专利名称：一种治疗前列腺炎的中药质量检测方法
技术领域：
本发明属于医药质量检测技术领域，涉及一种中药的质量检测方法，具体涉及一种治疗前列腺炎的中药质量检测方法。
背景技术：
前列腺增生是老年男性的一种常见病、多发病，发病率随年龄增长而逐渐增加。其主要表现尿频、排尿困难、急性尿闭或尿失禁；严重者必须导尿或者手术；前列腺炎也是泌尿科男性常见病、多发病，主要表现为尿急、尿频、尿痛、会阴痛，对患者健康造成了极大的伤害。
现有技术中，申请号为200810167505.1，名称为“一种治疗前列腺炎的中药制剂及其制备方法”的专利，公开了一种用于治疗前列腺炎的中药，其是由桑椹、芡实、绵萆薢、金缨子、栀子等经加工制成的药物活性成分与药物可接受的载体按一定的配比经加工制成的胶囊剂。
而本发明是桑椹、芡实、绵萆薢、金缨子、栀子等组成，经提取、制剂生产加工所得中药薄膜衣片，该中药具有疗效显著。无毒副作用等特点。该产品具有增强机体营养力、摄住力及排泄力，清浊利尿的功效。标准中以栀子苷为定量指标。关于栀子苷的含量测定的方法，多为高效液相色谱法，高效液相色谱法具有灵敏、准确、重现性好等特点；故参考有关资料，选择用高效液相色谱法测定该制剂中栀子苷的含量，作为控制该制剂质量的含量测定方法。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于针对上述现有技术中的不足，提供一种治疗前列腺炎的中药质量检测方法。
为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是一种治疗前列腺炎的中药质量检测方法，治疗前列腺炎药物-西帕依麦孜彼子片由以下重量份的药材制成桑椹300～600份，芡实300～600份，绵萆薢200～400份，金樱子200～500份，桅子200～400份； 治疗前列腺炎药物-西帕依麦孜彼子片的制备方法将桑椹、芡实、金樱子和桅子四味药材加水煎煮3次，第一和第二次各煎煮2小时，第三次煎煮1小时，合并煎液，静置，滤过，滤液浓缩至与原药材体积比为1∶1的体积，备用；将绵萆薢粉碎成粗粉，加乙醇回流提取3次，每次1小时，滤过，合并滤液，与上述备用液合并，加乙醇至含醇质量为70％，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至55～60℃热测相对密度为1.20～1.25，减压干燥，粉碎，加入适量淀粉和羧甲淀粉钠，混匀，制粒，干燥，加入硬脂酸镁，混匀，压制成片，包薄膜衣，即得； 其特征在于该中药质量检测方法包括以下步骤 (1)取治疗前列腺炎药物-西帕依麦孜彼子片2g，除去薄膜衣，研细，加水30～50ml，超声处理10～20分钟，放冷，滤过，滤液用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次10～20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇1ml溶解，制成供试品溶液；另取桑椹对照药材5g，加质量浓度为60％的乙醇溶液30ml，加热回流1小时，滤过，滤液浓缩至无醇味，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次10～20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇1ml溶解，制成桑椹对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和桑椹对照药材溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积百分比为15∶1∶4的乙酸乙酯、冰醋酸和水的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与桑椹对照药材色谱相应的位置上，显相同的蓝色荧光斑点，喷以磷钼酸乙醇试液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与桑椹对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； (2)取栀子对照药材5g，加质量浓度为70％的乙醇30ml，回流提取1小时，滤过，滤液水浴上蒸干，残渣加甲醇1ml溶解，制成栀子对照药材溶液；另取栀子苷对照品，加甲醇制成每1ml含2mg栀子苷的溶液，作为栀子苷对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取栀子对照药材溶液、栀子苷对照品溶液和步骤(1)中的的供试品溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积百分比为15∶2∶4的乙酸乙酯、冰醋酸和水的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以磷钼酸乙醇试液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与栀子对照药材和栀子苷对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； (3)取治疗前列腺炎药物-西帕依麦孜彼子片2g，除去薄膜衣，研细，加2mol/L的盐酸10～20ml，置水浴中加热水解1.5～3小时，放冷，加60～90℃石油醚20～30ml，回流提取0.5～1小时，分取石油醚液，水浴蒸干，残渣用三氯甲烷3ml溶解，制成供试品溶液；另取薯蓣皂苷元对照品，加三氯甲烷制成每1ml含1mg薯蓣皂苷元的溶液，作为薯蓣皂苷元对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和薯蓣皂苷元对照品溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积百分比为93∶7的三氯甲烷和丙酮溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以磷钼酸乙醇试液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与薯蓣皂苷元对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； (4)栀子苷的含量测定分别制备供试品溶液和对照品溶液，用高效液相色谱法测定； 