专利名称：用于电泳后凝胶dna回收的电泳槽的制作方法
技术领域：
本实用新型涉及生物技术领域的实验设备，尤其涉及一种用于电泳后凝胶DNA回 收的实用型微小电泳槽装置。
背景技术：
DNA的回收是分子生物学和基因工程实验中一个常见而又十分重要的实验操作步 骤，常常用于PCR扩增产物、DNA片段限制性酶切产物、标记后核酸探针产物的回收等。目 前有专门用于DNA回收的商业化DNA胶回收试剂盒，先用溶胶液将琼脂糖凝胶融化，再将溶 胶混合液转移到离心吸附柱内的硅胶吸附膜上，高速离心后用洗脱液将DNA片段从硅胶膜 上洗脱下来即得到回收的DNA溶液，此方法使用成本较高。冻融法的原理主要是通过反复 冻融操作破坏凝胶结构，从而使凝胶中的DNA能够最大程度地被释放出来，其缺点是需要 超低温冰箱或液氮等快速制冷设备。其它还有透析膜法、玻璃珠法、电洗脱法和低熔点琼脂 糖凝胶回收法等方法，这些方法操作起来相对较为繁琐、所需的有些耗材在常规实验室中 也不常见、DNA回收率也不十分理想，不利于在各个分子生物学实验室中广泛使用。
实用新型内容本实用新型的目的在于克服现有DNA回收存在的上述问题，提供一种用于电泳后 凝胶DNA回收的电泳槽。本实用新型可同时对多个DNA样品进行回收，适用性广、使用器材 简单、操作简便易行、实验成本低廉、DNA回收彻底，可在分子生物学研究中广泛推广使用， 具有很好的应用前景。为实现上述目的，本实用新型采用的技术方案如下一种用于电泳后凝胶DNA回收的电泳槽，包括电泳槽体，其特征在于还包括透明 基座，所述电泳槽体设置在透明基座上，电泳槽体的槽底开有用于固定胶条的凹槽，电泳槽 体的槽底设置有电极，透明基座上设置有与电极连接的接线柱。所述电泳槽体为一个或多个。所述电极为正极和负极，透明基座上设置有与正极连接的正极接线柱和与负极连 接的负极接线柱。采用本实用新型的优点在于一、采用本实用新型进行DNA回收具有适用性广、使用器材简单、操作简便易行、 实验成本低廉、DNA回收彻底等优点，可在分子生物学研究中广泛推广使用，具有很好的应 用前景。二、本实用新型的电泳槽体可以为一个或多个，可同时对一个或多个的DNA样品 进行回收，提高了回收效率。三、采用本实用新型，可回收琼脂糖凝胶电泳后任何大小的DNA片段，也可回收聚 丙烯酰胺凝胶中的DNA。
图1为本实用新型结构示意图图中标记为1、电泳槽体，2、透明基座，3、凹槽，4、电极，5、接线柱。
具体实施方式
一种用于电泳后凝胶DNA回收的电泳槽，包括电泳槽体1，还包括透明基座2，所述 电泳槽体1设置在透明基座2上，电泳槽体1的槽底开有用于固定胶条的凹槽3，电泳槽体 1的槽底设置有电极4，透明基座2上设置有与电极4连接的接线柱5。本实用新型中，电泳槽体1可以设置为一个或多个，每个槽体内工作时所需的电 泳缓冲液体积可在0. 5-1. Oml以内。电极4为正极和负极，透明基座2上设置有与正极连 接的正极接线柱和与负极连接的负极接线柱。以下以采用两个电泳槽体为例对本实用新型作展开说明在一块无色透明有机玻璃板为材料的基座内并排设置两个微小电泳槽体，基座 长度为6. Ocm-lO. Ocm,宽度为5. Ocm-lO. Ocm,高度为2. Ocm-4. 0cm。两个槽体的宽度尺 寸大小不同，目的是可使不同宽度的含目的DNA的凝胶条自由放入，其中左边的微小电 泳槽体的宽度可放入2个点样孔宽度的凝胶条，电泳槽体的长度为1. 5cm-2. 0cm,宽度为 1. Ocm-1. 5cm,高度为1. 5cm-3. Ocm0电泳槽底部设置有用以固定胶条的小凹槽，其长度 为1. Ocm-1. 5cm、宽度为0. 4cm_0· 6cm、高度为0. 2cm_0· 3cm，微小电泳槽体的左端装有钼 金丝电极和接线柱，右端装有钼金丝电极和接线柱。右边的微小电泳槽体的宽度可放入 3个点样孔宽度的凝胶条，电泳槽体的长度为1. 5cm-2. 0cm,宽度为1. 4cm_2. 0cm,高度为 1. 5cm-3. 0cm,电泳槽体的底部同样有一用以固定胶条的小凹槽，其长度为1. 4cm-2. 