专利名称：Lct液基薄层细胞和细胞dna快速制片与染色一体机的制作方法
技术领域：
本实用新型涉及一种液基薄层细胞和细胞DNA制片与染色的装置，特别是一种 LCT液基薄层细胞和细胞DNA快速制片与染色一体机。
背景技术：
在人体脱落细胞学防癌筛查、早期诊断的检测方法中，宫颈脱落细胞学检测筛查 早期宫颈癌及癌前病变的方法尤显重要。其操作方法为用宫颈刷取材放入保存液瓶，上机 将样本制成细胞悬液后，分成二组，分别进行液基细胞制片及染色，以及细胞DNA薄层制片 与染色。另外，病理切片或冰冻切片也可直接上机进行细胞DNA染色。染好色的细胞膜片封 片后，分别进行由计算机辅助阅片系统(包括TBS报告分析系统，细胞DNA倍体定量分析 系统，病理图像分析系统中的细胞DNA含量和倍体分析)进行扫描阅片，作出液基细胞TBS 分析报告，细胞DNA定量倍体分析报告，病理图像分析系统中的细胞DNA含量和倍体分析报 告，是目前判定CIN(上皮内病变)发展状态的重要方法之一，其中，DNA异倍体是肿瘤细胞 形成过程中的一个生物标记，此方法的实施，能够补充常规细胞学或病理诊断方法的不足， 大可帮助病理医生对肿瘤性质的判定，使其根据以上分析，分别作出早期(宫颈)癌及癌前 病变筛查的早期诊断报告。从以上可以看出，样本的制片和染色的质量，是影响液基细胞TBS分析报告和细 胞DNA定量倍体分析报告的决定性因素。为提高样本的制片和染色的质量，目前相继开发了各种液基细胞制片染色机，如 美国超柏LCT液基制片机，中国专利200920051732. 8也公开自然沉降液基细胞制片染色 机，它包括取样机构、样本盛放机构，玻片盛放座、染色液注入机构、染色针上下运动结构、 下底板以及控制电路。采用该机器可实现标本处理、制片、染色在一台仪器一次完成。具有 制片质量稳定、效率高、细胞完整、分布均勻等优点。但对于细胞DNA制片与染色，目前仍以手工制作为主；不但效率低，制片质量也难 于稳定。细胞DNA制片与染色的滞后，导致细胞DNA定量倍体分析报告的滞后。
实用新型内容为克服上述不足，本实用新型提供一种LCT液基薄层细胞和细胞DNA快速制片与 染色一体机。本实用新型的技术方案是所述制片与染色一体机置于箱体1内；玻片架卡座3 均勻布置在两个转盘2上；玻片架卡座3设有卡槽，玻片架4通过卡槽结构水平固定在玻片 架卡座3内；玻片架4上设有保液瓶支座7和DNA滴定位6 ；保存液瓶8通过螺纹结构固定 在保液瓶支座7上，保存液瓶8隔离成保存液瓶盛料空间9和保液瓶通孔空间10，保存液瓶 盛料空间9下端封闭，上端开口，保存液瓶通孔空间10为上下开口的通孔结构；在两个转盘 2的上方设置有两个抽吸盘11，抽吸盘11上设置有与玻片架卡座3相对应槽13，吸管座12 置于槽13内，每个吸管座12上安装有A吸管、B吸管两根吸管。[0008]抽吸盘11的圆心位置安装有电机，每个吸管座12的一端用弹簧固定在槽13外 端，另一顶用牵引线固定在电机输出轴上；常态下，同一个吸管座12上的A吸管的位置对应 一保液瓶通孔空间10位置，B吸管对应同一玻片架4上的DNA滴定位6位置。抽吸盘11上所有A吸管汇集于A总管，所有B吸管集于B总管；A总管分别与缓 冲液注射控制装置、吸液控制装置、苏木素注射控制装置、蒸馏水注射控制装置、EA/0G注射 控制装置、无水乙醇注射控制装置、二甲苯注射控制装置相连，B总管分别与福尔马林注射 控制装置、吸液控制装置、盐酸注射控制装置、蒸馏水注射控制装置、Schiff' s试剂注射 控制装置、乙醇注射控制装置、无水乙醇脱水注射控制装置、二甲苯注射控制装置相连。每个转盘2上呈发射状均勻布置有16个玻片架卡座3。转盘2通过传动装置与驱动电机连接。箱体内设置有恒温控制装置。A吸管上装有浆叶。抽吸盘11安装在箱体顶部的升降机构上。玻片架底板5上有防止漏液的塑料软足制片框。本实用新型的有益效果是，本实用新型可实现标本处理、制片、染色在一台仪器一 次完成。所制标本片质量稳定、细胞完整、分布均勻。而且可实现对样本LCT液基薄层细胞 和细胞DNA同时同机快速制片与染色，为液基细胞TBS分析报告和细胞DNA定量倍体分析 报告及时、准确的作出提供了坚强的物质保障。本实用新型处理样本批量大、效率高，尤其 适合大规模防癌普查和大型专科医院的临床诊断和筛查。