对照品为栀子苷； 色谱条件与系统适用性为以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙睛-二次蒸馏水为流动相，乙睛∶二次蒸馏水的体积百分比为15～25∶75～85，A为乙睛，B为二次蒸馏水，A+B＝100％；紫外监测器，检测波长为238nm，理论板数按栀子苷峰计算应不低于1500； 对照品溶液的制备称取栀子苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含15μg栀子苷的对照品溶液； 供试品溶液的制备取治疗前列腺炎药物-西帕依麦孜彼子片8片～20片，除去薄膜衣，研细，取0.1g，称定，置具塞锥形瓶中，加入甲醇25ml，密塞，称定，超声处理15～30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，量取滤液10ml，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得；超声处理的功率为250w，频率为25KHz； 测定法分别吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，计算，即得。
本发明的优选技术方案一种治疗前列腺炎的中药质量检测方法，其特征在于，包括以下步骤 (1)取治疗前列腺炎药物-西帕依麦孜彼子片2g，除去薄膜衣，研细，加水50ml，超声处理20分钟，放冷，滤过，滤液用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇1ml溶解，制成供试品溶液；另取桑椹对照药材5g，加质量浓度为60％的乙醇溶液30ml，加热回流1小时，滤过，滤液浓缩至无醇味，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇1ml溶解，制成桑椹对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和桑椹对照药材溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积百分比为15∶1∶4的乙酸乙酯、冰醋酸和水的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与桑椹对照药材色谱相应的位置上，显相同的蓝色荧光斑点，喷以磷钼酸乙醇试液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与桑椹对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； (2)取栀子对照药材5g，加质量浓度为70％的乙醇30ml，回流提取1小时，滤过，滤液水浴上蒸干，残渣加甲醇1ml溶解，制成栀子对照药材溶液；另取栀子苷对照品，加甲醇制成每1ml含2mg栀子苷的溶液，作为栀子苷对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取栀子对照药材溶液、栀子苷对照品溶液和步骤(1)中的的供试品溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积百分比为15∶2∶4的乙酸乙酯、冰醋酸和水的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以磷钼酸乙醇试液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与栀子对照药材和栀子苷对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； (3)取治疗前列腺炎药物-西帕依麦孜彼子片2g，除去薄膜衣，研细，加2mol/L的盐酸20ml，置水浴中加热水解3小时，放冷，加60～90℃石油醚30ml，回流提取1小时，分取石油醚液，水浴蒸干，残渣用三氯甲烷3ml溶解，制成供试品溶液；另取薯蓣皂苷元对照品，加三氯甲烷制成每1ml含1mg薯蓣皂苷元的溶液，作为薯蓣皂苷元对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和薯蓣皂苷元对照品溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积百分比为93∶7的三氯甲烷和丙酮溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以磷钼酸乙醇试液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与薯蓣皂苷元对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； (4)栀子苷的含量测定分别制备供试品溶液和对照品溶液，用高效液相色谱法测定； 对照品为栀子苷； 色谱条件与系统适用性为以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙睛-二次蒸馏水为流动相，乙睛∶二次蒸馏水的体积百分比为15∶85，A为乙睛，B为二次蒸馏水，A+B＝100％；紫外监测器，检测波长为238nm，理论板数按栀子苷峰计算应不低于1500； 对照品溶液的制备称取栀子苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含15μg栀子苷的对照品溶液； 供试品溶液的制备取治疗前列腺炎药物-西帕依麦孜彼子片8片，除去薄膜衣，研细，取0.1g，称定，置具塞锥形瓶中，加入甲醇25ml，密塞，称定，超声处理20分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，量取滤液10ml，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得；超声处理的功率为250w，频率为25KHz； 测定法分别吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，计算，即得。