0cm、宽 度为0. 4cm-0. 6cm、高度为0. 2cm-0. 3cm，微小电泳槽体的左端装有钼金丝电极和接线柱， 右端装有钼金丝电极和接线柱。应用本实用新型可同时对2个DNA样品进行回收，其原理 是使DNA在电流的作用下从切割的凝胶条中彻底游离出来并进入电泳缓冲液，缓冲液经氯 仿/异戊醇抽提并高速离心后得上清水相，再往上清水相中加入等体积异丙醇和适量3M醋 酸钠(PH5. 2)进行DNA沉淀，沉淀经冷无水乙醇洗涤后用30 μ L-50 μ L TE溶解，即得到回 收的DNA片段。DNA回收按如下步骤进行1、含目的DNA的凝胶条切割DNA在浓度为0. 8 %左右凝胶电泳分离后用EB染料 染色，在紫外透照台上用干净刀片将含目的DNA的胶条割下。2、目的DNA和切割的凝胶条分离将切割后含目的DNA的凝胶条放入微小电极槽 体底部的凹槽中，加入0. 6mL 0. 5 X TBE电泳缓冲液，采用IOV低电压进行电泳，由此将DNA 从切割的凝胶条中彻底游离出来并进入电泳缓冲液。3、切割的凝胶条中残余电泳缓冲液的收集为了进一步收集电泳槽体底部小凹 槽内凝胶条中包含的残余电泳缓冲液(该部分缓冲液可溶解少量DNA)，将胶条从凹槽中 取出并放入一个底部穿有小孔的0. 5mL Eppendorf管中，再套入1. 5mLEppendorf管内， 12000rpm高速离心3分钟后凝胶通过小孔而被破碎，凝胶中残余的电泳缓冲液和破碎的凝 胶将因高速离心而发生分层，吸取所产生的上清电泳缓冲液。4、电泳缓冲液的合并将步骤⑵和步骤(3)收集的电泳缓冲液合并。
4[0023]5、氯仿/异戊醇抽提向步骤(4)收集的液体中加入等体积的氯仿/异戊醇进行 抽提，12000rpm高速离心10分钟取上清。6、DNA沉淀此步骤中反应体系体积越小沉淀效果越好，将步骤(5)所得液体平均 分配到2个Eppendorf管中，每管约0. 3mL，分别加入0. 3mL异丙醇和10 μ L-30 μ L 3Μ的醋 酸钠(ΡΗ5. 2)，颠倒数次混勻，4°C静置3小时沉淀DNA，12000rpm速度离心10分钟，去掉异 丙醇，分别加200 μ L的冷无水乙醇对2个Eppendorf管中的沉淀进行洗涤，12000rpm速度 离心5分钟，吸去乙醇。7,DNA溶解所有DNA沉淀在室温干燥后，共用30 μ L TF溶液溶解，即得到回收的 DNA，用0. 8%左右浓度琼脂糖凝胶进行电泳鉴定。显然，本领域的普通技术人员根据所掌握的技术知识和惯用手段，根据以上所述 内容，还可以作出不脱离本实用新型基本技术方案的多种形式，这些形式上的变换均在本 实用新型的保护范围之内。
权利要求一种用于电泳后凝胶DNA回收的电泳槽，包括电泳槽体(1)，其特征在于还包括透明基座(2)，所述电泳槽体(1)设置在透明基座(2)上，电泳槽体(1)的槽底开有用于固定胶条的凹槽(3)，电泳槽体(1)的槽底设置有电极(4)，透明基座(2)上设置有与电极(4)连接的接线柱(5)。
2.根据权利要求1所述的用于电泳后凝胶DNA回收的电泳槽，其特征在于所述电泳 槽体(1)为一个或多个。
3.根据权利要求1或2所述的用于电泳后凝胶DNA回收的电泳槽，其特征在于所述 电极(4)为正极和负极，透明基座(2)上设置有与正极连接的正极接线柱和与负极连接的 负极接线柱。
专利摘要本实用新型公开了一种用于电泳后凝胶DNA回收的电泳槽，包括电泳槽体，还包括透明基座，所述电泳槽体设置在透明基座上，电泳槽体的槽底开有用于固定胶条的凹槽，电泳槽体的槽底设置有电极，透明基座上设置有与电极连接的接线柱。本实用新型可同时对多个DNA样品进行回收，适用性广、使用器材简单、操作简便易行、实验成本低廉、DNA回收彻底，可在分子生物学研究中广泛推广使用，具有很好的应用前景。
文档编号B01D57/02GK201669062SQ20102017940
公开日2010年12月15日 申请日期2010年5月5日 优先权日2010年5月5日
发明者万东海, 代娟, 伏秦超, 梁梓, 熊俊如, 胡建平, 范晶, 黄明远 申请人:乐山师范学院