专利名称：超灵敏毛细管电泳在线化学发光检测仪的制作方法
技术领域：
本实用新型涉及一种超灵敏毛细管电泳在线化学发光检测仪。
背景技术：
在单分子水平进行超灵敏分析，在诸如化学分析、DNA测序、分子动力学、纳米材料及疾病早期诊断等许多研究领域都有着广阔的应用前景，已成为国际上研究的热点领域。目前，激光诱导荧光(LIF)以其灵敏度高、应用范围广成为超高灵敏分析或单分子检测的主要方法。然而激光诱导荧光除了价格昂贵外，对非荧光物质需采用柱前或柱后衍生引入荧光团，且该法也易受拉曼散射、瑞利散射和溶剂噪音的影响和限制。毛细管电泳是近些年来发展最迅速的分离技术之一，具有分离效率高、速度快、样品耗量少等优点，其不足在于检测能力不高。化学发光仪器设备简单、无须外加光源、背景低，可提供与激光诱导荧光相当的灵敏度。化学发光的主要缺点是选择性较差。
对于毛细管电泳分离在线化学发光检测，Hara等人使用的混合模式是将化学发光试剂预先混合，然后从柱后加入；此外，高压电源的阴极置于检测区域后的阴极储液槽中。该设计的缺点是易产生涡流扩散导致分离效率(柱效)低，且结果的重现性也不好。Zare研究小组将毛细管的阴极末端1-3cm聚酰亚胺涂层烧去，浸入含有电泳缓冲液和发光试剂的储液槽中，在垂直方向上用光导纤维将信号传递到检测器中。这种设计的优点是可降低涡流扩散的影响，缺点是检测区域较大易导致峰变宽，同时用光导纤维搜集光信号有损失，降低了检测灵敏度。
发明内容
本实用新型所要解决的问题是克服传统仪器检测灵敏度较低的缺点，进而提供一种超灵敏毛细管电泳分离在线化学检测仪。
本实用新型提供的技术方案是一种超灵敏毛细管电泳在线化学发光检测仪，包括与高压电源阳级相通的贮液容器、检测器和反应器通槽以及穿过反应器通槽的电泳毛细管和一端插入反应器通槽的反应毛细管，其特殊之处是电泳毛细管一端设在贮液容器内，另一端刻蚀后插入反应毛细管中，反应器通槽上设有通入通槽的化学发光试剂加入口，反应毛细管上设有除去毛细管涂层的检测窗，检测窗位于检测器光电倍增管前。
上述检测器的反应器通槽槽内可与高压电源阴极相接通。
上述反应毛细管呈倾斜设置，入口端高、出口端低。
本实用新型采用以上结构，使用时将两种化学发光试剂之一(如，鲁米诺)作为电泳介质组份之一从柱前加入，另一种试剂从反应器通槽的试剂加入口加入；同时用光电倍增管检测器直接从检测窗检测光信号，因而本实用新型的检测灵敏度高，且制作简单、成本低、操作简便。另外，本实用新型将阴极从位于检测区域后的阴极储液槽中提至位于检测区域前的反应器通槽(通常所说的四通)中，这样反应毛细管就不再是电泳流路的一部分，电泳过程就仅限于分离毛细管即电泳毛细管中。反应毛细管中的气泡以及发光试剂与分离毛细管中流出物的混合都不会影响电流的稳定性。这种独特的检测接口设计，极大地克服了传统毛细管电泳化学发光检测仪中电泳电流和基线不稳的缺点，进一步提高了检测灵敏度。实验证明，本实用新型性能优良，具有噪音低、灵敏度高的特点。可用于金属离子等物质的超灵敏或单分子水平检测及疾病早期分子诊断研究以及其它应用领域。
附图为本实用新型的结构示意图。
具体实施方式
参见附图，本实用新型包括贮液容器2、检测器9和反应器通槽4以及穿过反应器通槽4的电泳毛细管3和一端插入反应器通槽4内的反应毛细管7，贮液容器2与高压电源1的阳级相接通，反应器通槽4上设有通入通槽4的化学发光试剂加入口5，反应毛细管7上设有除去毛细管涂层的检测窗8，检测窗8位于检测器光电倍增管9前，电泳毛细管3一端设在贮液容器2内，另一端刻蚀后插入反应毛细管7中，其尾端置于反应毛细管7上检测窗9中间位置，两根毛细管3、7通过四通即反应器通槽4固定，分离电压由高压电源1提供，并通过两电极构成回路组合成一个整体。
上述检测仪的反应器通槽4槽内可与高压电源1的阴极6相接通。
为了让化学发光试剂顺利通过反应毛细管7，可将上述反应毛细管7呈倾斜设置，将反应毛细管7的出口端与入口端相比向下倾斜2cm。
权利要求1.一种超灵敏毛细管电泳在线化学发光检测仪，包括与高压电源阳级相通的贮液容器、检测器和反应器通槽以及穿过反应器通槽的电泳毛细管和一端插入反应器通槽的反应毛细管，其特征是电泳毛细管一端设在贮液容器内，另一端刻蚀后插入反应毛细管中，反应器通槽上设有通入通槽的化学发光试剂加入口，反应毛细管上设有除去毛细管涂层的检测窗，检测窗位于检测器光电倍增管前。
2.根据权利要求1所述的检测仪，其特征是反应器通槽槽内与高压电源阴极相接通。
3.根据权利要求1或2所述的检测仪，其特征是反应毛细管呈倾斜设置。
专利摘要本实用新型涉及一种超灵敏毛细管电泳在线化学发光检测仪,包括与高压电源阳级相通的贮液容器、检测器和反应器通槽以及穿过反应器通槽的电泳毛细管和一端插入反应器通槽的反应毛细管,其特殊之处是电泳毛细管一端设在贮液容器内,另一端刻蚀后插入反应毛细管中,反应器通槽上设有通入通槽的化学发光试剂加入口,反应毛细管上设有除去毛细管涂层的检测窗,检测窗位于检测器光电倍增管前。本实用新型的检测灵敏度高,且制作简单、成本低、操作简便。实验证明,本实用新型性能优良,具有噪音低、灵敏度高的特点。可用于金属离子等物质的超灵敏或单分子水平检测及疾病早期分子诊断研究以及其它应用领域。
文档编号G01N27/447GK2493931SQ0125179
公开日2002年5月29日 申请日期2001年9月6日 优先权日2001年9月6日
发明者刘彦明, 刘二宝, 张颖, 黄波, 程介克 申请人:武汉大学