纯化他克莫司的方法

专利名称：纯化他克莫司的方法
专利说明纯化他克莫司的方法 本发明涉及纯他克莫司和用吸附树脂纯化大环内酯他克莫司的方法。
相关申请本申请要求2004年12月22日提交的美国临时申请系列号60/638,628和2004年12月23日提交的美国临时申请系列号60/638,815的权益，它们的内容通过全文引用结合到本文中。
背景技术：
大环内酯是具有作为取代基的一个或多个脱氧糖的多元内酯环。他克莫司(FK 506)是大环内酯抗生素，它也是一种免疫抑制剂。据报道，他克莫司对T淋巴细胞具有选择抑制作用，比环孢素更有效。他克莫司通常经发酵得到。这样得到的他克莫司往往含有可经各种方法例如高压液相色谱(HPLC)检测出的几种杂质。不希望在药用化合物中存在杂质，许多有管辖权的健康当局，例如美国的食品与药品管理局，已经确立涉及药物中杂质的可接受水平的指引。对减少任何药物中杂质水平的方法的需要及其商业效用是不言而喻的。美国专利4,894,366号、6,576,135号、6,881,341号和6,492,513号公开了他克莫司的纯化方法。发明人(Fujisawa)的片剂以品名PROGRAF上市。分析和发现PROGRAF片剂含有几种杂质。该片剂的杂质范围概述于表1。
表1 因此，需要具有比以往所达到纯度更高的纯度的他克莫司，还需要针对他克莫司纯化的更有效的方法。
发明概述在一个实施方案中，本发明涉及经HPLC测定杂质总含量少于约0.50％(面积)，优选少于约0.16％(面积)的他克莫司。在另一个实施方案中，本发明涉及经HPLC测定具有少于约0.06％(面积)，优选少于约0.02％(面积)的子囊霉素的他克莫司。在另一个实施方案中，本发明涉及经HPLC测定具有少于约0.07％(面积)，优选少于约0.05％(面积)的二氢他克莫司的他克莫司。在另一个实施方案中，本发明涉及经HPLC测定具有少于约0.02％(面积)的杂质RRT1.19的他克莫司。在另一个实施方案中，本发明涉及经HPLC测定具有少于约0.12％(面积)，优选少于约0.02％(面积)的杂质RRT0.60的他克莫司。在另一个实施方案中，本发明涉及经HPLC测定具有少于约0.12％(面积)，优选少于约0.02％(面积)的杂质RRT0.83的他克莫司。在另一个实施方案中，本发明涉及经HPLC测定具有少于约0.08％(面积)，优选少于约0.02％(面积)的杂质RRT1.45的他克莫司。在另一个实施方案中，本发明涉及经HPLC测定具有少于约0.06％(面积)，优选少于约0.02％(面积)的任何个别杂质的他克莫司。在一个实施方案中，本发明提供一种纯化他克莫司的方法。该方法包括提供他克莫司的装填料，将他克莫司装填料装填至吸附树脂床上，用含有THF和/或乙腈和水的洗脱液洗脱装填料和床，以得到流出液，收集流出液的主要流分，从主要流分中回收他克莫司，使他克莫司结晶并进一步使其再结晶。以上方法所得到的他克莫司优选具有如上所述的杂质水平。他克莫司可来自任何来源。在另一方面，本发明涉及根据上述方法所制备的他克莫司。
发明详述
用于本文的术语“环境温度”指约0°-约40℃，优选约10℃-约35℃的温度。用于本文的术语“减少的压力”指小于约760mm Hg的压力。用于本文的术语“抗溶剂”指在环境温度下他克莫司于其中溶解最少的物质，通常是液体。用于本文的术语“杂质”指，至少依据用来测定保留时间的色谱仪的检出限，具有不同于他克莫司的保留时间的任何化合物。例如，可经下文所述的HPLC方法测定不同的保留时间。用于本文的术语“杂质RRT1.19”指在HPLC色谱图中出现于约1.19RRT的杂质。这种杂质是他克莫司的异构体。用于本文的术语“杂质RRT0.60”指在HPLC色谱图中出现于约0.60RRT的杂质。