悬液的比例为纳豆芽孢杆菌:枯草芽孢杆菌:短小芽孢杆菌=0.8:3.2:2.7，用无菌玻璃棒搅拌均匀，在温度31°C条件下，固态发酵36h，每隔6h搅拌发酵体系一次；发酵结束后，发酵产物中加入2520ml水，在温度37°C，微波功率100w条件下，微波辅助提取12min，发酵产物在100°C条件下，煮沸5min，立即冷却，在5000r/min条件下，离心15min，保留上清液；上清液在真空度0.1MPa，温度62°C条件下真空浓缩至10ml，浓缩液在压力25MPa，流体流量24kg/h，夹带剂为50%乙醇，夹带剂加入量为4%，萃取温度36°C条件下，二氧化碳超临界萃取2.5h，二氧化碳超临界分离温度为42°C，获得花生壳黄色素。该实施例条件下的花生壳黄色素得率为12.15% ;纯度为92.53% ;色价为10.7 ；对羟自由基、DPPH自由基、超氧阴离子自由基、铁离子螯合力、铜离子螯合力、脂质过氧化抑制力、铁还原力、钼还原力的 IC5tl值分别是:3.29mg/mL、5.17mg/mL、4.44mg/mL、l.57mg/mL、
2.09mg/mL、l.87mg/mL、4.31mg/mL、5.91mg/mL。
[0015]实施例3
取没有虫蛀和霉变的花生壳，用清水冲洗干净，在50°C烘箱鼓风烘干，用超微粉碎仪粉碎，过150目筛，取500g筛下物作为原料；花生壳粉在温度121°C条件下灭菌15min，加Λ 375ml无菌水，并加入25ml由纳豆芽孢杆菌(CICC10263，购于中国工业微生物菌种保藏管理中心，菌悬液中纳豆芽孢杆菌数约为18个/mL)、枯草芽孢杆菌(CICC10456，购于中国工业微生物菌种保藏管理中心，菌悬液中枯草芽孢杆菌数约为18个/mL)和短小芽孢杆菌(CICC20745，购于中国工业微生物菌种保藏管理中心，菌悬液中短小芽孢杆菌数约为18个/mL)组成的混合菌液，三种菌种菌悬液的比例为纳豆芽孢杆菌:枯草芽孢杆菌:短小芽孢杆菌=1:3.8:3.2，用无菌玻璃棒搅拌均匀，在温度32°C条件下，固态发酵30h，每隔6h搅拌发酵体系一次；发酵结束后，发酵产物中加入7200ml水，在温度38°C，微波功率900w条件下，微波辅助提取14min，发酵产物在100°C条件下，煮沸5min，立即冷却，在5000r/min条件下，离心15min，保留上清液；上清液在真空度0.1MPa，温度65°C条件下真空浓缩至100ml，浓缩液在压力25MPa，流体流量28kg/h，夹带剂为50%乙醇，夹带剂加入量为5%，萃取温度38°C条件下，二氧化碳超临界萃取2.5h，二氧化碳超临界分离温度为44°C，获得花生壳黄色素。该实施例条件下的花生壳黄色素得率为11.79% ;纯度为94.17% ;色价为12.5 ;对羟自由基、DPPH自由基、超氧阴离子自由基、铁离子螯合力、铜离子螯合力、脂质过氧化抑制力、铁还原力、钼还原力的 105(|值分别是:2.57mg/mL>3.89mg/mL>4.96mg/mL>2.56mg/mL>
3.09mg/mL、4.08mg/mL、l.97mg/mL、3.99mg/mL。
[0016]实施例4
取没有虫蛀和霉变的花生壳，用清水冲洗干净，在50°C烘箱鼓风烘干，用超微粉碎仪粉碎，过150目筛，取100g筛下物作为原料；花生壳粉在温度121°C条件下灭菌15min，加入800ml无菌水，并加入200ml由纳豆芽孢杆菌(CICC10263，购于中国工业微生物菌种保藏管理中心，菌悬液中纳豆芽孢杆菌数约为18个/mL)、枯草芽孢杆菌(CICC10456，购于中国工业微生物菌种保藏管理中心，菌悬液中枯草芽孢杆菌数约为18个/mL)和短小芽孢杆菌(CICC20745，购于中国工业微生物菌种保藏管理中心，菌悬液中短小芽孢杆菌数约为18个/mL)组成的混合菌液，三种菌种菌悬液的比例为纳豆芽孢杆菌:枯草芽孢杆菌:短小芽孢杆菌=41:3.5:3.2，用无菌玻璃棒搅拌均匀，在温度33°C条件下，固态发酵36h，每隔6h搅拌发酵体系一次；发酵结束后，发酵产物中加入20000ml水，在温度40°C，微波功率100w条件下，微波辅助提取15min，发酵产物在100°C条件下，煮沸5min，立即冷却，在5000r/min条件下，离心15min，保留上清液；上清液在真空度0.1MPa，温度70°C条件下真空浓缩至100ml，浓缩液在压力30MPa，流体流量30kg/h，夹带剂为50%乙醇，夹带剂加入量为5%，萃取温度40°C条件下，二氧化碳超临界萃取3h，二氧化碳超临界分离温度为45°C，获得花生壳黄色素。