专利名称：治疗湿热黄疸的茵陈五疸丸的质量控制方法
技术领域：
本发明属于中成药的技术领域，涉及以中药材为原料制成的一种治疗湿热黄疸的 茵陈五疸丸的质量控制方法。
背景技术：
茵陈五疸丸是卫生部标准WS3-B-2930-98记载处方及质量标准处方茵陈160g 茯苓 80g 黄芩80g苍术8Og 泽泻 8Og 厚朴(姜制)8Og白术(麸炒)8Og 猪苓 8Og 山楂8Og甘草60g 陈皮 40g 六神曲(麸炒)40g枳犋子 40g制法以上十三味，除茵陈外，粉碎成细粉，过筛，混勻，备用。茵陈加水煎煮二次， 合并煎液，滤过，滤液浓缩成膏。将茯苓等粉末加入膏内，搅勻，干燥，粉碎成细粉，过筛，用 水泛丸，干燥，即得。鉴别取本品，置显微镜下观察不规则分枝团块无色，遇水合氯醛液溶化；菌丝 无色或淡棕色，直径4 6μπι。纤维淡黄色，梭形，壁厚，孔沟细。薄壁细胞类圆形，有椭圆 形纹孔，集成纹孔群。石细胞分枝状，壁厚，层纹明显。果皮石细胞淡紫红色、红色或黄棕色， 类圆形或多角形，直径约至125μπι。纤维束周围薄壁细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维。草酸 钙方晶，形成晶纤维。草酸钙方晶成片存在于薄壁组织中。检查应符合丸剂项下有关的各项规定(附录I Α)。功能与主治清热利湿，通利小便。用于湿热黄疸，周身浮肿，遍身发黄，小便赤黄、 小水不利。目前有关与上述公开的卫生部标准WS3-B-2930-98记载处方相似或不同功效相 似茵陈五疸丸的文献有很多，但是尚未见与上述公开的茵陈五疸丸处方相似或相同，配比 相同，功效相似的产品标准的文献，但是现有技术的标准中还存在鉴别项目、鉴别手段、含 量测定方法不完善等缺点，为提高中药的产品质量，需要完善产品质量标准。
发明内容
本发明的目的是本发明的目的在于克服现有技术的茵陈五疸丸标准不足之处，提 供一种能够定性、定量检测药物成分的茵陈五疸丸的质量控制方法。为了达到本发明的目的采用的技术方案是一种治疗湿热黄疸的茵陈五疸丸的质 量控制方法，其中所述的药物配方由中药材茵陈160g 茯苓 80g苍术80g 泽泻 80g白术(麸炒)80g 猪苓 80g甘草60g 陈皮 40g
黄芩80g
厚朴(姜制)80g 山楂80g
六神曲(麸炒)40g
枳犋子40g组成，制法以上十三味，除茵陈外，粉碎成细粉，过筛，混勻，备 用；茵陈加水煎煮二次，合并煎液，滤过，滤液浓缩成膏；将茯苓等粉末加入膏内，搅勻，干 燥，粉碎成细粉，过筛，用水制丸，干燥，即得，其特征在于其方法的步骤是(1)以厚朴酚与和厚朴酚、陈皮为对照品，薄层色谱法鉴别茵陈五疸丸处方中是否 含有厚朴、陈皮成分；(2)以黄芩苷为对照品，高效液相色谱法检测茵陈五疸丸处方中黄芩苷的含量。所述的治疗湿热黄疸的茵陈五疸丸的质量控制方法，其特征在于所述的薄层色 谱法鉴别茵陈五疸丸处方中否含有厚朴的方法为取本品0. 5g，加甲醇20ml超声处理1小 时，滤过，滤液作为供试品溶液；另取厚朴酚对照品与和厚朴酚对照品，加甲醇制成每Iml 各含0. 5mg的混合溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5 μ 1， 分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以苯-甲醇为展开剂，苯甲醇=27 1，展开，取出，晾 干，置紫外光灯254nm下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色 的荧光斑点；所述的薄层色谱法鉴别茵陈五疸丸处方中是否含有陈皮成分的方法为取本品 2g，加水30ml超声提取15分钟，加乙醚20ml提取，取水层再加20ml正丁醇提取，取正 丁醇层，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取陈皮对照药材0. 5g，同法制 成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5 μ 1，分别点于同一高效硅胶 G薄层板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰乙酸-水为展开剂，乙酸乙酯甲酸冰乙酸水= 100 11 11 26，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色 清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。