本发明涉及生物医药，具体涉及一种苯丙氨酸解氨酶的双重突变体及其应用。
背景技术：
1、苯丙酮尿症(pku)是由苯丙氨酸代谢缺陷引起的遗传疾病，该病会造成患者智力发育障碍。苯丙氨酸解氨酶(avpal)能将苯丙氨酸降解为可随尿液排出的反式肉桂酸和氨，已作为pku的治疗药物，但其仍存在活性差、半衰期短和依从性差等诸多问题，亟待发展更为有效的治疗药物。
技术实现思路
1、为了解决上述技术问题，本发明的目的是提供一种苯丙氨酸解氨酶的双重突变体，本发明通过定向改造的方法提高了苯丙氨酸解氨酶的酶活性能，大幅增加了其临床应用价值。
2、本发明解决上述技术问题的技术方案如下：提供一种苯丙氨酸解氨酶的双重突变体，在如seq id no.1所示的苯丙氨酸解氨酶的氨基酸序列基础上具有m222n和i149d突变，或具有m222n和n36s突变。
3、本发明还提供了一种编码上述苯丙氨酸解氨酶的双重突变体的基因。
4、本发明还提供了一种包括上述基因的重组表达载体。
5、本发明还提供了一种上述重组表达载体的宿主细胞。
6、本发明还提供了上述苯丙氨酸解氨酶的双重突变体、基因、重组表达载体和宿主细胞在制备治疗苯丙酮尿症的药物中的应用。
7、本发明具有以下有益效果：
8、1、本发明通过定向改造，设计合成的苯丙氨酸解氨酶的双重突变体m222n/i149d和m222n/n36s的酶活性和催化效率均较wt显著提升，并且高于单点突变体m222n。其中，突变体m222n/i149d对苯丙氨酸活性升高到2.36倍，m222n/n36s的催化活性提高到3.39倍，在苯丙酮尿症的治疗中具有较大的应用价值。
1.一种苯丙氨酸解氨酶的双重突变体，其特征在于，在如seq id no.1所示的苯丙氨酸解氨酶的氨基酸序列基础上具有m222n和i149d突变，或具有m222n和n36s突变。
2.一种编码权利要求1所述的苯丙氨酸解氨酶的双重突变体的基因。
3.一种包括权利要求2所述基因的重组表达载体。
4.一种包括权利要求3所述重组表达载体的宿主细胞。
5.权利要求1所述的苯丙氨酸解氨酶的双重突变体、权利要求2所述的基因、权利要求3所述的重组表达载体和权利要求4所述的宿主细胞在制备治疗苯丙酮尿症的药物中的应用。