专利名称：新生儿胎粪铅含量的检测方法
新生儿胎粪铅含量的检测方法技术领域应用微酸消化测定新生儿胎粪铅含量的石墨炉原子吸收法 背景技术铅能通过胎盘屏障，引起胎儿发育尤其是神经系统发育异常。妊娠期铅暴露 可造成新生儿发育异常，尤其对神经系统的发育造成较大影响。因此检测妊娠 期铅暴露水平，及早发现并预防铅危害尤其重要。 一般我们用检测新生儿脐带 血铅含量来反应妊娠期铅暴露水平，但新生儿脐带血铅水平不能代表整个妊娠 过程铅的累积。胎粪主要来自通过胎儿消化道分泌的消化液、肠道脱落的上皮 和胎儿吞咽的羊水及皮脂，从妊娠开始到出生后24小时，胎粪中铅水平反应整 个妊娠期间的新生儿肠道铅暴露水平，所以检测胎粪铅水平可以反应整个妊娠 期新生儿铅的暴露水平。关于胎粪铅检测方法，未见有文献报道。本发明参考 有关文献的组织消化方法，根据胎粪成分的特点，建立了快速准确的微酸消化 测定胎粪铅的石墨炉原子吸收方法。发明内容胎粪的成份包括胃肠分泌液、胆汁、胰液、各种消化酶、及吞咽羊水中不被 吸收的胎脂、角化上皮细胞、肠内物质形成的钙皂晶体、无机盐类、以及脂肪、 胆酸盐、胆红素等衍生物，相对组织来说，胎粪有机物比较少，无机物比较多， 对胎粪上机检测前的消化处理方面，必须针对胎粪自身的特点，找到一种合适 的消化方法。由于胎粪有机物比组织少，所以不能用消化组织的硝酸一硫酸一 高氯酸体系， 通过反复摸索，我们采样微硝酸消化体系。高温烘烤胎粪，然后用微硝酸消化胎粪，过氧化氢中和，稀释后上机检测。具体步骤是取约0.3 g鲜湿胎粪于10 ml 消化管中，60。C烤箱烘烤过夜。烘干后加入0.5ml优级纯的硝酸，80。C水浴lh (水浴起始温度不宜太高，应由室温缓慢升温，以防温度骤升引起剧烈反应)。 待消化管中的胎粪消失，颜色转为澄清透明的深黄色或红棕色后，将消化管从 水浴中拿出，在通风厨中打开盖子，放净棕红色气体，趁溶液保持一定的余温， 向管内滴加30%的双氧水0.5 ml，并不断振荡，溶液颜色转淡。冷却后用超纯 水定容至2 ml，上机检测。检测结果表明此种检测方法简便、快速、信号稳定、结果可靠。
图1标准曲线具体实施方式
1仪器及工作条件仪器日本岛津AA—660型原子吸收分光光度计，GFA—4B石墨炉原子化 器，ASC-60G自动进样器，Eppendorf微量移液管，铅空心阴极灯，石墨管(型 号_206—69984日本岛津公司)。工作条件波长283.3 nm，狭宽1.0 nm，工作电流10mA， BGC-D2类型测 量峰高，进样体积10yL，水压o. 5 kg/cm2，气压2. 5 kg/cm2,石墨炉加热程序见 表l。表1石墨炉工作条件 Table 1. Furnace programme 步骤 温度 时间 加热方式St印 Temp(C) Hold time(s) Type干燥Drying 150 30 斜坡Ramp灰化Charing325 40 保持Step原子化Atomization 1400 4 保持Step清除Clean up 2000 2 保持Step冷却Cooling 0 20 保持Step2标准溶液及试剂从10ppm硝酸铅标准储备液(购自国家钢铁材料测试中心)中分别取OnL、 100 pL、 200|iL、 400jjL加入4个10ml容量瓶中，超纯水定容至刻度，即为O.O Hg/L、 100 fig/L、 200 jig/L、 400照/L的系列标准应用液。朋03为优级纯。超 纯水为18.2 MQ.cm水。30%11202为分析纯。 