以下结合附图及实施例对本实用新型做进一步详细描述。
图1为本实用新型卸除抽吸盘后的俯视图；图2为本实用新型玻片架立体示意图；图3为本实用新型保存液瓶主视图；图4为本实用新型抽吸盘仰视图。图中1.箱体，2.转盘，3.玻片架卡座，4.玻片架，5.玻片架底板，6. DNA滴定位， 7.保液瓶支座，8.保存液瓶，9.保存液瓶盛料空间，10.保存液瓶通孔空间，11.抽吸盘， 12.吸管座，13.槽。
具体实施方式
采样预处理用宫颈刷采样后，将收集到细胞的宫颈刷保藏于保存液瓶盛料空间 9中，加入适量0. DTT(二硫苏糖醇)消化液1.5ml，然后将其贴上姓名编号标签待用。待 采集到一定数量的样本后，将上述的保藏有宫颈刷的保液瓶8用振荡仪振荡30-60min(150 次 /min)ο上机固定将洁净玻片和塑料软足框置于玻片架底板5上，取出保存液瓶8中的宫 颈刷，将保存液瓶8依序固定在保液瓶支座7内，玻片架4再通过卡槽结构固定在玻片架卡 座3内。样本不满32个时，样本玻片架4对称放置。离心转盘2以800r/min的速度旋转5min，完成对保存液瓶盛料空间9中样本的离心操作。弃上清液驱动转盘至设定位置，所有A吸管各自正对一个保存液瓶盛料空间9液 体内，抽吸盘11向下运动，所有A吸管插入到各自正对的保存液瓶盛料空间9内。驱动与 A总管相连的吸液控制装置，吸液控制装置产生负压，A吸管吸取所有样本的上清液排至废 液池，抽吸盘11向上运动，完成对所有样本的弃上清液操作。加乙醇驱动与A总管相连的乙醇注射控制装置，A吸管向各自正对的保存液瓶盛 料空间9内注射50%乙醇2ml，抽吸盘11向上运动，完成对所有样本的加乙醇操作。重复二次上述离心步骤，再重复二次上述弃上清液步骤。加固定液驱动与A总管相连的福尔马林注射控制装置，A吸管向各自正对的保存 液瓶盛料空间9内注射4%福尔马林缓冲液2ml，抽吸盘11向上运动，完成对所有样本的加 固定液操作。搅拌混勻抽吸盘11向下运动，所有A吸管插入到各自正对的保存液瓶盛料空间 9内，注入细胞缓冲液适量。电脑控制系统用C08000原理在600nm光线下或者Lamb波微来 测量细胞悬液的细胞密度，将细胞密度分为密度小、密度大、密度适中三个等级，对密度小 等级的加细胞缓冲液0. 7ml，密度中等级的加细胞缓冲液1. 0ml，密度大等级的的加细胞缓 冲1.5ml，使各样本管的细胞密度大致相同，确保所制细胞膜片的质量高。随即搅拌细胞悬 液2S，驱动抽吸盘11快速小位移往复转动，由于A吸管上带有浆叶，即使A吸管的小位移运 动，也能达到充分搅拌瓶内液体的效果，抽吸盘11向上运动，完成对所有样本的搅拌混勻 操作。即制得细胞悬液。注细胞悬液抽吸盘11向下运动，所有A吸管插入到各自正对的保存液瓶盛料空 间9内。驱动与A总管相连的吸液控制装置，吸液控制装置产生负压，A吸管在负压作用下 将细胞悬液吸附起，抽吸盘11向上运动，A吸管离开保存液瓶盛料空间9。此时，驱动抽吸 盘11圆心位置的电机，牵引线拉动每个吸管座12向抽吸盘11圆心位置移动，使A吸管正 对保存液瓶通孔空间10位置，驱动与A总管相连的吸液控制装置，释放负压，A吸管向保存 液瓶通孔空间10注细胞悬液0. 5ml。再驱动抽吸盘11圆心位置的电机，牵引线拉动每个吸 管座12继续向抽吸盘11圆心位置移动，使A吸管正对DNA滴定位6，驱动与A总管相连的 吸液控制装置，释放负压，A吸管向DNA滴定位6注细胞悬液0. 5ml。