[0001]
本发明涉及浮床植物领域，具体为一种降解水体中灭多威的浮床植物。
背景技术：
[0002]
目前农药污染处理的主要方法有膜分离法、絮凝法、吸附法、混凝沉淀法、湿式氧化法、超声波技术法、焚烧法、催化氧化法、电解法、生物化学法等。这些方法受处理方式和成本所限，能应用于养殖池塘环境的较少，研究适宜池塘养殖水体灭多威净化的方法则显得十分必要。雍菜(ipomoea aquatica)又名空心菜，在中国作为一种蔬菜被广泛栽培，研究发现浮床种植雍菜常被用于净化污染水体，能有效改善水质，可通过根系吸收将污染物移出水体。浮床种植雍菜能有效地吸收、降解受污染的土壤或水体中的重金属、持久性有机污染物以及抗生素类污染物。相比较于其他处理农药的方法，浮床种植雍菜能有效改善水质，且成本低、操作简单。灭多威在通风、日光或较高温度下会迅速分解，但在水中有较长的半衰期，其在ph为6、7、8的3种水溶液中的水解半衰期分别为54周、38周和20周，而在蔬菜中灭多威的半衰期仅为30h。研究表明灭多威的容许日摄入量(adi)为20μg/kg。因此，水上浮床种植雍菜一方面能大量减少农药残留量，蔬菜经短时间处理残留量低于膳食adi值；关于浮床种植雍菜降解污染物虽有报道，但结合水产养殖实际、应用浮床种植经济蔬菜降解灭多威的研究较少，本文将通过实验室养殖系统模拟被灭多威污染的吉富罗非鱼养殖池塘，研究在不同灭多威浓度影响下的雍菜-吉富罗非鱼共生系统的水质指标的变化、吉富罗非鱼肝脏酶活性变化和雍菜对养殖系统中灭多威的吸收效果(水体中灭多威浓度变化和雍菜不同部位灭多威含量)，以期为减少灭多威对吉富罗非鱼养殖危害的研究提供基础资料，为此，提出一种降解水体中灭多威的浮床植物。
技术实现要素：
[0003]
针对现有技术的不足，本发明提供了一种降解水体中灭多威的浮床植物，于养殖池塘中的浮床上种植浮床植物，验证养殖池塘中的浮床上种植浮床植物对灭多威吸收有效性包括以下步骤：
[0004]
步骤一、试验用鱼暂养7天后，选择规格为20
±
2g/尾的健康吉富罗非鱼，养殖于室内循环流水养殖系统，每个养殖单元体积为100cm
×
60cm
×
50cm，每个单元中放入罗非鱼30尾，共计360尾；
[0005]
步骤二、试验包括4组，其中：
[0006]
a组：控制组，水面10％面积的雍菜+0μg/l灭多威；
[0007]
b组：水面10％面积的雍菜+2μg/l灭多威；
[0008]
c组：水面10％面积的雍菜+20μg/l灭多威；
[0009]
d组：水面10％面积的雍菜+200μg/l灭多威)；
[0010]
试验期间保持连续充氧，水温、溶解氧、ph等水质指标符合渔业水质标准，每天换水1/3，计算并补充1/3水中的灭多威，投喂量按罗非鱼养殖标准进行，每隔10天称量一次体
重，并对投喂量(3％-5％)做相应调整；
[0011]
步骤三、在试验开始后的14、28、42、56天采集水样，分析水体中灭多威、总氮(tn)、氨氮(nh4+-n)、亚硝酸盐氮(no2
--
n)和硝酸盐氮(no3
--
n)的含量，采样时间在10:00左右；
[0012]
步骤四、灭多威采用watersxevotmtq进行含量测定，并采用masslynx4.1进行分析，流动相a为0.1％甲酸水溶液，流动相b为乙腈进行梯度洗脱(按a:b＝9:1，1:9，5:5，9:1，9:1分别洗脱2.5，0.5，0.5，0.5，1.5min)，流速为0.3ml/min，柱温30℃，其他水质指标按水和废水监测分析方法进行，其中tn采用过硫酸钾氧化-紫外分光光度法测定，nh4+-n采用纳氏试剂光度法测定，no2
--
n采用n-(1-萘基)-乙二胺光度法测定，no3
--
n采用酚二磺酸光度法测定；
[0013]
