一种混合装置及二氢杨梅素纳米粒的制备方法

本发明涉及制备二氢杨梅素纳米粒的，尤其涉及一种混合装置及二氢杨梅素纳米粒的制备方法。

背景技术：

1、顺铂已被广泛用于治疗各种实体瘤，但它会诱导肾小管细胞的dna损伤、线粒体功能障碍和各种应激反应，从而限制其使用。到目前为止，顺铂引起肾损伤的机制尚不清楚，临床上也没有可靠的特异性治疗方法。研究表明，许多天然产物对顺铂诱导的急性肾损伤（aki）具有很强的保护作用。例如，柚皮苷可以通过抑制炎症反应和减少细胞凋亡来缓解顺铂诱导的肾功能不全。姜黄素可下调mincle的mrna表达和蛋白水平，降低inos的表达，减轻顺铂诱导的肾毒性。angaratine通过减轻氧化应激、炎症和细胞凋亡以及上调nrf2和抗氧化剂来预防顺铂诱导的大鼠aki。天然化合物具有较少的副作用，并且可能在预防和治疗顺铂诱导的aki方面具有巨大的潜力。因此，研究天然化合物对顺铂肾毒性的保护作用是必要和有意义的。

2、壳聚糖（cs）是一种由甲壳素脱乙酰基合成的无毒聚合物。该聚合物具有良好的生物相容性和生物降解性。三聚磷酸钠（tpp）是一种具有多价阴离子的无毒盐，可以与cs等阳离子多糖交联形成离子交联网络，并从水溶液中沉淀出粒径在纳米至微米范围内的凝胶纳米颗粒，其结构由液体相互渗透的聚合物网络支撑，其中药物分子可以被截留在颗粒的间隙或表面。壳聚糖纳米粒子可以有效控制药物释放，防止药物被粘膜酶和生物液降解。作为纳米载体，cs-tpp复合材料已被广泛用于封装纯化合物，如姜黄素、表没食子儿茶素-3-没食子酸盐和其他多酚类化合物。

3、二氢杨梅素（dmy）是一种天然的二氢黄酮醇化合物，从粗齿蛇葡萄的嫩茎和叶中分离出来。现代研究表明dmy具有许多有益的药效，包括抗菌、抗炎、抗癌、抗氧化和抗糖尿病活性。此外，已经证明dmy可以通过调节mir-199b-3p来影响nrf2途径，从而减轻lps诱导的急性损伤，并减轻败血症aki。然而dmy相关的主要缺点是化学不稳定性和生物利用度差，其中大鼠的生物利用率约为4.02%，人类的生物利用度可能低于10%，这是限制dmy药理作用和临床应用的决定性因素，所以本方案考虑利用cs-tpp复合材料制备二氢杨梅素纳米粒。

4、在制备二氢杨梅素纳米粒的过程中需要进行液体混匀，现有技术中常利用磁力搅拌器实现液体混匀，磁力搅拌器利用磁场和漩涡的原理，将沉入搅拌子的液体容器放于磁力搅拌器的底座上，当磁力搅拌器通电，底座附近产生一个旋转的磁场促使搅拌子运动，进而使容器内的液体形成漩涡，达到搅拌混匀的目的。搅拌子具有不同尺寸及不同形状，磁力搅拌器需要根据液体容器的形状、液体粘稠度、液体量等条件选用配套的搅拌子，若搅拌子与磁力搅拌器不配套，那么搅拌时会产生不同步运转，出现跳磁现象；另外，使用一段时间后，搅拌子会逐渐退磁，影响液体混匀效果。所以本方案考虑更换一种液体混匀方式。

技术实现思路

1、为解决现有技术不足，本发明提供一种混合装置及二氢杨梅素纳米粒的制备方法，利用混合装置实现二氢杨梅素纳米粒制备过程中的液体混合，得到cs-tpp包封的二氢杨梅素纳米粒。