驱动抽吸盘11圆心位 置的电机反向转动，释放牵引线，使所有每个吸管座12回复常态位置，完成对所有样本的 注细胞悬液操作。细胞悬液在DNA滴定位6位置和保存液瓶通孔空间10位置水平状态下自然沉 淀lOmin，再正向和反向转动转盘3次，使细胞膜片上重叠的细胞振落到底层膜片上分布均 勻，即制得单层细胞膜片。Feulgen染色开启恒温控制装置使箱体内保持37°C，盐酸和Schiffs试剂保持 60 "C。①注福尔马林驱动与B总管相连的福尔马林注射控制装置，B吸管向DNA滴定位 注入10%福尔马林缓冲液Iml ；②排废液抽吸盘11向下运动，所有B吸管插入到各自正对的DNA滴定位，驱动与 B总管相连的吸液控制装置，吸液控制装置产生负压，B吸管在负压作用下将余量添加液吸 附起排入废液池；
5[0036]③注盐酸驱动与B总管相连的盐酸注射控制装置，B吸管向DNA滴定位注入 5mol/L盐酸Iml水解5min ；重复步骤②排废液一次；④漂洗驱动与B总管相连的蒸馏水注射控制装置，B吸管向DNA滴定位注入蒸馏 水2ml进行漂洗IOS ；重复步骤②排废液一次；重复步骤④一次；⑤染色驱动与B总管相连的Schiff' s试剂注射控制装置，B吸管向DNA滴定位 注入SchifT' s试剂2ml，染色IOmin ；重复步骤②排废液一次；重复步骤④一次；⑥乙醇脱水驱动与B总管相连的乙醇注射控制装置，B吸管向DNA滴定位注入 95%乙醇2ml进行脱水IOS ；⑦无水乙醇脱水驱动与B总管相连的无水乙醇注射控制装置，B吸管向DNA滴定 位注入无水乙醇2ml进行脱水IOS ；⑧注二甲苯驱动与B总管相连的二甲苯注射控制装置，B吸管向各自正对的DNA 滴定位注入二甲苯1ml，保持5S ；上述每次加试剂程序完成后同时执行一次步骤②排废液动作，即制得细胞DNA的 Feulgen染色片。巴氏染色①A吸管对位驱动抽吸盘11圆心位置的电机，置于槽内吸管座12在牵引线拉动 下，沿槽向抽吸盘11圆心位置移动，使A吸管正对保存液瓶通孔空间10位置；②注缓冲液驱动与A总管相连的缓冲液注射控制装置，A吸管向各自正对的保存 液瓶通孔空间10注入缓冲液1ml，缓冲30S ；③排废液抽吸盘11向下运动，所有A吸管插入到各自正对的保存液瓶通孔空间 10，驱动与A总管相连的吸液控制装置，吸液控制装置产生负压，A吸管在负压作用下将余 量添加液吸附起排入废液池；④注苏木素驱动与A总管相连的苏木素注射控制装置，A吸管向各自正对的保存 液瓶通孔空间10注入苏木素1ml，保持90S ；重复步骤②注缓冲液2次，每次IOS ；⑤冲洗驱动与A总管相连的蒸馏水注射控制装置，A吸管向各自正对的保液瓶通 孔空间10注入蒸馏水2ml，冲洗IOS ；重复步骤⑤冲洗1次；⑥注EA/0G 驱动与A总管相连的EA/0G注射控制装置，A吸管向各自正对的保存 液瓶通孔空间10注入EA/OGlml，保持90S ；重复步骤②注缓冲液2次；⑦无水乙醇脱水驱动与A总管相连的无水乙醇注射控制装置，A吸管向各自正对 的保存液瓶通孔空间10注入无水乙醇2ml进行脱水IOS ；⑧注二甲苯驱动与A总管相连的二甲苯注射控制装置，A吸管向各自正对的保存 液瓶通孔空间10注入二甲苯1ml，保持5S ；⑨吸管座复位驱动抽吸盘11圆心位置的电机反向转动，释放牵引线，所有吸管 座12回复常态位置；[0058]上述每次加试剂程序完成后即执行一次步骤③排废液动作，即制得液基细胞巴氏 染色片。取出玻片，贴好姓名编号标签，在细胞DNA膜位和液基细胞膜位分别加中性树胶 和盖玻片，将制好的液基细胞染色片和细胞DNA染色片，分别由计算机辅助细胞检测系统 和全自动细胞DNA定量倍体分析系统进行扫描阅片，即可同时作出液基细胞TBS分析报告 和细胞DNA定量倍体分析报告。上述制作流程全部由电脑控制系统自动控制。本实用新型每个转盘上设有16个 玻片架卡，每个抽吸盘上设有16个相对应的吸管座，一次可处理32个样本。除应用在宫颈、胸腹水、痰液、尿液、脑脊液、穿刺液等标本制片及染色外，本实用 新型还能对经石蜡或冰冻病理切片做细胞Feulgen染色，用病理图像分析系统中的细胞 DNA定量倍体分析系统报告结果。