步骤五、第14、28、42天采集雍菜叶、根和茎部位，每个部位2.5g，平皿称重减压烘干添加乙腈采用spe浓缩柱浓缩，将na2so4转移至tpt墨盒(cleanettptcartridge)中对样本进行前处理，用0.05ml乙腈-甲苯(体积比3:1)对spe柱进行活化，每次用5ml乙腈-甲苯溶液洗脱，最终获得25ml的洗脱液；
[0014]
步骤六、旋转蒸发干燥，加入1.5ml乙腈溶解过0.22μm有机膜过滤进行uplc-ms分析，标准曲线制作过程中，纯甲醇和空白雍菜样品中制备6种浓度水平(1、5、10、20、50和100μg/l)的标准储备混合物溶液，分别获得雍菜的线性方程。
[0015]
优选的，所述试验用鱼为吉富罗非鱼。
[0016]
优选的，4组试验中每组3个平行，由于2μg/l及以上浓度的灭多威会对罗非鱼肝抗氧化系统造成伤害，且200μg/l灭多威尚未达到罗非鱼致死浓度，将浓度设置为0、2、20、200μg/l。
[0017]
优选的，色谱条件为：色谱柱采用c18柱(2.1mm
×
100mm，1.7μm)。
[0018]
优选的，所述雍菜的线性方程为y＝951.1x+1528.6(r2＝0.9938)，y＝921.5x+1208.4(r2＝0.9954)。
[0019]
优选的，所述流动相a与流动相b分别按照9:1，1:9，5:5，9:1，9:1分别洗脱2.5，0.5，0.5，0.5，1.5min。
[0020]
与现有技术对比，本发明具备以下有益效果：本发明所述的降解水体中灭多威的浮床植物，罗非鱼的生长速度随着水体中灭多威浓度的上升而降低。受灭多威污染可致罗非鱼肝脏氧化压力增大，sod、cat和gsh的活性发生变化，雍菜可通过机体吸收有效降低养殖水体中灭多威的含量，对受灭多威污染水体中tn、nh4+-n、no3
--
n、no2
--
n等具一定的净化作用，并可减轻罗非鱼肝脏的氧化应激，水体种植雍菜可有效减轻灭多威对水体的污染，保证鱼类的生长。
具体实施方式
[0021]
下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
[0022]
一种降解水体中灭多威的浮床植物，于养殖池塘中的浮床上种植浮床植物，验证养殖池塘中的浮床上种植浮床植物对灭多威吸收有效性包括以下步骤：
[0023]
步骤一、试验用鱼暂养7天后，选择规格为20
±
2g/尾的健康吉富罗非鱼，养殖于室内循环流水养殖系统，每个养殖单元体积为100cm
×
60cm
×
50cm，每个单元中放入罗非鱼30尾，共计360尾；
[0024]
步骤二、试验包括4组，其中：
[0025]
a组：控制组，水面10％面积的雍菜+0μg/l灭多威；
[0026]
b组：水面10％面积的雍菜+2μg/l灭多威；
[0027]
c组：水面10％面积的雍菜+20μg/l灭多威；
[0028]
d组：水面10％面积的雍菜+200μg/l灭多威)；
[0029]
试验期间保持连续充氧，水温、溶解氧、ph等水质指标符合渔业水质标准，每天换水1/3，计算并补充1/3水中的灭多威，投喂量按罗非鱼养殖标准进行，每隔10天称量一次体重，并对投喂量(3％-5％)做相应调整；
[0030]
步骤三、在试验开始后的14、28、42、56天采集水样，分析水体中灭多威、总氮(tn)、氨氮(nh4+-n)、亚硝酸盐氮(no2
--
n)和硝酸盐氮(no3
--
n)的含量，采样时间在10:00左右；
[0031]
步骤四、灭多威采用watersxevotmtq进行含量测定，并采用masslynx4.1进行分析，流动相a为0.1％甲酸水溶液，流动相b为乙腈进行梯度洗脱(按a:b＝9:1，1:9，5:5，9:1，9:1分别洗脱2.5，0.5，0.5，0.5，1.5min)，流速为0.3ml/min，柱温30℃，其他水质指标按水和废水监测分析方法进行，其中tn采用过硫酸钾氧化-紫外分光光度法测定，nh4+-n采用纳氏试剂光度法测定，no2