用于本文的术语“杂质RRT0.83”指在HPLC色谱图中出现于约0.83RRT的杂质。用于本文的术语“杂质RRT1.45”指在HPLC色谱图中出现于约1.45RRT的杂质。用于本文的术语子囊霉素和二氢他克莫司各指RRT0.95和RRT1.25，它们是他克莫司中的杂质，诸如下文所述的HPLC分析中，相对于他克莫司，其保留时间为约0.95和1.25。与液体的混合物和组合有关的用于本文的术语“体积百分比”和“体积百分率”(vol-％)指如下计算的体积分数(以物质A为例)vol-％A＝WtA×ρA/(WtA×ρ+WtB×ρB)其中WtA和WtB各为物质A和B的重量(克)，ρA和ρB各为物质A和B的密度(g/ml)。在一个实施方案中，本发明涉及经HPLC测定杂质总含量少于约0.50％(面积)，优选少于约0.16％(面积)的他克莫司。在另一个实施方案中，本发明涉及经HPLC测定具有少于约0.06％(面积)，优选少于约0.02％(面积)的子囊霉素的他克莫司。在另一个实施方案中，本发明涉及经HPLC测定具有少于约0.07％(面积)，优选少于约0.05％(面积)二氢他克莫司的他克莫司。在另一个实施方案中，本发明涉及经HPLC测定具有少于约0.02％(面积)的杂质RRT1.19的他克莫司。在另一个实施方案中，本发明涉及经HPLC测定具有少于约0.12％(面积)，优选少于约0.02％(面积)的杂质RRT0.60的他克莫司。在另一个实施方案中，本发明涉及经HPLC测定具有少于约0.12％(面积)，优选少于约0.02％(面积)的杂质RRT0.83的他克莫司。在另一个实施方案中，本发明涉及经HPLC测定具有少于约0.08％(面积)，优选少于约0.02％(面积)的杂质RRT1.45的他克莫司。在另一个实施方案中，本发明涉及经HPLC测定具有少于约0.06％(面积)，优选少于约0.02％(面积)的任何个别杂质的他克莫司。在一个实施方案中，本发明提供一种纯化他克莫司，即减少他克莫司中杂质含量的方法。该方法包括提供他克莫司的装填料，将他克莫司装填料装填至吸附树脂床上，用含有THF和/或乙腈和水的洗脱液洗脱装填料和床，从而得到流出液，收集流出液的主要流分，从主要流分中回收他克莫司，使他克莫司结晶并进一步再结晶。以上方法中得到的他克莫司的杂质水平优选如上所述。他克莫司可来自任何来源。在本发明的实施中，主要通过用洗脱液洗脱装填有他克莫司装填料的吸附树脂床，得到流出液，实现杂质的减少和分离。用于实施本发明的吸附树脂为本领域所知，并优选为交联非离子型苯乙烯-二乙烯苯材料，它可经化学修饰。丙烯酸型吸附树脂也是已知的。该吸附树脂具有高多孔结构，其具有可吸附并再解吸各种化学物质的表面。吸附和解吸受环境(例如所用的溶剂)的影响。在极性溶剂(例如水)的存在下，吸附树脂表现出疏水性。当采用非极性溶剂(例如烃)时，吸附树脂会表现出一定的极性。吸附树脂一般具有大网状结构，其表面积至少约300m2/g。用于实施本发明的吸附树脂包括可得自Rohm and Haas的AMBERLITEXAD树脂；只介绍几种XAD4、XAD7 HP、XAD16 HP、XAD761和XAD1180。也可用得自Mitsubishi的Diaion吸附树脂；只介绍几种HP10、HP20、HP21、HP30、HP40、HP50、SP800、SP825、SP850、SP875、SP205、SP206、SP207、HP1MG和HP2MG。AMBERLITEXAD1180是用于实施本发明的优选吸附树脂的实例。AMBERLITEXAD1180是大网状交联芳族聚合物。它是非离子、疏水、交联聚合物，其吸收性源于其取得专利的大网状结构(含有连续聚合物相和连续孔相)、高表面积和其表面的芳香性。