2、为了实现本发明的目的，拟采用以下方案：

3、一种混合装置，包括托盘、放置架、夹持机构、液体注入机构、密封机构、驱动机构。

4、驱动机构设于支撑架，密封机构两端转动连接于支撑架，密封机构其中一端连接驱动机构，驱动机构用于往复摆动密封机构；

5、托盘顶部阵列有一排圆形槽，其内用于放置敞口容器；

6、放置架包括放置板和设于放置板两端的连杆，放置板顶部设有凹槽，其内用于放置托盘，连杆顶部连接于密封机构；

7、夹持机构包括两个对称设于放置板两端的升降组件和两个对称设于放置板两侧的夹持件，放置板两端各设置一个竖板，放置板两侧设有若干套管，升降组件设于竖板外壁，包括第一升降杆和设于第一升降杆顶部的倒u型板，倒u型板两侧设有第一齿条，夹持件包括转动杆和多个夹板，转动杆穿设于套管内，转动杆两端各设置一个第一齿轮，第一齿轮与对应的第一齿条啮合，多个夹板通过支杆连接于转动杆，夹板用于夹持对应的敞口容器，液体注入机构用于给敞口容器注入液体，密封机构用于密封敞口容器。

8、进一步的，密封机构包括承载板和多个密封件，支撑架顶部设有两个轴承座，承载板两端转动连接于轴承座，密封件包括第二升降杆和连接于第二升降杆底部的密封盖，多个第二升降杆阵列于承载板上，密封盖用于封闭对应的敞口容器。

9、进一步的，驱动机构包括滑轨、第二齿条、第二齿轮，承载板其中一端贯穿轴承座后连接第二齿轮，滑轨固定设于支撑架，第二齿条设于滑轨顶部，滑轨用于往复移动第二齿条，第二齿条与第二齿轮啮合。

10、进一步的，连杆设为螺杆，连杆底部穿过放置板后通过两个螺母固定，连杆顶部穿过承载板后通过两个螺母固定。

11、进一步的，密封盖侧壁设有多个导通孔，导通孔延伸至密封盖内部再向下贯穿密封盖，液体注入机构包括多个液体存储容器、多个阀门和多个液体流通管，液体存储容器设于支撑架，液体流通管一端连接对应的液体存储容器，另一端设于对应的导通孔，阀门用于调控液体流通。

12、一种二氢杨梅素纳米粒的制备方法，使用所述的混合装置，制备方法包括以下步骤：

13、准备阶段：先将多个敞口容器放置于对应的圆形槽内，将托盘放置于凹槽内；

14、夹持阶段：第一升降杆收缩使倒u型板下降，在第一齿轮与第一齿条啮合作用下，放置板两侧的夹板朝敞口容器聚拢；

15、第一次混合：夹板夹持敞口容器后，溶于0.3%(w/v)~0.6%(w/v)乙酸溶液的壳聚糖浓度0.5mg/ml~2.5mg/ml，利用液体注入机构将10ml~20ml壳聚糖注入敞口容器，再注入酸碱调节剂将ph调整为4.0~6.0；利用密封机构封闭敞口容器后，利用驱动机构往复摆动密封机构，使敞口容器内的液体充分混合；

16、第二次混合：溶于无水乙醇的二氢杨梅素浓度2mg/ml~10mg/ml，利用液体注入机构将二氢杨梅素加入到敞口容器；将4ml~8 ml tpp（0.6mg/ml~0.8mg/ml）溶液加入到敞口容器中；利用密封机构封闭敞口容器后，利用驱动机构往复摆动密封机构，使敞口容器内的液体充分混合；

17、制备纳米粒：离心洗涤三次，冻干形成二氢杨梅素纳米粒。

18、进一步的，在准备阶段之前：预先将壳聚糖、酸碱调节剂、二氢杨梅素溶液、tpp溶液分别承装于对应的液体存储容器内。

19、进一步的，第一次混合或第二次混合中，第二升降杆先伸长以使密封盖封闭对应的敞口容器，将对应的阀门打开，液体通过液体流通管注入敞口容器内。

20、本发明的有益效果在于：

21、1、利用混合装置可以同时对多个容器内的液体进行混匀。使用时，只需要将容器放置于托盘，然后将托盘放置于放置架上即可，托盘的作用是可以一次性将多个容器转移至放置架或者将多个容器从放置架上取下。放置好容器后，利用夹持机构自动夹持固定容器，从而提升容器在液体混匀过程中的稳定性。可以利用液体注入机构自动将所需液体注入容器中，省去人工添加液体的步骤，从而更加精准的控制液体添加量。容器密封后，启动驱动机构即可实现液体的混匀。

22、2、可以将二氢杨梅素包封于cs-tpp复合材料中，得到稳定的、粒径均一的cs-dmy-nps，包封率可达60%，且粒径小至198.7±2.07 nm。通过稳定性及体外释放试验可知，cs-dmy-nps能够有效释放二氢杨梅素。通过体内抗aki实验可知，cs-dmy-nps能够预防和治疗顺铂诱导的aki。