权利要求1.一种LCT液基薄层细胞和细胞DNA快速制片与染色一体机，其特征在于所述制片 与染色一体机置于箱体(1)内；玻片架卡座(3)均勻布置在两个转盘(2)上；玻片架卡座 (3)设有卡槽，玻片架(4)通过卡槽结构水平固定在玻片架卡座(3)内；玻片架(4)上设有 保液瓶支座(7)和DNA滴定位(6)；保存液瓶(8)通过螺纹结构固定在保液瓶支座(7)上， 保存液瓶(8)隔离成保存液瓶盛料空间(9)和保液瓶通孔空间(10)，保存液瓶盛料空间 (9)下端封闭，上端开口，保存液瓶通孔空间(10)为上下开口的通孔结构；在两个转盘(2) 的上方设置有两个抽吸盘(11)，抽吸盘(11)上设置有与玻片架卡座(3)相对应槽(13)，吸 管座(12)置于槽(13)内，每个吸管座(12)上安装有A吸管、B吸管两根吸管。
2.根据权利要求1所述的LCT液基薄层细胞和细胞DNA快速制片与染色一体机，其 特征在于抽吸盘(11)的圆心位置安装有电机，每个吸管座(12)的一端用弹簧固定在槽 (13)外端，另一顶用牵引线固定在电机输出轴上；常态下，同一个吸管座(12)上的A吸管 的位置对应一保液瓶通孔空间(10)位置，B吸管对应同一玻片架(4)上的DNA滴定位(6) 位置。
3.根据权利要求1所述的LCT液基薄层细胞和细胞DNA快速制片与染色一体机，其特 征在于抽吸盘(11)上所有A吸管汇集于A总管，所有B吸管集于B总管；A总管分别与缓 冲液注射控制装置、吸液控制装置、苏木素注射控制装置、蒸馏水注射控制装置、EA/0G注射 控制装置、无水乙醇注射控制装置、二甲苯注射控制装置相连，B总管分别与福尔马林注射 控制装置、吸液控制装置、盐酸注射控制装置、蒸馏水注射控制装置、Schiff' s试剂注射 控制装置、乙醇注射控制装置、无水乙醇脱水注射控制装置、二甲苯注射控制装置相连。
4.根据权利要求1所述的LCT液基薄层细胞和细胞DNA快速制片与染色一体机，其特 征在于每个转盘(2)上呈发射状均勻布置有16个玻片架卡座(3)。
5.根据权利要求1所述的LCT液基薄层细胞和细胞DNA快速制片与染色一体机，其特 征在于转盘(2)通过传动装置与驱动电机连接。
6.根据权利要求1所述的LCT液基薄层细胞和细胞DNA快速制片与染色一体机，其特 征在于箱体内设置有恒温控制装置。
7.根据权利要求1所述的LCT液基薄层细胞和细胞DNA快速制片与染色一体机，其特 征在于A吸管上装有浆叶。
8.根据权利要求1所述的LCT液基薄层细胞和细胞DNA快速制片与染色一体机，其特 征在于抽吸盘(11)安装在箱体顶部的升降机构上。
9.根据权利要求1所述的LCT液基薄层细胞和细胞DNA快速制片与染色一体机，其特 征在于玻片架底板(5)上有防止漏液的塑料软足制片框。
专利摘要一种LCT液基薄层细胞和细胞DNA快速制片与染色一体机，该一体机置于箱体内，其玻片架卡座布置在两个转盘上，玻片架通过卡槽结构固定在玻片架卡座内，玻片架上设有保液瓶和DNA滴定位，在两个转盘的上方设置有两个抽吸盘。本实用新型可实现标本处理、制片、染色在一台仪器一次完成。所制标本片质量稳定、细胞完整、分布均匀。而且可实现对样本LCT液基薄层细胞和细胞DNA同时同机快速制片与染色，为液基细胞TBS分析报告和细胞DNA定量倍体分析报告及时、准确的作出提供了坚强的物质保障。本实用新型处理样本批量大、效率高，尤其适合大规模防癌普查和大型专科医院的临床诊断和筛查。
文档编号G01N1/31GK201788111SQ20102054294
公开日2011年4月6日 申请日期2010年9月19日 优先权日2010年9月19日
发明者王伊超, 王珑, 谢爱华 申请人:王珑