本发明与现有技术相比具有以下优点本发明通过高效液相色谱法，实现了对栀子苷含量的准确测定，本方法操作简便，准确先进，线性关系、重现性、精密度、稳定性、回收率均较好，能够更有效的控制产品的质量。
具体实施例方式 实施例 (一)定性检测研究 1、西帕依麦孜彼子片2g，除去薄膜衣，研细，加水50ml，超声20分钟，放冷，滤过，滤液用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。同时，取不含桑椹的其它药材，按照西帕依麦孜彼子片制备工艺和供试品制备方法制成阴性对照溶液。另取桑椹对照药材5g，加60％乙醇溶液30ml，加热回流1小时，滤过，滤液浓缩至无醇味，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，同制法制成对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯∶冰醋酸∶水的体积百分比为15∶1∶4的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下(365nm)检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的蓝色荧光斑点，阴性对照溶液无干扰；喷以磷钼酸乙醇试液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照溶液无干扰。
2、取不含栀子的处方药材，按照西帕依麦孜彼子片制备工艺和供试品制备方法制成阴性对照溶液。取栀子对照药材5g，加70％乙醇30ml，回流提取1小时，滤液，滤液水浴上蒸干，残渣加甲醇1ml溶解，制成对照药材溶液。另取栀子苷对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液与步骤1中的供试品溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯∶冰醋酸∶水的体积百分比为15∶2∶4的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以磷钼酸乙醇试液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照溶液无干扰。
3、取西帕依麦孜彼子片8～20片(优选8片)，除去薄膜衣，研细，加2mol/L盐酸20ml置水浴中加热水解3小时，放冷，加60～90℃石油醚30ml回流提取1小时，分取石油醚液，水浴蒸干，残渣用三氯甲烷3ml溶解，作为供试品溶液。同时，取不含绵萆薢的其它药材，按照西帕依麦孜彼子片制备工艺和供试品制备方法制成阴性对照溶液。另取薯蓣皂苷元对照品，加三氯甲烷制成每1ml含1mg的溶液，作为供试品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-丙酮的体积百分比为93∶7为展开剂，展开，取出，晾干。喷以磷钼酸乙醇试液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照溶液无干扰。
(二)定量检测研究 1、提取时间的考察取西帕依麦孜彼子片20片(批号20040506)，除去薄膜衣，研细，取0.1g，6份，精密称定，分别置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，精密称定，超声处理(功率250w，频率25KHz)不同时间，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，取续滤液进样，测定，求得栀子苷含量，结果见表1。
表1 超声处理不同时间试验结果
以上结果表明，超声处理20分钟，测得栀子苷含量(或峰面积与取样量的比值)不再增加，为了保证提取完全，故确定超声处理时间为20分钟。
2、色谱条件的考察 2.1 流动相的选择乙睛-二次蒸馏水(二者体积百分比为15∶85)。
2.2 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙睛-二次蒸馏水(二者体积百分比为15∶85)为流动相，A为乙睛，B为二次蒸馏水，A+B＝100％；紫外监测器，检测波长为238nm，理论板数按栀子苷峰计算应不低于1500； 2.3 对照品溶液制备精密称取栀子苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含15μg的溶液，即得。
2.4 供试品溶液的制备取西帕依麦孜彼子片20片，除去薄膜衣，研细，取0.1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，精密称定，超声处理(功率250w，频率25KHz)20分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用0.45μm微孔滤膜滤过，即得。
3、方法学考察 3.1 阴性对照试验取不含栀子的处方药材，按照西帕依麦孜彼子片制备工艺和供试品制备方法制成阴性对照样品，再按供试品溶液配制方法制成阴性对照溶液。精密吸取10μl，注入液相色谱仪中。从色谱图可以看出在栀子苷位置上无色谱峰出现，故阴性对照不干扰栀子苷测定。
3.2 线性关系考察精密称取栀子苷对照品15.2014mg，加甲醇适量制成每ml含栀子苷15.2μg对照品溶液，分别取对照品溶液2μl、4μl、7.5μl、10μl、15μl、20μl，依次测定峰面积，以进样量对峰面积进行线性回归，结果见表2。
表2 线性试验结果
回归方程y＝47561x+216.54，R＝0.9992。
结果表明栀子苷进样量在0.0304～0.304μg范围内线性关系较好。
3.3 精密度试验取上述对照品溶液10μl，与供试品溶液10μl，分别重复进样6次，依法测定峰面积。结果表明，精密度良好，见表3。
表3 精密度试验结果
3.4 稳定性试验取同一份供试品溶液，分别与0小时、2小时、4小时、6小时、12小时、24小时测定峰面积，结果见表4。
表4 稳定性试验结果
试验表明供试品在24小时内稳定性较好。
3.5 重复性取同批样品(批号20040506)6份，按正文方法进行测定，结果见表5。
表5 样品重现性试验结果