表面积为500m2/g或更高。孔隙率为0.60ml/ml以上。PDS0205A-98年1月-1/2的产品数据单进一步给出关于该树脂的信息。可以在有机溶剂或在与水混合的有机溶剂中的他克莫司溶液，或以他克莫司吸附到吸附树脂装填部分的装填有他克莫司的装填部分提供装填料。当他克莫司装填料在装填到吸附树脂床之前被吸附(沉积)到吸附树脂的装填部分时，该吸附包括制备有机溶剂中的任选含有水的他克莫司溶液，将该溶液与一部分吸附树脂和水合并。吸附树脂可与用于制备床的树脂相同，或可为不同的吸附树脂。吸附树脂装填部分可为床的约33％-约50％体积。他克莫司在吸附树脂上的吸附基本完成后，从残余溶液中分离装填料。可经过滤分离。当用循环柱法制备装填料时，简单地从循环系统中分离出柱。用来制备从中装填或沉积装填料的溶液的有机溶剂，优选自四氢呋喃(THF)、丙酮、乙腈(ACN)、甲醇、乙醇、正丁醇、正丙醇、异丙醇、酯(例如乙酸乙酯)和偶极非质子溶剂，例如二甲基甲酰胺(DMF)。有机溶剂更优选THF、丙酮或CAN，最优选THF和CAN。水的加入降低溶剂水的比率，从而增加他克莫司在吸附树脂上的吸附。可在配有搅拌器的任何便利的容器(例如搅拌釜反应器)中混合他克莫司溶液装填料、吸附树脂的装填部分和水。作为实例，他克莫司溶液装填料可为约100g/l，而水的体积可为溶液体积的至少五倍。吸附树脂装填部分的总体积可约等于溶液的体积。为实现他克莫司在吸附树脂装填部分上的吸收，技术人员会懂得通过常规实验优化该比例。在该实施方案的后继步骤中，将装载有他克莫司的装载部分并置于制备好的湿润吸附树脂床。该床被限制于适用容器中。该床优选被限制于优选具有圆形横截面的柱中。为制备床，用水或水和溶剂(例如THF或ACN)的混合物使所需量的吸附树脂制成浆状。当床直径大时，水-溶剂组合是有利的。通过使洗脱液穿过装填料，接着穿过以流体与装填料连通且并置的吸附树脂床，分离他克莫司和杂质，借此减少他克莫司中的杂质水平，得到纯他克莫司。洗脱液任选含有其它有机溶剂，它选自在本方法的第一个步骤中用于溶解他克莫司的溶剂。在所提供的装填料为在有机溶剂或在与水合并的有机溶剂中的他克莫司溶液时，将该溶液喷入所制备的湿润吸附树脂床，使柱与他克莫司溶液流接触，将洗脱液引入流经并环绕吸附树脂装填部分的溶液流中，借此，他克莫司样品渐渐吸附到吸附树脂的装填部分上。在第一次洗脱后，该床可置于与第二个床相通的流体中，以便来自第一个床的流出液经第二个床洗脱。在第一个床和第二个床洗脱后，第二个床可并优选与第一个床分离(即破坏流体连通)，继续单独经第二个床洗脱。洗脱液任选是体积百分比约33比37的THF和水的混合物。可收集洗脱液部分，并用水稀释，其后可使其通过第三个床(柱)。任选可将额外的柱连接到该系统，并用额外量的水稀释，以得到更纯的产物。优选向最后一个柱加入额外量的水，以提高他克莫司在吸附树脂的吸附。洗脱液包括水和有机溶剂，例如THF、CAN及其混合物。优选的洗脱液基本上是THF和水的混合物，它具有约20％体积至约50％体积，最优选约31％体积至约40％体积的THF。当有机溶剂(例如甲醇、乙腈、丙酮或正丁醇)与THF/水洗脱液共用时，THF含量少于38％体积，优选介于约4-约38％体积。另一种优选洗脱液是乙腈和水的混合物，它具有约30％体积-约70％体积，最优选约40％体积-约65％体积的乙腈。当洗脱液是乙腈和水的混合物时，洗脱液还可含有相对于1份洗脱液约0.0005-约0.003份的磷酸。洗脱液以一定速度经装填料和与之并置的吸附树脂床洗脱出，该速度取决于床的总横截面积(与洗脱液流体垂直测出的)。流速(相对于横截面积)优选低于约25cm/小时，优选低于约15cm/小时。