如果采用从红细胞膜上提取的方式获得蛋白，会失去rhd蛋白的四级结构，rhd抗原性也会消失；同样通过基因工程合成蛋白质，也只能获得不具备rhd抗原性的氨基酸链。
技术实现思路
1、本发明的目的是提供中和抗d抗体的抗独特型抗体及其用途，利用该抗独特型抗体和抗d介导的红细胞凝集作用，继而可以用于开发各种诊断试剂，可用于检测含有抗d的多种血型意外抗体混合样本。
2、本发明采用以下技术方案：一种用于检测和中和抗d抗体的抗独特型抗体，包括重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含hcdr1、hcdr2和hcdr3序列中的至少一个，其中：
3、所述hcdr1的氨基酸序列具有如seq id no.17所示的氨基酸序列；
4、所述hcdr2的氨基酸序列具有如seq id no.18所示的氨基酸序列；
5、所述hcdr3的氨基酸序列具有如seq id no.19所示的氨基酸序列。
6、进一步地，该轻链可变区包含lcdr1、lcdr2和lcdr3序列中的任意一个，其中：
7、所述lcdr1的氨基酸序列具有如seq id no.20所示的氨基酸序列；或
8、所述lcdr2的氨基酸序列具有如seq id no.21所示的氨基酸序列；或
9、所述lcdr3的氨基酸序列具有如seq id no.22所示的氨基酸序列。
10、进一步地，该重链可变区的氨基酸序列如seq id no.23所示；所述轻链可变区的氨基酸序列如seq id no.24所示。
11、进一步地，该抗独特型抗体为鼠源抗体。
12、进一步地，该抗独特型抗体的重链的恒定区为鼠igm，igg1、igg2a、igg2b或igg3的重链恒定区，以及κ或λ型轻链恒定区。
13、进一步地，该抗独特型抗体的抗原结合部分选自f(ab’)2片段。
14、本发明还公开了上述的一种用于检测和中和抗d抗体的抗独特型抗体的用途，所述抗独特型抗体用于检测血清中抗d抗体的含量的用途；或用于中和抗d抗体的用途。
15、本发明还公开了上述的一种用于检测和中和抗d抗体的抗独特型抗体的用途，其在制备抗d抗体相关疾病的药物中的用途。
16、本发明的有益效果是：1.该抗独特型抗体能特异性结合抗d抗体fab端，可以起到模拟抗原的作用。2.可利用抗独特型抗体中和抗d介导的红细胞凝集作用，继而可以用于开发各种诊断试剂，可用于检测含有抗d的多种血型意外抗体混合样本，也可于用rh-hdfn的风险评估和临床诊疗，还能为后续抗体的人源化打下基础，成为治疗rh-hdfn和rh阴性输血提供阻断抗-d的药物，对于提高临床输血安全性和疾病救治具有重要的应用价值。
1.一种用于检测和中和抗d抗体的抗独特型抗体，其特征在于，包括重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含hcdr1、hcdr2和hcdr3序列中的至少一个，其中：
2.如权利要求1所述的一种用于检测和中和抗d抗体的抗独特型抗体，其特征在于，所述轻链可变区包含lcdr1、lcdr2和lcdr3序列中的任意一个，其中：
3.如权利要求2所述的一种用于检测和中和抗d抗体的抗独特型抗体，其特征在于，所述重链可变区的氨基酸序列如seq id no.23所示；所述轻链可变区的氨基酸序列如seq idno.24所示。
4.如权利要求3所述的一种用于检测和中和抗d抗体的抗独特型抗体，其特征在于，所述抗独特型抗体为鼠源抗体。
5.如权利要求4所述的一种用于检测和中和抗d抗体的抗独特型抗体，其特征在于，所述抗独特型抗体的重链的恒定区为鼠igm，igg1、igg2a、igg2b或igg3的重链恒定区，以及κ或λ型轻链恒定区。
6.如权利要求5所述的一种用于检测和中和抗d抗体的抗独特型抗体，其特征在于，所述抗独特型抗体的抗原结合部分选自f(ab’)2片段。
7.如权利要求1-6中任一项所述的一种用于检测和中和抗d抗体的抗独特型抗体的用途，其特征在于，所述抗独特型抗体用于检测血清中抗d抗体的含量的用途；或用于中和抗d抗体的用途。
8.如权利要求1-6中任一项所述的一种用于检测和中和抗d抗体的抗独特型抗体的用途，其特征在于，其在制备抗d抗体相关疾病的药物中的用途。