3.6 回收率试验取已知含量的样品粉末(批号20040506)约0.1g共6份，精密称定，分别置于具塞锥形瓶中，分别精密加入对照品溶液(mg/ml)。分别按正文含量测定项下方法进行测定回收率，结果见表6。
表6 回收率试验结果
3.7 栀子药材含量测定及限度确定分别取药材样品粉末6批，约0.1g，精密称定，按正文含量测定项下方法进行测定，结果见表7。
表7 栀子药材含量研究
6 批栀子药材样品含量以栀子苷计在2.93％～3.88％之间，为了保证成品含量，结合2005年版中国药典一部栀子项下要求，确定含量限度不得低于1.8％ 3.8 样品测定及限度确定取4批样品各2份，按正文含量测定项下方法进行测定，结果见表8。
表8 样品含量测定结果
根据3批样品实测数据，考虑到药材来源、制剂生产、贮藏等因素，暂定西帕依麦孜彼子片每片含栀子以栀子苷(C17H24O10)计，不得少于3.0mg/片。
权利要求
1.一种治疗前列腺炎的中药质量检测方法，治疗前列腺炎药物-西帕依麦孜彼子片由以下重量份的药材制成桑椹300～600份，芡实300～600份，绵萆薢200～400份，金樱子200～500份，桅子200～400份；
治疗前列腺炎药物-西帕依麦孜彼子片的制备方法将桑椹、芡实、金樱子和桅子四味药材加水煎煮3次，第一和第二次各煎煮2小时，第三次煎煮1小时，合并煎液，静置，滤过，滤液浓缩至与原药材体积比为1∶1的体积，备用；将绵萆薢粉碎成粗粉，加乙醇回流提取3次，每次1小时，滤过，合并滤液，与上述备用液合并，加乙醇至含醇质量为70％，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至55～60℃热测相对密度为1.20～1.25，减压干燥，粉碎，加入适量淀粉和羧甲淀粉钠，混匀，制粒，干燥，加入硬脂酸镁，混匀，压制成片，包薄膜衣，即得；
其特征在于该中药质量检测方法包括以下步骤
(1)取治疗前列腺炎药物-西帕依麦孜彼子片2g，除去薄膜衣，研细，加水30～50ml，超声处理10～20分钟，放冷，滤过，滤液用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次10～20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇1ml溶解，制成供试品溶液；另取桑椹对照药材5g，加质量浓度为60％的乙醇溶液30ml，加热回流1小时，滤过，滤液浓缩至无醇味，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次10～20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇1ml溶解，制成桑椹对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和桑椹对照药材溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积百分比为15∶1∶4的乙酸乙酯、冰醋酸和水的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与桑椹对照药材色谱相应的位置上，显相同的蓝色荧光斑点，喷以磷钼酸乙醇试液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与桑椹对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(2)取栀子对照药材5g，加质量浓度为70％的乙醇30ml，回流提取1小时，滤过，滤液水浴上蒸干，残渣加甲醇1ml溶解，制成栀子对照药材溶液；另取栀子苷对照品，加甲醇制成每1ml含2mg栀子苷的溶液，作为栀子苷对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取栀子对照药材溶液、栀子苷对照品溶液和步骤(1)中的的供试品溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积百分比为15∶2∶4的乙酸乙酯、冰醋酸和水的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以磷钼酸乙醇试液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与栀子对照药材和栀子苷对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(3)取治疗前列腺炎药物-西帕依麦孜彼子片2g，除去薄膜衣，研细，加2mol/L的盐酸10～20ml，置水浴中加热水解1.5～3小时，放冷，加60～90℃石油醚20～30ml，回流提取0.5～1小时，分取石油醚液，水浴蒸干，残渣用三氯甲烷3ml溶解，制成供试品溶液；另取薯蓣皂苷元对照品，加三氯甲烷制成每1ml含1mg薯蓣皂苷元的溶液，作为薯蓣皂苷元对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和薯蓣皂苷元对照品溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积百分比为93∶7的三氯甲烷和丙酮溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以磷钼酸乙醇试液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与薯蓣皂苷元对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(4)栀子苷的含量测定分别制备供试品溶液和对照品溶液，用高效液相色谱法测定；
对照品为栀子苷；
色谱条件与系统适用性为以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙睛-二次蒸馏水为流动相，乙睛∶二次蒸馏水的体积百分比为15～25∶75～85，A为乙睛，B为二次蒸馏水，A+B＝100％；紫外监测器，检测波长为238nm，理论板数按栀子苷峰计算应不低于1500；
对照品溶液的制备称取栀子苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含15μg栀子苷的对照品溶液；