较低的洗脱速度会增加时间，但会提高分离效率。对于提高的分离效率而言的优选洗脱速度为约9cm/小时-约11cm/小时。可用任何方便的方法监测洗脱出流分的含量和组成。可通过下文所述的HPLC法进行他克莫司中的杂质、尤其是子囊霉素和二氢他克莫司的检测和定量。主要流分的收集尤其取决于柱装载量和洗脱液的组成和流速，以至最终分离出的产物经HPLC测定具有约0.1％(面积)或更低的子囊霉素。如需要，可通过任何常规方法(例如萃取、冷冻干燥、蒸发、加入抗溶剂)，从流出液分离出与杂质分离从而杂质水平减少的他克莫司。水、烷烃和环烷烃是有用的抗溶剂，其它的为本领域所知。可结合多个分离方法。例如抗溶剂与浓缩洗脱液相结合。优选的分离方法包括于70℃以下，优选60℃以下，优选760mm Hg或更低压力下，浓缩主要流分至其最初体积的约50％，借此得到浓缩的他克莫司流分。优选在浓缩前加入每升洗脱液约1-约10ml的磷酸，以稳定他克莫司。经浓缩的主要流分任选于环境温度中维持一段保留时间。当采用保留时间时，优选的保留时间为约1-4天。将水不混溶性溶剂(例如乙酸乙酯或二氯甲烷)和碱(例如氨溶液)加至经浓缩他克莫司流分，分离水不混溶性溶剂相，并浓缩。加入碱直到pH为约9或更低。可通过使已回收产物经历几种额外的处理例如结晶和再结晶，进一步减少杂质。他克莫司油状残余物的结晶包括在乙酸乙酯和环己烷中溶解他克莫司的油状残余物，加水以诱发他克莫司结晶，再回收结晶的他克莫司。在溶解步骤前，优选用乙酸乙酯稀释油状残余物并再次浓缩成油状残余物。优选逐滴加入水。结晶过程中的水:他克莫司一般为0.015kg-0.3kg水对1kg他克莫司。他克莫司的再结晶包括使他克莫司溶解于乙酸乙酯，浓缩该溶液直到得到油状残余物，使油状残余物溶解于乙酸乙酯，向溶液加入环己烷，加水以诱发他克莫司结晶，再回收结晶的他克莫司。优选可重复溶解和浓缩步骤。优选用活性碳处理溶液，以去除颜色和纤维。如上所述般浓缩。优选进一步干燥所得的他克莫司。在本发明的实施中，用三个串联柱进行最后的色谱法步骤，这导致子囊霉素和二氢他克莫司显著减少，而向溶剂混合物中经调节地加入水和经调节的结晶时间导致杂质RRT1.19显著减少。可用下文所述的HPLC法监测通过本发明方法所实现的他克莫司的纯化。在特定实施方案中，至少杂质子囊霉素和二氢他克莫司的水平被降低，得到高纯度的他克莫司。其它杂质的水平也被降低。该方法包括下列步骤制备带或不带吸附树脂(尤其是大网状树脂，例如AMBERLITEXAD1180和Diaion HP20)的装填部分、包含他克莫司溶液的他克莫司装填料；将装填料装载到可包含于容器尤其是柱中的湿润吸附树脂，尤其是AMBERLITEXAD1180和DiaionHP20；用洗脱液洗脱装填部分和吸附树脂，洗脱液是四氢呋喃(THF)和水的混合物，它具有约20％体积-约50％体积、尤其是约31％体积-约40％体积的THF，或是乙腈(ACN)和水的混合物，它具有约30％体积-约70％体积、最特别是约40％体积-约65％体积的乙腈；至少收集洗脱液的主要流分(中心流分)，它含有超过约60％、优选介于约60％-约90％的初始他克莫司(取决于初始纯度)；和任选通过例如浓缩主要流分，例如在酸的存在下减压浓缩主要流分，使具有减少量杂质的他克莫司从主要流分中分离；和任选回收这样得到的产物。所得产物经进一步如上所述般结晶和再结晶。所得的他克莫司优选经HPLC测定杂质总含量少于0.50％(面积)，最优选少于0.16％(面积)。所得的他克莫司优选经HPLC测定具有少于约0.06％(面积)、最优选少于约0.02％(面积)的子囊霉素。所得的他克莫司优选经HPLC测定具有少于约0.07％(面积)、最优选少于约0.05％(面积)的二氢他克莫司。