3样品处理取约(Ug鲜湿胎粪于10ml消化管中，6(TC烤箱烘烤过夜。烘干后加入0.5 ml优级纯的硝酸，8(TC水浴1 h (水浴起始温度不宜太高，应由室温缓慢升温， 以防温度骤升引起剧烈反应)。待消化管中的胎粪消失，颜色转为澄清透明的深 黄色或红棕色后，将消化管从水浴中拿出，在通风厨中打开盖子，放净棕红色 气体，趁溶液保持一定的余温，向管内滴加30X的双氧水0.5ml，并不断振荡， 溶液颜色转淡。冷却后用超纯水定容至2 ml。 4结果4.1基体改进剂的效果胎粪的成份包括胃肠分泌液、胆汁、胰液、各种消化酶、及吞咽羊水中不被 吸收的胎脂、角化上皮细胞、肠内物质形成的钙皂晶体、无机盐类、以及脂肪、 胆酸盐、胆红素等衍生物，相对组织来说，胎粪有机物比较少，无机物比较多。 无机成分较多会造成高背景的干扰，所以必须加基体改进剂以提高灰化温度消 除这种干扰。本实验选用0.2% NH4H2P04溶液作基体改进剂，可提供灰化温度，降低背景，而铅信号几乎没有任何损失。此时，d2校正可以满足测定要求。 4.2标准曲线取一例胎粪0.3 g，按上述消化法消化后，吸取消化液各500 |jL ,加入4支2 ml 聚乙烯塑料管内，再依次加入铅标准应用液0吗/L 、 100照/L， 200jig/L， 400 吗/L各100yL，最后加入400 JiL的化学改进剂，立即在混匀器上充分混匀。同 时按样品消化法制备一个试剂空白。以4个管内铅浓度制备标准曲线(如图l)。 所得的曲线方程为C = mA+n，相关方程系数m = 4.410E + 03， n = -7.067E+01。4.3样品分析按上述消化法消化胎粪，取胎粪消化液500 yL，加500 JJL化学改进剂，上机 测定消化液中铅浓度(照/L)，然后按下式计算胎粪中铅浓度(照/g) C样二nC液V (1000 m)1C样实际样品含铅量，照/g; m消化液稀释到上机待测液的倍数；V:为稀释前体积，mL; C液为原子吸收测定的样液浓度，jig/L; m:为称样量，g。 5结论应用此方法共检测144例胎粪铅值，结果证明此检测方法简便、稳定、可靠。
权利要求
1. 一种检测方法，在用石墨炉原子吸收法检测胎粪铅含量的过程中，采样微酸消化法处理胎粪，其特征是微酸消化完全，检测信号高，信号稳定，结果可靠。
2、 根据权利要求1所述的检测方法，其特征是取0.3g胎粪6(TC烘烤过夜，烘 丁-后加入0.5 ml优级纯的硝酸，80'C水浴1 h (水浴起始温度不宜太高，应由 室温缓慢升温，以防温度骤升引起剧烈反应)。待消化管中的胎粪消失，颜色转 为澄清透明的深黄色或红棕色后，将消化管从水浴中拿出，在通风厨中打开盖 子，放净棕红色气体，趁溶液保持一定的余温，向管内滴加30%的双氧水0. 5 ml， 并不断振荡，溶液颜色转淡。冷却后用超纯水定容至2 ml，上机检测。
全文摘要
建立微硝酸消化测定新生儿胎粪铅含量的石墨炉原子吸收法。0.3g胎粪于60℃烤箱烘烤过夜，80℃水浴下HNO<sub>3</sub>、H<sub>2</sub>O<sub>2</sub>顺序消化1h，消化后定容至2ml。D<sub>2</sub>灯校正背景，样本基体匹配标准曲线法测定。结果表明所建立的胎粪铅检测方法稳定，简便可行。
文档编号G01N21/31GK101216420SQ200710004148
公开日2008年7月9日 申请日期2007年1月7日 优先权日2007年1月7日
发明者原 张, 徐锡金, 燕 李, 霞 霍 申请人:汕头大学医学院