该实施例条件下的花生壳黄色素得率为14.58% ;纯度为95.98% ;色价为14.3 ；对羟自由基、DPPH自由基、超氧阴离子自由基、铁离子螯合力、铜离子螯合力、脂质过氧化抑制力、铁还原力、钼还原力的 1(^5(|值分别是:1.79mg/mL、2.37mg/mL、3.66mg/mL、l.59mg/mL、
1.78mg/mL、2.07mg/mL、3.78mg/mL、2.92mg/mL。
[0017]以上所述，仅为本发明的【具体实施方式】，并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1.一种提取花生壳黄色素的方法，包括以下步骤:(1)花生壳清洗、烘干、粉碎、过筛、灭菌、加入无菌水和混合菌种固态发酵；(2)发酵产物加入水，微波辅助浸提，煮沸，离心，保留上清液；(3)上清液真空浓缩，浓缩液二氧化碳超临界萃取，得到黄色素。
2.根据权利要求1所述的一种提取花生壳黄色素的方法，其特征在于，步骤(I)所述的花生壳为无虫蛀、霉变的花生壳，用清水冲洗干净，在50°C烘箱鼓风烘干，用超微粉碎仪粉碎，过150目筛，取筛下物作为原料，灭菌的条件是温度121°C，时间15min，加入的无菌水的量为0.5-lml/g花生壳粉，混合菌种为纳豆芽孢杆菌(CICC10263，购于中国工业微生物菌种保藏管理中心，菌悬液中纳豆芽孢杆菌数约为18个/mL)、枯草芽孢杆菌(CICC10456，购于中国工业微生物菌种保藏管理中心，菌悬液中枯草芽孢杆菌数约为18个/mL)、短小芽孢杆菌(CICC20745，购于中国工业微生物菌种保藏管理中心，菌悬液中短小芽孢杆菌数约为18个/mL)的混合菌液，三种菌种菌悬液的比例为纳豆芽孢杆菌:枯草芽孢杆菌:短小芽孢杆菌=(0.5-1):(2.6-3.8):(1.9-3.2)，混合菌种的添加量为0.05-0.2ml/g花生壳粉，固态发酵的条件为温度30-33°C，时间24-36h。
3.根据权利要求1所述的一种提取花生壳黄色素的方法，其特征在于，步骤(2)所述的发酵产物中加入水的量为5-10ml/g发酵产物，微波辅助提取的条件为温度35-40°C，微波功率800-1000W,时间10-15 min，煮沸的条件为温度100。。，时间5min，离心的条件为5000r/min，离心 15min0
4.根据权利要求1所述的一种提取花生壳黄色素的方法，其特征在于，步骤(3)所述的真空浓缩的条件为真空度0.1MPa，温度60-70°C，二氧化碳超临界萃取条件为压力20-30MPa,流体流量20-30kg/h，夹带剂为50%乙醇，夹带剂加入量为3%_5%，萃取温度35-40°C，萃取时间2-3h，分离温度为40-45 °C。
【专利摘要】本发明公开了一种提取花生壳黄色素的方法，包括以下步骤：花生壳粉灭菌后加入无菌水和混合菌种固态发酵；发酵产物加入水，微波辅助浸提，离心，保留上清液；上清液真空浓缩，二氧化碳超临界萃取，得到黄色素。本发明的方法与现有花生壳黄色素提取方法区别在于本发明将生物和物理法结合在一起，首先利用微生物发酵花生壳，使得花生壳细胞中大分子物质水解，有利于黄色素浸出；其次利用微波辅助浸提，提高黄色素的得率；最后用二氧化碳超临界萃取，提高黄色素纯度以及进一步提高得率。本发明以花生加工副产品花生壳为原料，提取过程绿色环保，所得黄色素纯度、得率、色价高，具有抗氧化作用，可作为天然色素和天然抗氧化剂用于食品工业。
【IPC分类】C09B67-10, C09B61-00, A23L1-27, C09B67-54, A23L3-3472
【公开号】CN104861738
【申请号】CN201510328198
【发明人】齐宏涛
【申请人】青岛博之源生物技术有限公司
【公开日】2015年8月26日
【申请日】2015年6月15日