所述的治疗湿热黄疸的茵陈五疸丸的质量控制方法，其特征在于以黄芩苷为对 照品，液相色谱法检测茵陈五疸丸处方中黄芩苷的含量的方法为(1)色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇 水磷酸=50 50 0.2为流动相；检测波长为^Onm;理论板数按黄芩苷峰计算应不低 于2000，黄芩苷峰与相邻峰的分离度应符合规定要求；(2)对照品溶液的制备取黄芩苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含 50 μ g的溶液，即得；(3)供试品溶液的制备取本品3g，研细，取粉末0. 5g，精密称定，置具塞锥形瓶 中，精密量取70%乙醇25ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，称定重量，用70%乙醇补足 减失的重量，摇勻，滤过，取续滤液，即得；(4)测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μ 1，注入液相色谱仪，测 定，即得；本品每克含黄芩苷不得少于2. 62mg。发明有益效果质量标准中设置以厚朴酚与和厚朴酚、陈皮为对照品，薄层色谱法 鉴别茵陈五疸丸处方中是否含有厚朴、陈皮成分；高效液相色谱法检测茵陈五疸丸处方中 黄芩苷的含量，本品每克含黄芩苷不得少于2. 62mg的定量指标及检验方法，使质量标准较 为完善，修订后的质量标准，提高了药品的质量控制。
图1厚朴的薄层鉴别色谱图。
图2陈皮的定性鉴别色谱图。图3对照品溶液的HPLC图谱。图4供试品溶液的HPLC图谱。图5空白对照品溶液的HPLC图谱。图6线性回归曲线图。
具体实施例方式下面结合实施例，对本发明进一步说明，实施例1改进后的茵陈五疸丸质量标准处方茵陈160g 茯苓 80g 黄芩80g苍术SOg 泽泻 SOg 厚朴(姜制)SOg白术(麸炒)8Og 猪苓 8Og 山楂8Og甘草60g 陈皮 40g 六神曲(麸炒)40g枳犋子 40g制法以上十三味，除茵陈外，粉碎成细粉，过筛，混勻，备用。茵陈加水煎煮二次， 合并煎液，滤过，滤液浓缩成膏。将茯苓等粉末加入膏内，搅勻，干燥，粉碎成细粉，过筛，用 水制丸，干燥，即得。性状本品为棕色至棕褐色的浓缩水丸；气微，味微苦。鉴别(1)取本品，置显微镜下观察不规则分枝团块无色，遇水合氯醛液溶化；菌 丝无色或淡棕色，直径4 6μπι。纤维淡黄色，梭形，壁厚，孔沟细。薄壁细胞类圆形，有椭 圆形纹孔，集成纹孔群。石细胞分枝状，壁厚，层纹明显。果皮石细胞淡紫红色、红色或黄棕 色，类圆形或多角形，直径约至125μπι。纤维束周围薄壁细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维。 草酸钙方晶，形成晶纤维。草酸钙方晶成片存在于薄壁组织中。(2)厚朴鉴别取本品0. 5g，加甲醇20ml超声处理1小时，滤过，滤液作为供试品 溶液。另取厚朴酚对照品与和厚朴酚对照品，加甲醇制成每Iml各含0. 5mg的混合溶液，作 为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶 液各5μ1，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以苯-甲醇比例为27 1为展开剂，展开，取 出，晾干，置紫外光灯OMnm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相 同颜色的荧光斑点。(3)陈皮鉴别取本品2g，加水30ml超声提取15分钟，加乙醚20ml提取，取水层 再加20ml正丁醇提取，取正丁醇层，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液。另取 陈皮对照药材0. 5g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录 VIB)试验，吸取上述两种溶液各5 μ 1，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲 酸-冰乙酸-水比例为100 11 11 沈为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙 醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显 相同颜色的斑点。含量测定照高效液相色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI D)测定。色谱条件与系统适应性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-磷 酸比例为50 50 0. 2为流动相；检测波长为280nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低 于2000，黄芩苷峰与相邻峰的分离度应符合规定要求。