所得的他克莫司优选经HPLC测定具有少于约0.02％(面积)的杂质RRT1.19。所得的他克莫司优选经HPLC测定具有少于约0.12％(面积)、最优选少于约0.02％(面积)的杂质RRT0.60。所得的他克莫司优选经HPLC测定具有少于约0.12％(面积)、最优选少于约0.02％(面积)的杂质RRT0.83。所得的他克莫司优选经HPLC测定具有少于约0.08％(面积)、最优选少于约0.02％(面积)的杂质RRT1.45。所得的他克莫司优选经HPLC测定具有少于约0.06％(面积)、最优选少于约0.02％(面积)的任何个别杂质。本发明提供由以上方法所得的他克莫司。
实施例所采用的色谱条件柱ZORBAX SB-C18 75×4.6mm；3.5μm前置柱SymmetryShield RP 183.9×20mm；5μm洗脱液A量取200ml乙腈加入到2000ml容量瓶，再用蒸馏水稀释体积至2000ml总体积。然后，加入100μl 50％乙酸。
B加100μl50％乙酸至2000ml乙腈。
梯度表
流速2.3ml/min检测波长210nm注入体积20μl样品溶剂乙腈柱单元温度60℃分析时间27min他克莫司的保留时间约14min检出限少于0.01％(面积)定量限度少于0.02％(面积)。
杂质子囊霉素(RRT0.95)、二氢他克莫司(RRT1.25)和杂质RRT1.19的保留时间是相对于他克莫司计的，并相对于色谱图中的全部峰的面积以面积％表示。
目前可得到的典型HPLC装置的检测和定量限度各少于0.01％(面积)和少于0.02％(面积)。
实施例
下列非限制性实施例仅仅说明本发明的优选实施方案，不应被解释为限制本发明，本发明的范围由所附权利要求书限定。
实施例1
经层析法和几个结晶步骤纯化他克莫司原料。用以上“实施例所采用的色谱条件”中所述的分析型HPLC法进行纯度分析。原料含有0.16％(面积)的子囊霉素、1.56％(面积)的杂质RRT1.19和0.46％(面积)的二氢他克莫司。对初始物质的分析得到95％质量的纯度。用本发明的方法纯化后，终产物含有0.02％(面积)的子囊霉素、0.02％(面积)的杂质RRT1.19和0.05％(面积)的二氢他克莫司。其它杂质的含量不超过0.02％(面积)，用本发明方法所得的他克莫司的纯度为99.84％(面积)。
层析步骤
AMBERLITEXAD1180吸附树脂用于层析法。制备三个层析柱(40cm直径，1m柱高和约100升湿润吸附树脂)。将3812g量的他克莫司原料(其中3623g是活性物质)溶解于30升丙酮。将33升量的树脂AMBERLITEXAD1180加至他克莫司溶液。边搅拌，边缓慢加入180升量的水至他克莫司溶液:树脂混合物。当完成加水时，经过滤收集吸附树脂装填料。将所收集的装填料作为一层装载至湿润吸附树脂床顶部。总树脂体积约为100升。先用约700升四氢呋喃/水(34％体积THF)洗脱液洗脱柱。第一次洗脱后，将第二个柱与第一个柱相连。继续用约1400升THE/水(34％体积THE)洗脱液洗脱。使第一个柱与第二个柱分开，继续用约1200升THE/水(34％体积THF)洗脱液洗脱。收集各有20升体积的流分。使0.5升量的水与每一流分混合，得到经稀释的流分。使经稀释流分通过第三个柱，他克莫司吸附于第三个柱的树脂上。用约1800升THE/水(34％体积THF)洗脱液从第三个柱上洗脱他克莫司。收集各有20升体积的流分，用上文“实施例所采用的色谱条件”中所述的分析型HPLC法分析几个流分。再合并各适当流分。然而，应该注意到，在合并各流分前，可合并预试流分，例如各适当流分中的10ml，并用HPLC分析法分析。如果对预试合并物的HPLC分析得出高于0.02％(面积)的子囊霉素浓度和/或高于0.04％(面积)的二氢他克莫司浓度，那么合并流分的数量应当改进，以提供所需的高纯度，因为在合并各流分期间得到所需的高纯度会带来高纯度的终产物。合并的主要流分(约500升)与100ml85％磷酸混合，并减压浓缩到约200升体积。将浓缩物冷却至环境温度，向浓缩物加入50升水、100升乙酸乙酯和200ml浓氨溶液。分离乙酸乙酯相(约75升)，减压浓缩成油状残余物。
