一种ELISA芯片及其使用方法与流程

本发明涉及一种elisa芯片及其使用方法，属于生物检测技术领域。

背景技术：

elisa是一种免疫测定(immunoassay，ia)，基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，由此进行定性或定量分析。由于各种抗原成份，包括小分子的半抗原，均可用以制备特异性的抗血清或单克隆抗体，利用此抗体作为试剂就可检测标本中相应的抗原，因此免疫测定的应用范围极广。

但是传统的elisa芯片的反应管都是直筒式，抗原或抗体的包被区域较小，并且传统的是需要借助第三方加液器，从上部向反应管中添加液体，然后再从上部用第三方加液器将液体取走，这样不仅操作繁琐，还会导致废液处理不干净，影响检测效果。

技术实现要素：

为解决上述技术问题，本发明提供一种elisa芯片及其使用方法，在芯片下部设置微流道，将液体从芯片下部通过泵抽走，且通过上述设置后，可以进一步将反应器设置成内部呈阶梯式的筒状结构，不仅能够达到增加抗原或抗体的包被面积，还能够起到减少外界光源对检测的影响。

本发明的第一个目的是提供一种elisa芯片，包括芯片本体，

所述的芯片本体包含相对设置的第一表面与第二表面，所述的第一表面与第二表面之间设有若干个反应器，所述反应器为第一表面向第二表面设置的盲孔；

所述的反应器包括同轴设置的第一圆柱段和第二圆柱段，第一圆柱段的内径小于第二圆柱段，所述第一圆柱段的顶面与第一表面重叠，为开口设置，并将开口设置为加样口；

所述第二表面设有微流道和出液口，所述的微流道与若干第二圆柱段底部相连通，且微流道一端与出液口相连接，出液口与泵进行连接，可以用过泵将反应器中的液体抽走。

进一步地，所述的第一圆柱段的直径为0.5～6mm。

进一步地，所述的第二圆柱段的直径为0.6～50mm。

进一步地，所述的第一表面采用不透明材料制备而成。进一步优选为黑色材料制成。

进一步地，所述的第二表面采用透明材料制备而成。第一表面与第二表面的材料设置，有利于整个芯片的光路采集。

进一步地，所述的反应器在芯片上按照线性排列。有利于自动加样设置。

进一步地，所述的微流道采用树形分布设置，所述的反应器设置在微流道的分支末端，所述的出液口设置在微流道的主干端。

本发明的第二个目的是提供所述的elisa芯片的使用方法，包括如下步骤：通过加样口向反应器中加入抗原、抗体、包被液、封闭液或洗涤液，然后通过微流道将反应或洗涤后的液体去除。

进一步地，所述方法具体包括如下步骤：

(1)用包被液将抗原稀释，通过加样口向反应器中加入抗原，包被0.5～12h；

(2)通过加样口向反应器中加入洗涤液，洗涤之后通过微流道将洗涤液去除，洗涤2～3次；

(3)通过加样口向反应器中加入封闭液，封闭一定时间，然后通过微流道将封闭液去除；

(4)通过加样口向反应器中加入待测样品或对照样品进行孵育；采用步骤(2)洗涤方法进行洗涤；

(5)通过加样口向反应器中加入酶标抗体进行孵育，然后采用步骤(2)洗涤方法进行洗涤；

(6)通过加样口向反应器中加入底物显色液，反应后加入终止液，然后进行判断。

本发明的有益效果是：

本发明在芯片下部设置微流道，将液体从芯片下部通过泵抽走，操作方便，降低操作风险，且通过上述设置后，可以进一步将反应器设置成内部呈阶梯式的筒状结构，不仅能够达到增加抗原或抗体的包被面积，还能够起到减少外界光源对检测的影响。

附图说明

图1为现有技术的反应器示意图；

图2为本发明芯片的结构示意图；

图3为本发明芯片反应器的结构示意图；

图4为本发明芯片第一表面示意图；

图5为本发明含有包被的抗原或抗体的反应器的示意图；

图6为本发明反应器光电检测示意图。

具体实施方式

下面结合附图和具体实施例对本发明作进一步说明，以使本领域的技术人员可以更好地理解本发明并能予以实施，但所举实施例不作为对本发明的限定。

实施例1：

结合附图2和3，本发明的一种elisa芯片，包括芯片本体1，芯片本体1包含相对设置的第一表面2与第二表面3，第一表面2与第二表面3之间设有若干个反应器4，反应器4为第一表面2向第二表面3设置的盲孔，在第一表面上采用开口设置，并将开口设置为加样口43；第二表面上为封口设置；反应器4包括同轴设置的第一圆柱段41和第二圆柱段42，第一圆柱段41的内径小于第二圆柱段42，第一圆柱段41的直径为0.5～6mm，第二圆柱段42的直径为0.6～50mm；第二表面3设有微流道5和出液口6，微流道5与若干第二圆柱段42的底部相连通，且微流道5一端与出液口6相连接，出液口6连接有泵，可以用过泵将反应器4中的液体抽走。

本发明的第一圆柱段和第二圆柱段的设置，不仅能够增加抗原或抗体的包被面积，还能够起到减少外界其他光源对检测结果的影响，参见附图6，如图6所示：普通的反应器不能够阻挡干扰光10，光信号检测器8不仅吸收到正常光源9发出的光，干扰光10也会被光信号检测器8吸收；而本发明的第一圆柱段的直径小于第二圆柱段，从侧面照射进来的干扰光10就会被第一圆柱段挡住，不能被光信号检测器8吸收到，能够起到屏蔽干扰的作用。

本发明第一表面2采用不透明的黑色材料制备而成，第二表面3采用透明材料制备而成，第一表面与第二表面的材料设置，有利于整个芯片的光路采集。

本发明的反应器4在芯片上按照线性排列。有利于自动加样设置。

本发明的微流道5采用树形分布设置，反应器4设置在微流道5的分支末端，出液口6设置在微流道5的主干端。

在使用时，本发明的芯片的使用方法，包括如下步骤：通过加样口向反应器中加入抗原、抗体、包被液、封闭液或洗涤液，然后通过微流道将反应或洗涤后的液体去除。

具体在采用间接法时，具体包括如下步骤：

(1)用包被液将抗原稀释，通过加样口向反应器中加入抗原，包被0.5～12h；

(2)通过加样口向反应器中加入洗涤液，洗涤之后通过微流道将洗涤液去除，洗涤2～3次；

(3)通过加样口向反应器中加入封闭液，封闭一段时间，然后通过微流道将封闭液去除；

(4)通过加样口向反应器中加入待测样品或对照样品进行孵育；采用步骤(2)洗涤方法进行洗涤；

(5)通过加样口向反应器中加入酶标抗体进行孵育，然后采用步骤(2)洗涤方法进行洗涤；

(6)通过加样口向反应器中加入底物显色液，反应后加入终止液，然后进行判断。

以上所述实施例仅是为充分说明本发明而所举的较佳的实施例，本发明的保护范围不限于此。本技术领域的技术人员在本发明基础上所作的等同替代或变换，均在本发明的保护范围之内。本发明的保护范围以权利要求书为准。