对照品溶液的制备取黄芩苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含50μ g 的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品3g，研细，取粉末0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中， 精密量取70%乙醇25ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，称定重量，用70%乙醇补足减 失的重量，摇勻，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μ 1，注入液相色谱仪，测定， 即得。本品每克含黄芩苷不得少于2. 62mg。检查应符合丸剂项下有关的各项规定(附录I A)。功能与主治清热利湿，通利小便。用于湿热黄疸，周身浮肿，遍身发黄，小便赤黄、 小水不利。用法与用量口服，一次6g，一日1 2次。规格每瓶装6g ；C藏密闭，防潮。实施例2茵陈五疸丸质量标准起草说明茵陈五疸丸原质量标准中无薄层鉴别和含量测定，经试验研究，增加厚朴、陈皮的 薄层鉴别和黄芩中黄芩苷的含量测定。一.薄层鉴别1.厚朴的鉴别1. 1材料与试剂甲醇、苯分析纯；厚朴酚对照品中国药品生物制品检定所，批 号110729-200309 ；和厚朴酚对照品中国药品生物制品检定所，批号0730-2002061. 2供试品溶液的制备取本品0. 5g，加甲醇20ml超声处理1小时，过滤，滤液作 为供试品溶液。1.3对照品溶液的制备取厚朴酚对照品与和厚朴酚对照品，加甲醇制成每Iml各 含0. 5mg的混合溶液，作为对照品溶液。1.4空白对照品溶液的制备按处方、工艺，除厚朴外制备空白对照品，再将空白 对照品粉碎成细粉，按照供试品溶液制备方法制备空白对照品溶液。1. 5实验方法照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述 三种溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以苯-甲醇07 1)为展开剂，展开， 取出，晾干，置紫外光灯OMnm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显 相同颜色的荧光斑点，空白对照品无干扰。结果见图1。图1中1 对照品2:供试品3: 空白对照品。2.陈皮的鉴别2. 1材料与试剂乙醚、正丁醇、乙酸乙酯、甲酸、冰乙酸分析纯陈皮对照药材中国药品生物制品检定所，批号120969-2005072. 2供试品溶液的制备取本品2g，加水30ml超声提取15分钟，加乙醚20ml提 取，取水层再加20ml正丁醇提取，取正丁醇层，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液。2. 3对照药材溶液的制备取陈皮对照药材0. 5g，按照供试品溶液制备方法制备 对照药材溶液。2. 4空白对照品溶液的制备按处方、工艺，除陈皮外制备空白对照品，再将空白 对照品粉碎成细粉，按照供试品溶液制备方法制备空白对照品溶液。
2. 5实验方法照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上 述两种溶液各5 μ 1，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰乙酸-水 (100 11 11 26)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加热 至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，空 白对照品色谱无干扰。结果见图2。图2中1 供试品2 对照品3 空白对照品二.黄芩苷的含量测定1.仪器与材料仪器Waters 2695高效液相色谱仪；检测器WatersM87 ；C18色谱柱Sartorius CP224S.电子天平.材料黄芩苷对照品批号110715-200514由中国药品生物制品检验所生产甲醇色谱纯，冰乙酸、磷酸分析纯；2.实验方法2. 1对照品溶液的制备取黄芩苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含 50 μ g的溶液，即得。见图3色谱峰结果