供试品溶液的制备取治疗前列腺炎药物-西帕依麦孜彼子片8片～20片，除去薄膜衣，研细，取0.1g，称定，置具塞锥形瓶中，加入甲醇25ml，密塞，称定，超声处理15～30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，量取滤液10ml，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得；超声处理的功率为250w，频率为25KHz；
测定法分别吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，计算，即得。
2.根据权利要求1所述的一种治疗前列腺炎的中药质量检测方法，其特征在于，包括以下步骤
(1)取治疗前列腺炎药物-西帕依麦孜彼子片2g，除去薄膜衣，研细，加水50ml，超声处理20分钟，放冷，滤过，滤液用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇1ml溶解，制成供试品溶液；另取桑椹对照药材5g，加质量浓度为60％的乙醇溶液30ml，加热回流1小时，滤过，滤液浓缩至无醇味，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇1ml溶解，制成桑椹对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和桑椹对照药材溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积百分比为15∶1∶4的乙酸乙酯、冰醋酸和水的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与桑椹对照药材色谱相应的位置上，显相同的蓝色荧光斑点，喷以磷钼酸乙醇试液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与桑椹对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(2)取栀子对照药材5g，加质量浓度为70％的乙醇30ml，回流提取1小时，滤过，滤液水浴上蒸干，残渣加甲醇1ml溶解，制成栀子对照药材溶液；另取栀子苷对照品，加甲醇制成每1ml含2mg栀子苷的溶液，作为栀子苷对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取栀子对照药材溶液、栀子苷对照品溶液和步骤(1)中的的供试品溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积百分比为15∶2∶4的乙酸乙酯、冰醋酸和水的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以磷钼酸乙醇试液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与栀子对照药材和栀子苷对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(3)取治疗前列腺炎药物-西帕依麦孜彼子片2g，除去薄膜衣，研细，加2mol/L的盐酸20ml，置水浴中加热水解3小时，放冷，加60～90℃石油醚30ml，回流提取1小时，分取石油醚液，水浴蒸干，残渣用三氯甲烷3ml溶解，制成供试品溶液；另取薯蓣皂苷元对照品，加三氯甲烷制成每1ml含1mg薯蓣皂苷元的溶液，作为薯蓣皂苷元对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和薯蓣皂苷元对照品溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积百分比为93∶7的三氯甲烷和丙酮溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以磷钼酸乙醇试液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与薯蓣皂苷元对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(4)栀子苷的含量测定分别制备供试品溶液和对照品溶液，用高效液相色谱法测定；
对照品为栀子苷；
色谱条件与系统适用性为以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙睛-二次蒸馏水为流动相，乙睛∶二次蒸馏水的体积百分比为15∶85，A为乙睛，B为二次蒸馏水，A+B＝100％；紫外监测器，检测波长为238nm，理论板数按栀子苷峰计算应不低于1500；
对照品溶液的制备称取栀子苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含15μg栀子苷的对照品溶液；
供试品溶液的制备取治疗前列腺炎药物-西帕依麦孜彼子片8片，除去薄膜衣，研细，取0.1g，称定，置具塞锥形瓶中，加入甲醇25ml，密塞，称定，超声处理20分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，量取滤液10ml，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得；超声处理的功率为250w，频率为25KHz；
测定法分别吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，计算，即得。
全文摘要
本发明公开了一种治疗前列腺炎的中药质量检测方法，该方法包括治疗前列腺炎的药物的鉴别、检查、浸出物以及含量测定等步骤。本发明通过高效液相色谱法对栀子苷含量的准确测定，每片含栀子以栀子苷(C17H24O10)计，不得少于3.0mg/片。本发明通过高效液相色谱法，实现了对栀子苷含量的准确测定。本方法操作简便，准确先进，线性关系、重现性、精密度、稳定性、回收率均较好，能够更有效的控制产品的质量。
文档编号G01N30/90GK101810752SQ20101016481
公开日2010年8月25日 申请日期2010年5月6日 优先权日2010年5月6日
发明者王延岭, 侯建平 申请人:陕西康惠制药股份有限公司