主要流分的结晶
用10升乙酸乙酯稀释油状残余物，再次减压浓缩成油状残余物。加热温度为约60℃，预计沸点为20-40℃。重复稀释-浓缩步骤两次。经减压蒸发少量的样品，确定油状残余物的固体含量，得到油状残余物的固体含量为1329g。用乙酸乙酯将油状残余物稀释至约2525g，将7970ml环己烷加至溶液。将用温度循环器将温度保持于25℃。向溶液中快速加入10.6ml量的水。用3小时向溶液中加入18.6ml量的水，启动结晶。搅拌45分钟后，滤出晶体，用1600ml环己烷洗涤。经洗涤晶体在70℃下干燥12小时，得到质量为1250g的干燥晶体。
再结晶
将1250g量的他克莫司溶解于7.5升乙酸乙酯。使溶液减压浓缩成油状残余物。重复稀释-浓缩步骤两次。将油状残余物溶解于3750ml乙酸乙酯，用12.5g活性碳处理。30℃下用活性碳处理30分钟。过滤悬液，用125ml乙酸乙酯洗涤滤饼。减压浓缩经过滤溶液，用乙酸乙酯稀释到2375g。经1.5小时将6.25升量的环己烷加至他克莫司溶液。经2小时向溶液加入27.5ml量的水。经2小时向溶液中加入246ml量的水，启动结晶。冷却悬液至8℃，8℃下经1小时向悬液加入1.25升量的环己烷。再于8℃下搅拌悬液12小时。滤出晶体，并用环己烷悬浮两次。用来悬浮的环己烷的体积为2.5升。40℃下，减压干燥12小时，并在约25℃下干燥24小时。整个干燥过程中使用氮气入口。结晶步骤有效地降低产物中的杂质RRT1.19含量。终产物的质量为1180g。所得他克莫司的纯度经HPLC测定为99.84％(面积)，即总杂质含量经HPLC测定为0.16％(面积)。终产物含有经HPLC测出的0.02％(面积)的子囊霉素、经HPLC测出的0.05％(面积)的二氢他克莫司和经HPLC测出的0.02％(面积)的杂质RRT1.19、经HPLC测出的0.02％(面积)的RRT0.83、经HPLC测出的少于0.02％(面积)的RRT0.60、经HPLC测出的少于0.02％(面积)的RRT1.45、经HPLC测出的0.02％(面积)的RRT0.25和经HPLC测出的少于0.02％(面积)的任何个别杂质。杂质范围概述于表2。
表2 如果结晶后终产物中的杂质RRT1.19浓度大于所希望的，可进行一个或更多个额外的结晶步骤除去该杂质。
权利要求
1.他克莫司，其杂质总含量经HPLC测定少于约0.50％(面积)。
2.权利要求1的他克莫司，经HPLC测定其杂质总含量少于约0.16％(面积)。
3.他克莫司，经HPLC测定其具有少于约0.06％(面积)的子囊霉素。
4.权利要求3的他克莫司，经HPLC测定其具有少于约0.02％(面积)的子囊霉素。
5.他克莫司，经HPLC测定其具有少于约0.07％(面积)的二氢他克莫司。
6.权利要求5的他克莫司，经HPLC测定其具有少于约0.05％(面积)的二氢他克莫司。
7.他克莫司，经HPLC测定其具有少于约0.02％(面积)的杂质RRT 1.19。
8.他克莫司，经HPLC测定其具有少于约0.12％(面积)的杂质RRT 0.60。
9.权利要求8的他克莫司，经HPLC测定其具有少于约0.02％(面积)的杂质RRT 0.60。
10.他克莫司，经HPLC测定其具有少于约0.12％(面积)的杂质RRT 0.83。