权利要求
1.一种治疗湿热黄疸的茵陈五疸丸的质量控制方法，其中所述的药物配方由中药材茵陈160g 茯苓80g 黄芩80g苍术80g 泽泻80g 厚朴(姜制)80g白术(麸炒)80g 猪苓80g 山楂80g甘草60g 陈皮40g 六神曲(麸炒)40g枳犋子 40g组成，制法以上十三味，除茵陈外，粉碎成细粉，过筛，混勻，备用；茵 陈加水煎煮二次，合并煎液，滤过，滤液浓缩成膏；将茯苓等粉末加入膏内，搅勻，干燥，粉碎 成细粉，过筛，用水制丸，干燥，即得，其特征在于其方法的步骤是(1)以厚朴酚与和厚朴酚、陈皮为对照品，薄层色谱法鉴别茵陈五疸丸处方中是否含有 厚朴、陈皮成分；(2)以黄芩苷为对照品，高效液相色谱法检测茵陈五疸丸处方中黄芩苷的含量。
2.根据权利要求1所述的治疗湿热黄疸的茵陈五疸丸的质量控制方法，其特征在于 所述的薄层色谱法鉴别茵陈五疸丸处方中否含有厚朴的方法为取本品0. 5g，加甲醇20ml 超声处理1小时，滤过，滤液作为供试品溶液；另取厚朴酚对照品与和厚朴酚对照品，加甲 醇制成每Iml各含0. 5mg的混合溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种 溶液各5μ1，分别点于同一硅胶GF2M薄层板上，以苯-甲醇为展开剂，苯甲醇=27 1， 展开，取出，晾干，置紫外光灯254nm下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置 上，显相同颜色的荧光斑点；所述的薄层色谱法鉴别茵陈五疸丸处方中是否含有陈皮成分的方法为取本品2g， 加水30ml超声提取15分钟，加乙醚20ml提取，取水层再加20ml正丁醇提取，取正丁醇 层，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取陈皮对照药材0. 5g，同法制成 对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5 μ 1，分别点于同一高效硅胶G 薄层板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰乙酸-水为展开剂，乙酸乙酯甲酸冰乙酸水= 100 11 11 26，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色 清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
3.根据权利要求1所述的治疗湿热黄疸的茵陈五疸丸的质量控制方法，其特征在于 以黄芩苷为对照品，液相色谱法检测茵陈五疸丸处方中黄芩苷的含量的方法为(1)色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇水 磷酸=50 50 0.2为流动相；检测波长为280nm;理论板数按黄芩苷峰计算应不低于 2000，黄芩苷峰与相邻峰的分离度应符合规定要求；(2)对照品溶液的制备取黄芩苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含50μg 的溶液，即得；(3)供试品溶液的制备取本品3g，研细，取粉末0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精 密量取70%乙醇25ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，称定重量，用70%乙醇补足减失 的重量，摇勻，滤过，取续滤液，即得；(4)测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μ1，注入液相色谱仪，测定， 即得；本品每克含黄芩苷不得少于2. 62mg。
全文摘要
本发明属于中成药的技术领域，涉及以中药材为原料制成的一种治疗湿热黄疸的茵陈五疸丸的质量控制方法，质量标准中设置以厚朴酚与和厚朴酚、陈皮为对照品，薄层色谱法鉴别茵陈五疸丸处方中是否含有厚朴、陈皮成分的鉴别项目；高效液相色谱法检测茵陈五疸丸处方中黄芩苷的含量定量指标及检验方法，使质量标准较为完善，修订后的质量标准，提高了药品的质量控制。
文档编号G01N30/36GK102068566SQ20091022836
公开日2011年5月25日 申请日期2009年11月19日 优先权日2009年11月19日
发明者刘志宏, 律兆荣, 杨瑾, 王磊, 陈坚 申请人:天津中新药业集团股份有限公司乐仁堂制药厂