--
n采用n-(1-萘基)-乙二胺光度法测定，no3
--
n采用酚二磺酸光度法测定；
[0032]
步骤五、第14、28、42天采集雍菜叶、根和茎部位，每个部位2.5g，平皿称重减压烘干添加乙腈采用spe浓缩柱浓缩，将na2so4转移至tpt墨盒(cleanettptcartridge)中对样本进行前处理，用0.05ml乙腈-甲苯(体积比3:1)对spe柱进行活化，每次用5ml乙腈-甲苯溶液洗脱，最终获得25ml的洗脱液；
[0033]
步骤六、旋转蒸发干燥，加入1.5ml乙腈溶解过0.22μm有机膜过滤进行uplc-ms分析，标准曲线制作过程中，纯甲醇和空白雍菜样品中制备6种浓度水平(1、5、10、20、50和100μg/l)的标准储备混合物溶液，分别获得雍菜的线性方程。
[0034]
试验用鱼为吉富罗非鱼。
[0035]
4组试验中每组3个平行，由于2μg/l及以上浓度的灭多威会对罗非鱼肝抗氧化系统造成伤害，且200μg/l灭多威尚未达到罗非鱼致死浓度，将浓度设置为0、2、20、200μg/l。
[0036]
色谱条件为：色谱柱采用c18柱(2.1mm
×
100mm，1.7μm)。
[0037]
所述雍菜的线性方程为y＝951.1x+1528.6(r2＝0.9938)，y＝921.5x+1208.4(r2＝0.9954)。
[0038]
流动相a与流动相b分别按照9:1，1:9，5:5，9:1，9:1分别洗脱2.5，0.5，0.5，0.5，1.5min。
[0039]
需要说明的是，本次试验中，a组的雍菜叶灭多威浓度大于0μg/l，原因可能是灭多威具有挥发性，从其他灭多威处理组中转移到了雍菜叶上。养殖系统中的灭多威浓度大于初始浓度，可能是因为雍菜吸收了水中的灭多威导致换水时补充的灭多威量大于换掉的水中的灭多威量。
[0040]
由于本试验在3月份的室内进行，缺少光照和通风，温度较低，雍菜生长较慢，使灭
多威不易被吸收和降解。接下来可以进行实地研究，验证在光照、通风和其他温度条件下雍菜对灭多威的处理效果。灭多威作为一种杀虫剂，可以保护雍菜免受虫害，接下来可以研究雍菜吸收了水中灭多威后的抗虫效果。本试验结果发现雍菜影响了罗非鱼肝脏抗氧化系统，但影响的的机理和效果还不清楚，需要进一步研究。
[0041]
许多国家和地区均制定了水体中灭多威残留限量标准，其中美国规定饮用水中灭多威的安全限量为200μg/l；欧盟规定饮用水中杀虫剂残留的限量为0.1μg/l；中国的《食品安全国家标准-食品中农药最大残留限量》(gb2763-2016)中规定灭多威在桑枝、荷叶等植物中的最大残留限量为19.12μg/kg，且灭多威的adi为20μg/kg。在实际应用时用于降解灭多威的雍菜可能对人体健康不利，需将吸收了灭多威的雍菜进一步处理，对水产养殖领域生产的雍菜等经济蔬菜进行定期抽检，防止灭多威浓度高于adi。
[0042]
就本试验的结果而言，利用浮床种植雍菜是一种适宜池塘养殖水体净化灭多威的办法。
[0043]
首先，种植雍菜能部分降低各组水体中氮素含量进而改善水体富营养化状况，其效果在种植42天后效果更为明显。
[0044]
其次，种植雍菜能够通过减少水中的灭多威浓度来保障鱼类的生长。通过表1可见，灭多威的浓度越高对罗非鱼生长的抑制越强。罗非鱼的生长速率随着灭多威浓度的提高(0μg/l～200μg/l)由3.06
±
0.02a降低到2.83
±
0.08b、饲料转化比由1.06
±
0.01b升高到1.27
±
0.06a。但雍菜能将水中的灭多威吸收在身体各个部位，减少水中的灭多威浓度来在一定程度上保障鱼类的生长。
[0045]
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。