11.权利要求10的他克莫司，经HPLC测定其具有少于约0.02％(面积)的杂质RRT 0.83。
12.他克莫司，经HPLC测定其具有少于约0.08％(面积)的杂质RRT 1.45。
13.权利要求12的他克莫司，经HPLC测定其具有少于约0.02％(面积)的杂质RRT 1.45。
14.他克莫司，经HPLC测定其具有少于约0.06％(面积)的任何个别杂质。
15.权利要求14的他克莫司，经HPLC测定其具有少于约0.02％(面积)的任何个别杂质。
16.一种纯化他克莫司的方法，它包括a)提供他克莫司的装填料；b)将他克莫司装填料装填至吸附树脂床上；c)用含有THF、乙腈或它们的组合和水的洗脱液洗脱装填料和床，得到流出液；d)收集流出液的主要流分；e)从主要流分中回收他克莫司；f)使他克莫司结晶；和g)使他克莫司再结晶。
17.权利要求16的方法，其中的吸附树脂是AMBERLITEXAD1180。
18.权利要求16的方法，其中的装填料是在有机溶剂或在与水混合的有机溶剂中的他克莫司溶液。
19.权利要求16的方法，其中的装填料是吸附于吸附树脂的装填部分上的他克莫司。
20.权利要求19的方法，其中的吸附包括制备他克莫司在有机溶剂中的溶液，将该溶液与一部分吸附树脂和水合并，再从残存溶液中分离所吸附的装填料。
21.权利要求20的方法，其中的分离是经过滤分离。
22.权利要求20的方法，其中的有机溶剂选自四氢呋喃(THF)、丙酮、乙腈(ACN)、甲醇、乙醇、正丁醇、正丙醇、异丙醇、酯(例如乙酸乙酯)和偶极非质子溶剂，例如二甲基甲酰胺(DMF)。
23.权利要求22的方法，其中的有机溶剂是THF、丙酮或乙腈。
24.权利要求16的方法，其中的步骤c)中的洗脱液含有至少一种有机溶剂。
25.权利要求16的方法，其中的吸附树脂床被限于柱中。
26.权利要求16的方法，其中在步骤d)之前，该床与第二个吸附树脂床建立流体传递。
27.权利要求26的方法，其中使第二个床与第一个床分离。
28.权利要求26的方法，还包括将其它吸附树脂床连接到该系统。
29.权利要求28的方法，其中向最后的柱加入额外量的水。
30.权利要求的方法16，其中步骤e)中的分离包括在磷酸存在下，在约70℃或更低的温度，约760mmHg或更低压力下，浓缩主要流分，加入水不混溶性溶剂和碱，分离水不混溶性溶剂相并浓缩它。
31.权利要求30的方法，其中水不混溶性溶剂是乙酸乙酯或二氯甲烷。
32.权利要求30的方法，其中的碱是氨溶液。
33.权利要求16的方法，其中步骤f)中的结晶包括使他克莫司的油状残余物溶解于乙酸乙酯和环己烷，加水以诱发他克莫司结晶，再回收结晶的他克莫司。
34.权利要求33的方法，其中在溶解步骤之前，用乙酸乙酯稀释油状残余物，并再次浓缩成油状残余物。
35.权利要求16的方法，其中步骤g)中的再结晶包括使他克莫司溶解于乙酸乙酯，浓缩该溶液直到得到油状残余物，使油状残余物溶解于乙酸乙酯，向溶液加入环己烷，加水以诱发他克莫司结晶并回收他克莫司。
36.经权利要求16的方法得到的他克莫司。
全文摘要
本发明提供纯他克莫司和纯化他克莫司的方法，其中，将他克莫司的装填料与湿润吸附树脂床并列安放，装填料和床经含有THF、乙腈或它们的组合和水和任选至少一种其它有机溶剂的洗脱液洗脱，收集洗脱液的中心流分，并收集他克莫司，进一步使他克莫司结晶和再结晶，直到达到杂质水平降低。
文档编号B01D15/26GK101087796SQ200580044188
公开日2007年12月12日 申请日期2005年12月22日 优先权日2004年12月22日
发明者V·克里, A·乔尔瓦西, I·梅尔策尔, A·西蒙 申请人:特瓦药厂私人有限公司